【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分析化学领域，具体说是涉及一种判别烟草代谢组学研究所用的新鲜烟叶样品质量是否满足代谢组学研究需要的判别方法。
技术介绍
植物代谢组学是通过考察植物受刺激或扰动后期代谢产物的变化或其随时间的变化，来研究植物体的一种技术。在代谢组学轮廓分析的流程中，典型样品的采集是首要并且极其重要的步骤，获得合格样品，以真实客观的反映样品的代谢状态，是代谢组学分析进行的基础和前提。新鲜烟叶样品的采集，需要在低温下淬灭以停止其生理活动以保证其停止在采样时的代谢状态，标准做法为采摘植物样品后，锡纸包裹，置于-196℃液氮冷冻，用于新鲜烟叶样品分析或者冻干后干粉样品分析。在样品采摘到分析前的这一段过程，需保证新鲜烟叶样品在液氮中保存且在液氮条件下研磨，否则会造成烟叶的酶促褐变。由于烟叶样品保存不当而导致的质量发生变化，代谢物水平不能反映烟叶样品真实状态的情况时有发生。急需一种简单、快速的分析方法对植物代谢组学研究中的烟叶样品质量进行判别。烟叶萜类化合物与烟叶香气品质密切相关，它们不但是烟叶重要的香气前提物质，而且它们的降解产物是烟叶最重要的香气来源之一。同时，萜类代谢是烟叶...
【技术保护点】
一种基于萜类的烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量的判别方法，其特征在于：通过检测新鲜烟叶中植醇和角鲨烯含量，计算其比值，采用气相色谱串联质谱GC‑MS对代谢组学研究中的新鲜烟叶样品中植醇和角鲨烯进行绝对定量分析；具体制备方法如下：a、称取10~25g的冻干研磨烟叶样品，加入作为提取溶剂的正己烷0.75~1.5 mL，室温下超声提取30min，离心，将上清液转移到样品瓶中，并用氮气吹干；提取后的残渣加入0.6~1.2mL由甲醇和氢氧化钾溶液按4:1的体积比组成的混合液，70℃下振荡提取30min，离心，将上清液转移到Eppendorf管中；加入0.5~1.0mL正己烷，进行萃取；...
【技术特征摘要】
1.一种基于萜类的烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量的判别方法，其特征在于：通过检测新鲜烟叶中植醇和角鲨烯含量，计算其比值，采用气相色谱串联质谱GC-MS对代谢组学研究中的新鲜烟叶样品中植醇和角鲨烯进行绝对定量分析；具体制备方法如下：a、称取10~25g的冻干研磨烟叶样品，加入作为提取溶剂的正己烷0.75~1.5mL，室温下超声提取30min，离心，将上清液转移到样品瓶中，并用氮气吹干；提取后的残渣加入0.6~1.2mL由甲醇和氢氧化钾溶液按4:1的体积比组成的混合液，70℃下振荡提取30min，离心，将上清液转移到Eppendorf管中；加入0.5~1.0mL正己烷，进行萃取；涡旋6s，离心1min；之后转移到上述样品瓶中，并用氮气吹干；衍生化：加入50~100μL20mg/mL甲氧胺盐酸盐-吡啶溶液，40~60℃反应60~90分钟，再加入50~100μLN-甲基-N-(三甲基硅基)三氟乙酰胺溶液，在40~60℃条件下反应30~90分钟，进GC/MS分析，采用保留时间和选择离子（SIM）模式定性，检测萜类物质的含量；b、GC/MS分析方法的气相色谱参数：色谱柱：DB-35MS(30m×0.25mmi.d.×0.25μmd.f.)；程序升温：起始温度60℃（3min），25℃/min的速度升至210℃，0.8℃/min的速度升至220℃，15℃/min的速度升至310℃（13min）；载气：氦气；柱流速：1.0mL/min；进样口温度：250℃；进样量2µL，分流进样，分流比10...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈霞，郑庆霞，周会娜，金立锋，李锋，徐国云，张慧，李泽锋，王燃，魏攀，
申请(专利权)人：中国烟草总公司郑州烟草研究院，
类型：发明
国别省市：河南;41
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