一种核酸适配体AS1411修饰的DNA四面体及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种核酸适配体AS1411修饰的DNA四面体，其制备方法包括以下步骤：（1）将AS1411序列接于DNA四面体中任一条DNA单链的5’端，通过DNA合成，将所得DNA粉末用ddH2O将其溶解；（2）测定DNA在波长为260nm和330nm处吸光值，然后计算出四条单链总体积；（3）根据步骤（2）中计算结果，吸取步骤（1）所得DNA与TM buffer混合，漩涡振动混匀后置于PCR仪内，将温度迅速升到95℃稳定10min，再冷却至4℃稳定20min，最后于‑20℃保存，制得。该制备方法简单，制备出的产品可有效解决未经修饰的DNA四面体无法进入细胞核，AS1411无法直接载药的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于DNA四面体
，具体涉及一种核酸适配体AS1411修饰的DNA四面体及其制备方法。
技术介绍
DNA四面体由于其具有良好的生物相容性，较好的稳定性和可修饰性，合成方法较为简便，目前在载药，肿瘤治疗等领域有较大的发展前景。DNA四面体可作为具有良好生物相容性的纳米载药材料。与大部分传统的纳米材料相比，DNA四面体可以通过小窝蛋白介导的内吞途径的机制以及微管依赖的途径有序运输到细胞溶酶体内，并且它可以在细胞中保持结构相当长的时间。文献已经报道DNA四面体可以成功的输送免疫刺激剂CpG进入细胞发挥作用，但是同单独的DNA四面体一样，携载的这些药物同样是进入到了细胞的溶酶体中，被溶酶体迅速降解。AS1411核酸适配体，是可以与核仁素特异性结合的DNA单链，核仁素高表达于细胞核上以及肿瘤细胞膜的表面，并且AS1411能依靠核仁素在细胞内的穿梭作用进入到细胞核中，同时AS1411可以抑制DNA复制使细胞停留在S期从而抑制细胞增殖，通过干扰核仁素和bcl-2的结合从而促进细胞凋亡，AS1411在癌症的治疗诊断等方面有较大的前景。但用AS1411核酸适配体对DNA四面体进行修饰本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种核酸适配体AS1411修饰的DNA四面体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将AS1411序列接于DNA四面体中任一条DNA单链的5’端，通过DNA合成，将所得DNA粉末用ddH2O将其溶解，于4℃条件下保存；（2）通过紫外定量法，测定DNA在波长为260nm和330nm处的吸光值，然后根据以下公式计算出100μL，1μM体系中各单链的体积：V=100/[（A260‑A330）×105/（15.2×单链中腺嘌呤数目+7.4×单链中胞嘧啶的数目+11.4×单链中鸟嘌呤的数目+8.3×单链中胸腺嘧啶的数目）]根据上述计算结果，然后计算四条单链总体积；（3）根据步骤（2）中计算结果，吸取...

【技术特征摘要】
1.一种核酸适配体AS1411修饰的DNA四面体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将AS1411序列接于DNA四面体中任一条DNA单链的5’端，通过DNA合成，将所得DNA粉末用ddH2O将其溶解，于4℃条件下保存；（2）通过紫外定量法，测定DNA在波长为260nm和330nm处的吸光值，然后根据以下公式计算出100μL，1μM体系中各单链的体积：V=100/[（A260-A330）×105/（15.2×单链中腺嘌呤数目+7.4×单链中胞嘧啶的数目+11.4×单链中鸟嘌呤的数目+8.3×单链中胸腺嘧啶的数目）]根据上述计算结果，然后计算四条单链总体积；（3）根据步骤（2）中计算结果，吸取步骤（1）所得DNA，与TMbuffer混合，漩涡振动混匀，最后置于PCR仪内，将温度迅速...

【专利技术属性】
技术研发人员：林云锋，李谦顺，蔡潇潇，林世宇，邵晓茹，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：四川;51