用于抗体和抗体负载树突状细胞介导治疗的方法和组合物技术

本文提供了用于诱导个体(例如，患有癌症的个体)中的免疫应答的方法、组合物和试剂盒。方法的方面包括施用具有同种IgG抗体的抗体组合物，以及施用激活抗原提呈细胞的疗法。在一些情况下，抗体组合物包含具有多种结合特异性的多克隆同种IgG抗体。在一些情况下，多克隆抗体来自合并自2个或更多个个体的血清。在一些情况下，所述方法包括施用抗原提呈细胞刺激剂。方法的方面还包括将来自个体的抗原提呈细胞(树突状细胞(DC))与靶抗原和具有同种IgG抗体的抗体组合物接触以产生负载APC，其可用于诱导个体中的免疫应答。方法的方面还包括将个体的T细胞与负载APC接触。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】交叉引用本申请要求2014年1月22日提交的美国临时专利申请第61/930,386号和2014年10月21日提交的美国临时专利申请第62/066,574号的权益，所述申请各自通过引用全文并入本文。政府权利本专利技术在国立卫生研究院授予的合同CA141468项下的支持下获得。政府对本专利技术享有一定权利。专利技术背景虽然免疫系统有能力区分自体(self)与非自体(non-self)之间的细微差别，但是癌症仍然趋向于生长和扩散，通常导致其宿主死亡。对于肿瘤相关抗原(TAA)的适应性T细胞反应可以在这种环境下发生，导致在可变时间段内的肿瘤消退或者肿瘤生长中止。然而，大部分肿瘤最终藉助免疫编辑而发生免疫逃逸，肿瘤细胞通过选择不适当表达由效应T细胞识别的抗原的变异体而通过该过程逃脱免疫检测。与自体肿瘤相反，源自遗传不同的个体或小鼠品系的同种异基因肿瘤在被转移到在免疫学完整的宿主时被可靠地排斥，就像是被移植的同种异体器官。值得注意的是，这甚至在肿瘤与宿主共有主要组织相容性复合体(MHC)抗原的相同等位基因时发生，所述抗原长期被认为是移植物排斥的主要决定因素。在这些条件下，加工并提呈与MHC I或II类分子相关的多种次要组织相容性抗原，导致产生以抗原特异性方式攻击肿瘤的效应T细胞。这样的抗原通常由常见蛋白质的多态性序列构成，但也可以由基因缺失，肽的细胞内加工和其他细胞内机制的差异产生。据推测，由于由同种异基因肿瘤表达的独特蛋白质的数量和种类，这些肿瘤不能逃脱宿主T细胞反应。实际上，源自供体的T细胞对于次要组织相容性抗原的识别据信是同种异基因造血细胞移植物之所以可以治愈某些癌症的主要原因。不管肿瘤类型或背景如何，抗原提呈细胞(APC)被认为负责加工TAA并将其提呈给T细胞。在APC之中，经典活化的树突状细胞(DC)和巨噬细胞可以引起T细胞介导的免疫应答，其介导肿瘤细胞毒性和肿瘤消退。用TAA体外加载和激活DC可以在晚期癌症患者中诱导临床上明显的抗肿瘤免疫应答。尽管如此，肿瘤相关DC通常未能在自体环境中诱导有效应答，并且甚至可以抑制抗肿瘤免疫。考虑到使肿瘤能够逃脱免疫介导的破坏的广泛机制，APC藉以产生对抗同种异基因肿瘤的有效免疫应答的机制仍然未得到解释，虽然这些过程具有重要的临床意义。本领域需要用于诱导有效的抗肿瘤免疫应答的组合物和方法。确定负责在同种异基因环境中诱导有效的抗肿瘤免疫的机制使得能够发现和开发新颖且有效的自体肿瘤治疗方法。出版物Steinman等人,Nature.2007年9月27日；449(7161):419-26；Kurts等人,Nat Rev Immunol.2010年6月；10(6):403-14；Trombetta等人,Annu Rev Immunol.2005年；23:975-1028；Fong等人,J Immunol.2001年3月15日；166(6):4254-9；Hsu等人,Nat Med.1996年1月；2(1):52-8；Fong等人,Annu Rev Immunol.2000年；18:245-73；Gilboa等人,J Clin Invest.2007年5月；117(5):1195-203；Melief等人,Immunity.2008年9月19日；29(3):372-83；Palucka等人,Immunity.2013年7月25日；39(1):38-48；Tseng等人,Proc Natl Acad Sci U S A.2013年7月2日；110(27):11103-8；Schuurhuis等人,J Immunol.2006年4月15日；176(8):4573-80；美国专利申请第US20020155108号；和美国专利第8518405号。
