一种牛肝菌中烟碱的手性分析方法技术

本发明专利技术公开了一种牛肝菌中烟碱的手性分析方法，其特征在于：将牛肝菌样品干燥、粉碎和过筛，加入萃取液萃取并过滤，经自动固相微萃取后进行多维气相色谱串联质谱分析，采用峰面积归一化法定量检测牛肝菌中S‑(‑)‑烟碱和R‑(+)‑烟碱的比例。本方法提供的检测方法，样品处理简单快捷，方法检出限低，灵敏度高，精密度好，能够满足牛肝菌样品中烟碱的手性分析。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及牛肝菌化学成分测定方法，具体涉及一种牛肝菌中烟碱的手性分析方法。
技术介绍
牛肝菌，又名白牛肝菌、大脚菇、黄荞巴，是一种大型食用真菌。中国是牛肝菌的全球主要产区之一，据粗略统计，中国牛肝菌每年平均产量约5万吨（鲜重），除少量内销外，绝大部分出口。中国牛肝菌的主销市场是欧盟、瑞士、美国和中国香港等国家和地区，其中欧盟是中国牛肝菌产品的第一出口市场，约占整个出口市场份额的90%。然而自2008年9月1日起，德国率先执行欧盟（EC）No.396/2005的规定，即牛肝菌样品中烟碱限量标准为0.01mg/kg（折成干品为0.12mg/kg），欧盟其他进口商也纷纷要求增加对烟碱的抽检。2008年11月17日，德国巴登符腾堡州内政部从市场上抽查了26个牛肝菌样品，其中22个样品被检出烟碱含量超标，这些被抽检样品大部分来自中国。虽然2010年4月，欧盟消费者保护总司以立法的形式对法案（EC）No.396/2005进行了修订，将牛肝菌干品中烟碱的最高限量调整为2.3mg/kg，中国牛肝菌仍有部分产品烟碱含量超标。这一风波不仅严重影响了中国牛肝菌产品的出口，也引起了人们对通过牛肝菌摄入本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种牛肝菌中烟碱的手性分析方法，其特征在于：将牛肝菌样品干燥、粉碎和过筛，加入萃取液萃取并过滤，经自动固相微萃取后进行多维气相色谱串联质谱分析，采用峰面积归一化法定量检测牛肝菌中S‑(‑)‑烟碱和R‑(+)‑烟碱的比例；具体步骤如下：1) 标准溶液的配制：分别称取100.0 mg的S‑(‑)‑烟碱标准品、50.0 mg的R‑(+)‑烟碱标准品，用正己烷配制S‑(‑)‑烟碱和R‑(+)‑烟碱浓度分别为100 μg/mL和50 μg/mL的混合标准溶液，浓度为100 μg/mL的S‑(‑)‑烟碱标准溶液，浓度为100 μg/mL的R‑(+)‑烟碱标准溶液；2)牛肝菌样品的混匀：将牛肝菌样品置于40...

【技术特征摘要】
1.一种牛肝菌中烟碱的手性分析方法，其特征在于：将牛肝菌样品干燥、粉碎和过筛，加入萃取液萃取并过滤，经自动固相微萃取后进行多维气相色谱串联质谱分析，采用峰面积归一化法定量检测牛肝菌中S-(-)-烟碱和R-(+)-烟碱的比例；具体步骤如下：1)标准溶液的配制：分别称取100.0mg的S-(-)-烟碱标准品、50.0mg的R-(+)-烟碱标准品，用正己烷配制S-(-)-烟碱和R-(+)-烟碱浓度分别为100μg/mL和50μg/mL的混合标准溶液，浓度为100μg/mL的S-(-)-烟碱标准溶液，浓度为100μg/mL的R-(+)-烟碱标准溶液；2)牛肝菌样品的混匀：将牛肝菌样品置于40℃烘箱中，1小时后将牛肝菌取出，粉碎后过0.45毫米孔径标准筛；3)牛肝菌样品的萃取：称取约5g牛肝菌粉末，置于100mL锥形瓶中，加入20mL水，40mL正己烷和10mL2mol/L氢氧化钠溶液，具塞震荡萃取1h后，将萃取液避光静置30min；取上层有机相，2000g离心10min后过0.22μm滤膜至螺纹瓶中待进样；4)多维气相色谱串联质谱分析，将步骤3）的过滤液再经自动固相微萃取后进行多维气相色谱串联质谱分析，具体条件如下：①自动固相微萃取条件：固定相：聚二甲基硅氧烷/二乙烯基苯即PDMS/DVB；样品加热温度30℃，预热3min，萃取时间5min，解吸5min，进样后在250℃烤针10min；②一维分析条件：色谱柱：30m×0.25mm×0.25μm，5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷毛细管色谱柱；进样口温度：250℃。2.载气：氦气，纯度≥99.999%，恒压进样：117.9kPa；升温程序：初始温度80℃，平衡时间1min，以10℃/min的速率至200℃，保持10min；检测器：火焰离子化检测器（FID）；温度：280℃；氢气：40mL/min；空气：...

【专利技术属性】
技术研发人员：付亚宁，韩书磊，刘彤，陈欢，侯宏卫，胡清源，
申请(专利权)人：国家烟草质量监督检验中心，
类型：发明
国别省市：河南;41