本发明专利技术公开了核酸适配体在识别并结合L选择素中的应用。本发明专利技术首次发现核酸适配体Sgc-3b可以特异性识别并结合L选择素，并利用核酸适配体Sgc-3b与L选择素的特异性结合作用建立了检测L选择素的方法。通过实验证明：本发明专利技术的核酸适配体Sgc-3b具有亲和力高、特异性强、无免疫原性和无毒性等特点，基于核酸适配体Sgc-3b建立的检测L选择素的方法可用于L选择素表达的检测和相关疾病的诊断。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物技术与临床医学
，具体涉及核酸适配体在识别并结合L 选择素中的应用。
技术介绍
核酸适配体（aptamer)是一类能与祀标物质特异性相互作用的单链DNA、RNA、肽 核酸或化学修饰的核酸序列，通常由15-80个核苷酸组成。核酸适配体可以形成特定的三 维结构与靶标分子高亲和力结合，如发卡、假结、G-四链体等结构，高特异性地结合作用是 通过范德华力、氢键、静电作用和疏水作用等分子间相互作用实现的。由于核酸适配体具有 亲和力高、特异性好、无免疫原性、易合成、改造与修饰、生物化学稳定性好、能可逆变性与 复性等特性，所以被称之为"化学抗体"。 核酸适配体可被应用在一些疾病的诊断和检测、药物靶点定位、新药研发和运输 相关药物分子等领域，目前，用于治疗癌症、艾滋病等疾病的核酸适配体也不断涌现。例如， 由Eyetch/Pfizer开发的革El向VEGF的核酸适配体（商品名Macugen) 2004年已获得FDA的 批准，成功地用于治疗年龄相关的黄斑变性。近年提出的利用细胞-SELEX技术筛选特异性 核酸适配体，进而发现肿瘤标志物的方法具有好的应用前景。但目前只有极少数成功的例 子，其中的瓶颈问题就在于位于细胞膜上的核酸适配体靶分子的纯化/鉴定。 L选择素又称CD62L、白细胞内皮细胞黏附分子-I (LECAM-I)、淋巴结归巢受体和 MEL-14。L选择素胞膜外区N端有1个C型凝集素样结构域、1个EGF样结构域和2个CCP 结构域。L选择素表达于造血细胞某些分化阶段，包括大多数B细胞和未致敏T细胞以及大 多数单核细胞、中性粒细胞和嗜酸粒细胞。PMA、细胞因子或趋化剂刺激淋巴细胞和中性粒 细胞后，由于蛋白酶的酶解作用使L选择素迅速消失，而使血浆中有很高水平的可溶型L选 择素。L选择素是体内一种重要的免疫调节因子，可参与细胞的伸展与移动、细胞的信号传 导与活化，是炎症反应、免疫应答、血栓形成、肿瘤转移、创伤愈合等多种生理、病理过程，通 过测定细胞表面L选择素的含量及血清、血浆或其他体液中sL选择素的浓度可以判断疾病 的程度和分析发生机制，对于监测一些炎性或免疫性疾病的发生、发展及治疗效果可能是 一个潜在的实用指标。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供核酸适配体或其衍生物的新用途。 本专利技术提供了核酸适配体或其衍生物在识别并结合或辅助识别并结合L选择素 中的应用； 或核酸适配体或其衍生物在制备识别并结合或辅助识别并结合L选择素的产品 中的应用； 所述核酸适配体为序列1所示的单链DNA分子。 本专利技术还提供了核酸适配体或其衍生物在检测或辅助检测待测样品中是否含有L 选择素中的应用； 或核酸适配体或其衍生物在检测或辅助检测待测样品中L选择素含量中的应用； 或核酸适配体或其衍生物在制备检测或辅助检测待测样品中是否含有L选择素 的产品中的应用； 或核酸适配体或其衍生物在制备检测或辅助检测待测样品中L选择素含量的产 品中的应用； 所述核酸适配体为序列1所示的单链DNA分子。 本专利技术还提供了核酸适配体或其衍生物在检测与抗L选择素的抗体结合的物质 中的应用； 或核酸适配体或其衍生物在制备检测与抗L选择素的抗体结合的物质的产品中 的应用； 所述核酸适配体为序列1所示的单链DNA分子。 本专利技术还提供了核酸适配体或其衍生物在制备诊断和/或治疗炎性疾病或免疫 性疾病的产品中的应用； 所述核酸适配体为序列1所示的单链DNA分子。 