技术实现思路
提供了用于治疗患有癌症的个体的方法。所述方法的方面包括将下述施用于个体：(i)包含特异性结合个体的癌细胞抗原的同种IgG抗体的抗体组合物；和(ii)激活个体的树突状细胞的疗法。在一些情况下，抗体组合物包含具有多种结合特异性的多克隆同种IgG抗体。在一些情况下，多克隆同种IgG抗体可以是一组单克隆抗体(例如，具有确定的靶抗原特异性)。在一些情况下，多克隆同种IgG抗体可以来自于一个或多个个体的血清(例如，来自一个个体的血清、合并自两个或更多个个体的血清，等等)。在一些情况下，抗体组合物包含静脉内注射免疫球蛋白(IVIG)或者从IVIG纯化或富集的抗体。在一些情况下，激活个体的树突状细胞的疗法包括使个体暴露于局部辐照。在一些情况下，激活个体的树突状细胞的疗法包括将具有树突状细胞刺激剂的刺激组合物施用于个体。在一些情况下，树突状细胞刺激剂被缀合到同种IgG抗体。在一些情况下，刺激组合物包含CD40激动剂和促炎性细胞因子(例如，TNFα、IFNγ、等等)。在一些情况下，刺激组合物包含Toll样受体(TLR)激动剂。提供了用于诱导个体中的免疫应答的方法。所述方法的方面包括：(a)将来自个体的树突状细胞(DC)(例如，来自个体的树突状细胞的群体)与靶抗原和具有特异性地结合靶抗原的同种IgG抗体的抗体组合物在对于由DC摄取靶抗原有效的剂量下体外接触对于由DC摄取靶抗原有效的一段时间，由此产生负载DC(loaded DC)(例如，负载DC的群体)；和(b)将个体的T细胞(例如，个体的T细胞的群体)与负载DC接触，其中负载DC将抗原提呈给T细胞以产生接触的T细胞(contacted T cell)，并且接触的T细胞产生对于被提呈的抗原特异性的免疫应答。在一些情况下，DC来自患有癌症的个体并且靶抗原与癌症相关。在一些情况下，DC与来自个体的癌细胞接触。在一些情况下，DC与来自个体的癌细胞的裂解物接触。在一些情况下，DC与来自个体的癌细胞的一种或多种(例如，两种或更多种)质膜蛋白接触。在一些情况下，DC与包含DC刺激剂的刺激组合物接触。在一些情况下，刺激组合物包含CD40激动剂和促炎性细胞因子。在一些情况下，刺激组合物包含TLR激动剂。在一些情况下，DC刺激剂被缀合到同种IgG抗体。在一些情况下，在接触DC之前，靶抗原(例如，靶细胞、癌细胞裂解物/提取物、具有两种或更多种质膜蛋白的组合物)与抗体组合物接触，产生免疫复合体。因此，在一些情况下，所述方法包括将DC与免疫复合体接触。在一些情况下，DC同时与靶抗原和抗体组合物接触。在一些情况下，体内进行接触T细胞的步骤并且所述方法包括将负载DC引入到个体中。在一些情况下，体外进行接触T细胞的步骤并且所述方法包括将接触的T细胞引入到个体中。还提供了用于实施本公开的方法的组合物和试剂盒。在一些情况下，所述组合物包含：具有多种结合特异性的多克隆同种IgG抗体；和至少一种DC刺激剂。在一些情况下，所述组合物包含：具有多种结合特异性的多克隆同种IgG抗体；CD40激动剂；和促炎性细胞因子(例如，TNFα、IL-1α、IL-1β、IL-19、干扰素γ(IFNγ)等等)。在一些情况下，DC刺激剂被缀合到组合物的同种IgG抗体中的至少一种。在一些情况下，所述组合物包含静脉内注射免疫球蛋白(IVIG)或者从IVIG纯化或富集的抗体。在一些情况下，所述组合物包含IVIG或者从IVIG纯化或富集的抗体，其中组合物中存在的同种I本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗患有癌症的个体的方法，所述方法包括：将下述施用于所述个体：(i)包含结合所述个体的癌细胞的抗原的同种IgG抗体的抗体组合物；和(ii)激活所述个体的APC的疗法，其中所述APC是树突状细胞、巨噬细胞或B细胞，由此治疗所述患有癌症的个体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.01.22 US 61/930,386;2014.10.21 US 62/066,5741.一种治疗患有癌症的个体的方法，所述方法包括：将下述施用于所述个体：(i)包含结合所述个体的癌细胞的抗原的同种IgG抗体的抗体组合物；和(ii)激活所述个体的APC的疗法，其中所述APC是树突状细胞、巨噬细胞或B细胞，由此治疗所述患有癌症的个体。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述同种IgG抗体结合所述个体中的所述癌细胞上的所述抗原以形成免疫复合体。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述激活APC包括在所述个体中由所述APC摄取所述免疫复合体并且将所述癌细胞的多种抗原提呈给T细胞。4.根据权利要求3所述的方法，其中被提呈给T细胞的所述多种抗原中的至少一种与所述免疫复合体中的所述抗原不同。5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法减少所述个体中的癌细胞数量。6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述癌症是实体肿瘤。7.根据权利要求6所述的方法，其中所述实体肿瘤直径小于1cm。8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述个体是人。9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述同种IgG抗体结合以至少1000个拷贝存在于所述癌细胞的表面上的抗原。10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述同种IgG抗体以与非癌细胞上的抗原相比高至少100、1000、10000倍的亲和力(低100、1000、10000倍的Kd)结合所述癌细胞上的所述抗原，其中与所述非癌细胞上的所述抗原相比，所述癌细胞上的所述抗原具有一种或多种多态性。11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中与所述同种IgG抗体结合非癌细胞相比，所述同种IgG抗体以更高的亲合力结合所述癌细胞。12.根据权利要求1所述的方法，其中激活树突状细胞的所述疗法包括包含树突状细胞刺激剂的树突状细胞刺激组合物。13.根据权利要求12所述的方法，其中所述树突状细胞刺激组合物包含选自以下的一种或多种树突状细胞刺激剂：(i)Toll样受体(TLR)激动剂；(ii)CD40激动剂；(iii)CD40激动剂与促炎性细胞因子；(iv)检查点分子中和化合物；(v)吲哚胺2,3-二加氧酶(IDO)抑制剂；(vi)NFkB激活剂；(vii)打开钙通道的化合物；和(viii)T细胞相关共刺激分子。14.根据权利要求12或权利要求13所述的方法，其中所述树突状细胞刺激组合物包含CD40激动剂与促炎性细胞因子。15.根据权利要求13或权利要求14所述的方法，其中所述促炎性细胞因子是肿瘤坏死因子α(TNFα)和/或IFNγ。16.根据权利要求12到15中任一项所述的方法，其中所述树突状细胞刺激剂被缀合到同种IgG抗体。17.根据权利要求1所述的方法，其中激活B细胞的所述疗法包括含有B细胞刺激剂的B细胞刺激组合物。18.根据权利要求17所述的方法，其中所述B细胞刺激组合物包含选自以下的一种或多种B细胞刺激剂：(i)Toll样受体(TLR)激动剂；(ii)CD40激动剂；(iii)CD40激动剂与促炎性细胞因子；(iv)结合B细胞受体的抗原；(v)抗独特型抗体；和(vi)交联表面免疫球蛋白的试剂。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述促炎性细胞因子是IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-6、IL-7、IL-9、IL-10、IL-12、IL-15、IL-18、IL-21、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、G-CSF或GM-CSF。20.根据权利要求18所述的方法，其中所述TLR激动剂是CpGODN、免疫刺激性DNA、免疫刺激性RNA、免疫刺激性寡核苷酸、咪喹莫特、瑞喹莫德、洛索立宾、Flagellin、FSL-I或LPS。21.根据权利要求18所述的方法，其中所述抗原是自体抗原、同种抗原、肽抗原、核酸抗原、碳水化合物抗原或肿瘤相关抗原。