上述应用中，所述衍生物为如下（1)-(6)任一所述的核酸适配体的衍生物： (1)将序列1所示的核酸适配体删除或增加一个或几个核苷酸，得到与所述核酸 适配体具有相同功能的核酸适配体的衍生物； (2)将序列1所示的核酸适配体进行核苷酸取代或修饰，得到与所述核酸适配体 具有相同功能的核酸适配体的衍生物； (3)将序列1所示的核酸适配体的骨架改造为硫代磷酸脂骨架，得到与所述核酸 适配体具有相同功能的核酸适配体的衍生物； (4)由序列1所示的核酸适配体编码的RNA分子，得到与所述核酸适配体具有相同 功能的核酸适配体衍生物； (5)由序列1所示的核酸适配体编码的肽核酸，得到与所述核酸适配体具有相同 功能的核酸适配体的衍生物； (6)将序列1所示的核酸适配体的一端或中间接上信号分子和/或活性分子和/ 或功能基团，得到与所述核酸适配体具有相同功能的核酸适配体的衍生物； 所述（6)中的功能基团为生物素基团或荧光基团。 上述应用中，所述核酸适配体的衍生物为在上述核酸适配体的5'端或3'端标记 荧光基团或生物素基团。 上述应用中，所述核酸适配体的衍生物为在上述核酸适配体的5'端标记荧光基团 或生物素基团。 上述应用中，所述待测样品为细胞；所述细胞具体为大鼠肺泡上皮细胞RAEC、人 胚胎肺纤维细胞MRC-5、人肺泡上皮细胞A549、人宫颈癌细胞Hela、人肝癌细胞Huh-7、人膀 胱癌细胞T24、人肝细胞癌细胞SK-Hep-I、人乳腺癌细胞MCF-7、人乳腺癌细胞MCF-7R、人卵 巢癌细胞SK0V-3、人白血病细胞K562、人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人类上皮癌细胞A431、人 类T细胞白血病细胞Jurkat E6-1、人回盲肠腺癌细胞HCT-8、人胚胎肾细胞HEK-293、人前 列腺癌细胞PC-3、人类T细胞淋巴瘤Hut-78、人结肠癌细胞LoVo、急性淋巴母细胞白血病细 胞Molt-4、人T淋巴瘤细胞Sup-Tl或人B细胞淋巴瘤细胞M〇2058。 本专利技术的另一个目的是提供一种产品。 本专利技术提供的产品的活性成分为序列1所示的核酸适配体或其衍生物；所述产品 的用途为如下1)-5)中的至少一种： 1)识别并结合或辅助识别并结合L选择素； 2)检测或辅助检测与抗L选择素的抗体结合的物质； 3)检测或辅助检测待测样品中L选择素的含量； 4)检测或辅助检测待测样品中是否含有L选择素； 5)诊断和/或治疗炎性疾病或免疫性疾病。 上述产品中，所述衍生物为如下（1) - (6)任一所述的核酸适配体的衍生物： (1)将序列1所示的核酸适配体删除或增加一个或几个核苷酸，得到与所述核酸 适配体具有相同功能的核酸适配体的衍生物； (2)将序列1所示的核酸适配体进行核苷酸取代或修饰，得到与所述核酸适配体 具有相同功能的核酸适配体的衍生物； (3)将序列1所示的核酸适配体的骨架改造为硫代磷酸脂骨架，得到与所述核酸 适配体具有相同功能的核酸适配体的衍生物； (4)由序列1所示的核酸适配体编码的RNA分子，得到与所述核酸适配体具有相同 功能的核酸适配体衍生物； (5)由序列1所示的核酸适配体编码的肽核酸，得到与所述核酸适配体具有相同 功能的核酸适配体的衍生物； (6)将序列1所示的核酸适配体的一端或中间接上信号分子和/或活性分子和/ 或功能基团，得到与所述核酸适配体具有相同功能的核酸适配体的衍生物； 所述功能基团为生物素基团或荧光基团。 上述产品中，所述核酸适配体的衍生物为在上述核酸适配体的5'端或3'端标记 荧光基团或生物素基团。 上述产品中，所述核酸适配体的衍生物为在上述核酸适配体的5'端标记荧光基团 或生物素基团。 上述产品中，所述待测样品为细胞；所述细胞具体为大鼠肺泡上皮细胞RAEC、人 胚胎肺纤维细胞MRC-本文档来自技高网...
【技术保护点】
核酸适配体或其衍生物在识别并结合或辅助识别并结合L选择素中的应用；或核酸适配体或其衍生物在制备识别并结合或辅助识别并结合L选择素的产品中的应用；所述核酸适配体为序列1所示的单链DNA分子。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：上官棣华，邴涛，汪寅生，刘祥军，
申请(专利权)人：中国科学院化学研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11
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