22.根据权利要求18所述的方法，其中所述交联表面免疫球蛋白的试剂是抗Ig抗体、抗独特型抗体或抗同种型抗体。23.根据权利要求17到22中任一项所述的方法，其中所述B细胞刺激剂被缀合到同种IgG抗体。24.根据权利要求1所述的方法，其中激活巨噬细胞的所述疗法包括含有巨噬细胞刺激剂的巨噬细胞刺激组合物。25.根据权利要求24所述的方法，其中所述巨噬细胞刺激组合物包含选自以下的一种或多种巨噬细胞刺激剂：(i)Toll样受体(TLR)激动剂；(ii)巨噬细胞激活性细胞因子；和(iii)糖皮质激素受体激动剂。26.根据权利要求25所述的方法，其中所述巨噬细胞激活性细胞因子是IL-1、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、TNF-α、TNF-β、G-CSF、GM-CSF或IFN-γ。27.根据权利要求25所述的方法，其中所述TLR激动剂是TLR4激动剂或TLR2激动剂。28.根据权利要求27所述的方法，其中所述TLR4激动剂或TLR2激动剂是脂多糖、胞壁酰二肽、脂磷壁酸或细菌热休克蛋白。29.根据权利要求24到28中任一项所述的方法，其中所述巨噬细胞刺激剂被缀合到同种IgG抗体。30.根据权利要求1到29中任一项所述的方法，其中所述癌细胞的所述抗原是在癌细胞中富集的抗原。31.根据权利要求1到30中任一项所述的方法，其中所述同种IgG抗体是单克隆抗体。32.根据权利要求1到31中任一项所述的方法，其中所述抗体组合物包含两种或更多种同种IgG抗体，其中所述两种或更多种同种IgG抗体中的至少两种特异性地结合不同抗原。33.根据权利要求1到32中任一项所述的方法，其中所述抗体组合物包含两种或更多种同种IgG抗体，其中所述两种或更多种同种IgG抗体中的至少两种特异性地结合相同抗原的不同表位。34.根据权利要求32或权利要求33所述的方法，其中所述两种或更多种同种IgG抗体中的至少两种是单克隆抗体。35.根据权利要求1到34中任一项所述的方法，其中(a)所述抗体组合物；和(b)激活所述个体的APC的所述疗法中的至少一个通过局部注射施用到(i)肿瘤中或肿瘤附近和/或(ii)肿瘤切除部位中或肿瘤切除部位附近。36.根据权利要求1到35中任一项所述的方法，其中(a)所述抗体组合物；和(b)激活所述个体的APC的所述疗法中的至少一个在脂质体、微粒或纳米颗粒中施用。37.根据权利要求1到34中任一项所述的方法，其中所述APC是树突状细胞。38.根据权利要求1到34中任一项所述的方法，其中所述APC是巨噬细胞。39.根据权利要求1到34中任一项所述的方法，其中所述APC是B细胞。40.一种治疗患有癌症的个体的方法，所述方法包括：向所述个体施用：(i)包含结合癌细胞上的多种抗原的多克隆同种IgG抗体的抗体组合物；和(ii)激活所述个体的抗原提呈细胞(APC)的疗法，其中所述APC是树突状细胞、巨噬细胞或B细胞。41.根据权利要求40所述的方法，其中所述多克隆同种IgG抗体来自于第二个体的血清。42.根据权利要求40所述的方法，其中所述多克隆同种IgG抗体合并自2个或更多个个体。43.根据权利要求40到42中任一项所述的方法，其中所述同种IgG抗体中的至少一种的靶抗原未被预先确定。44.根据权利要求40到43中任一项所述的方法，其中激活树突状细胞的所述疗法包括包含树突状细胞刺激剂的树突状细胞刺激组合物。45.根据权利要求44所述的方法，其中所述树突状细胞刺激组合物包含选自以下的一种或多种树突状细胞刺激剂：(i)Toll样受体(TLR)激动剂；(ii)CD40激动剂；(iii)CD40激动剂与促炎性细胞因子；(iv)检查点分子中和化合物；(v)吲哚胺2,3-二加氧酶(IDO)抑制剂；(vi)NFkB激活剂；(vii)打开钙通道的化合物；和(viii)T细胞相关共刺激分子。46.根据权利要求44或权利要求45所述的方法，其中所述树突状细胞刺激组合物包含CD40激动剂与促炎性细胞因子。47.根据权利要求45或权利要求46所述的方法，其中所述促炎性细胞因子是肿瘤坏死因子α(TNFα)和/或IFNγ。48.根据权利要求44到47中任一项所述的方法，其中所述树突状细胞刺激剂被缀合到所述同种IgG抗体中的至少一种。49.根据权利要求40所述的方法，其中激活B细胞的所述疗法包括含有B细胞刺激剂的B细胞刺激组合物。50.根据权利要求49所述的方法，其中所述B细胞刺激组合物包含选自以下的一种或多种B细胞刺激剂：(i)Toll样受体(TLR)激动剂；(ii)CD40激动剂；(iii)CD40激动剂与促炎性细胞因子；(iv)结合B细胞受体的抗原；(v)抗独特型抗体；和(vi)交联表面免疫球蛋白的试剂。51.根据权利要求50所述的方法，其中所述促炎性细胞因子是IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-6、IL-7、IL-9、IL-10、IL-12、IL-15、IL-18、IL-21、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、G-CSF或GM-CSF。52.根据权利要求51所述的方法，其中所述TLR激动剂是CpGODN、免疫刺激性DNA、免疫刺激性RNA、免疫刺激性寡核苷酸、咪喹莫特、瑞喹莫德、洛索立宾、Flagellin、FSL-I或LPS。53.根据权利要求50所述的方法，其中所述抗原是自体抗原、同种抗原、肽抗原、核酸抗原、碳水化合物抗原或肿瘤相关抗原。54.根据权利要求50所述的方法，其中所述交联表面免疫球蛋白的试剂是抗Ig抗体、抗独特型抗体或抗同种型抗体。55.根据权利要求49到54中任一项所述的方法，其中所述B细胞刺激剂被缀合到同种IgG抗体。56.根据权利要求40所述的方法，其中激活巨噬细胞的所述疗法包括含有巨噬细胞刺激剂的巨噬细胞刺激组合物。57.根据权利要求56所述的方法，其中所述巨噬细胞刺激组合物包含选自以下的一种或多种巨噬细胞刺激剂：(i)Toll样受体(TLR)激动剂；(ii)巨噬细胞激活性细胞因子；和(iii)糖皮质激素受体激动剂。58.根据权利要求57所述的方法，其中所述巨噬细胞激活性细胞因子是IL-1、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、TNF-α、TNF-β、G-CSF、GM-CSF或IFN-γ。59.根据权利要求57所述的方法，其中所述TLR激动剂是TLR4激动剂或TLR2激动剂。60.根据权利要求59所述的方法，其中所述TLR4激动剂或TLR2激动剂是脂多糖、胞壁酰二肽、脂磷壁酸或细菌热休克蛋白。61.根据权利要求56到60中任一项所述的方法，其中所述巨噬细胞刺激剂被缀合到同种IgG抗体。62.根据权利要求40到61中任一项所述的方法，其中(a)所述抗体组合物；和(b)激活所述个体的APC的所述疗法中的至少一个通过局部注射施用到(i)肿瘤中或肿瘤附近和/或(ii)肿瘤切除部位中或肿瘤切除部位附近。63.根据权利要求40到62中任一项所述的方法，其中(a)所述抗体组合物；和(b)激活所述个体的APC的所述疗法中的至少一个在脂质体、微粒或纳米颗粒中施用。64.根据权利要求40到63中任一项所述的方法，其中所述多克隆同种IgG抗体是两种或更多种单克隆抗体。65.根据权利要求64所述的方法，其中所述两种或更多种单克隆抗体中的至少两种特异性地结合在癌细胞中富集的抗原。66.根据权利要求64或权利要求65所述的方法，其中所述两种或更多种单克隆抗体中的至少两种特异性地结合不同抗原。67.根据权利要求64或权利要求65所述的方法，其中所述两种或更多种单克隆抗体中的至少两种特异性地结合相同抗原上的两个不同表位。68.根据权利要求40到67中任一项所述的方法，其中所述多克隆同种IgG抗体结合所述个体中所述癌细胞上的抗原以形成免疫复合体。69.根据权利要求68所述的方法，其中所述激活APC包括在所述个体中由所述APC摄取所述免疫复合体和将所述癌细胞的多种抗原提呈给T细胞。70.根据权利要求69所述的方法，其中被提呈给T细胞的所述多种抗原中的至少一种与所述免疫复合体中所述抗原中的任一种不同。71.根据权利要求40到69中任一项所述的方法，其中所述方法减少所述个体中的癌细胞数量。72.根据权利要求40到71中任一项所述的方法，其中所述癌症是实体肿瘤。7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【专利技术属性】
技术研发人员：E·G·恩格勒曼，Y·卡米，
申请(专利权)人：小利兰斯坦福大学托管委员会，
类型：发明
国别省市：美国;US