一种倍半萜类化合物、其制备方法及其在制备抗烟草花叶病毒药物中的应用技术

本发明专利技术公开了一种倍半萜类化合物，其特征在于，具有如下结构：该化合物的命名为：2-羟基-4-异丙基-7-甲氧基-6-甲基-1-萘甲酸甲酯。本发明专利技术还公开了所述的倍半萜类化合物的制备方法及在制备抗烟草花叶病毒药物中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于烟草化学
，具体涉及一种从烟草中首次提取得到的倍半萜类化合物。同时，本专利技术还涉及该化合物的制备方法和在抗烟草花叶病毒中的应用。
技术介绍
烟草是世界上化学成分最为复杂的植物，次生代谢产物非常丰富，经过几十年的研究，人们目前从烟草中鉴定出来的单体化学物质就超过3000多种，而且还有许多成分尚未鉴定出来。虽然吸烟有害健康已得到广泛认可，但烟草仍然对成千上万的消费者有着强大的吸引力，除尼古丁的成瘾性外，烟草中丰富的香味物质也发挥着重要作用。倍半萜(sesquiterpenes)是指分子中含15个碳原子的天然萜类化合物。倍半萜类化合物分布较广，在植物体内常以醇、酮、内酯等等形式存在于挥发油中，是挥发油中高沸点部分的主要组成部分。多具有较强的香气和生物活性，是医药、食品、化妆品工业的重要原料。为了研究这类化合物的构效关系，可进一步研究和开发更多的倍半萜类化合物，从中寻找有效的先导化合物和活性基团。
技术实现思路
本专利技术第一方面涉及一种倍半萜类化合物，其具有如下结构：该化合物的命名为：2-羟基-4-异丙基-7-甲氧基-6-甲基-1-萘甲酸甲酯，英文名为：methyl 2-hydroxy-4-isopropyl-7-methoxy-6-methyl-1-naphthoate；其分子式为C17H20O4。本专利技术第二方面涉及所述的倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)浸膏提取:以烟叶为原料，将烟叶粉碎或切成小段，用重量百分浓度80％～100％的甲醇或乙醇、或重量百分浓度60％～90％的丙酮为提取溶剂，提取溶剂与烟叶的重量比为2～
4:1，浸泡24h～72h，提取3～5次，合并提取液、过滤浓缩成浸膏；(2)硅胶柱层析：将步骤(1)得到的浸膏用其重量比2～4倍量的160～300目硅胶干法装柱进行硅胶柱层析，以氯仿-丙酮体积配比为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1和1:2的溶液进行梯度洗脱，合并相同的部分，收集各部分洗脱液并浓缩；(3)高压液相色谱分离：收集步骤(2)氯仿-丙酮体积配比为8:2部分的洗脱液，进一步用高压液相色谱分离即得所述的倍半萜化合物；(4)分离纯化：将步骤(3)得到的倍半萜化合物用甲醇溶解，再以甲醇为流动相，用凝胶柱层析分离，以进一步分离纯化得到所述的倍半萜化合物。优选地，步骤(3)中，所述的高压液相色谱分离纯化是采用21.2mm×250mm，5μm的C18色谱柱，流速为20mL/min，流动相为48％的甲醇，紫外检测器检测波长为335nm，每次进样200μL，收集32.6min的色谱峰，多次累加后蒸干。优选地，步骤(2)中所述的浸膏在经硅胶柱层析粗分前，用重量比1.5～3倍量的纯甲醇或纯乙醇或纯丙酮溶解后，用重量比0.8～1.2倍的80～100目硅胶拌样。本专利技术第三方面涉及所述的倍半萜化合物在制备抗烟草花叶病毒药物中的应用。表1.化合物的1H NMR和13C NMR数据(溶剂为C5D5N)以上述方法制备得到的倍半萜类化合物的结构通过以下方法进行测定。本专利技术化合物为浅黄色胶状物；紫外光谱(溶剂为甲醇),λmax(logε)210(4.22)、232(3.87)、335(3.65)nm；红外光谱(溴化钾压片)νmax3426、3055、2934、1715、1648、1610、1546、1460、1354、1257、1203、1136、960、884cm-1；高分辨质谱(HRESIMS)给出准分子离子峰m/z 311.1252[M+Na]+(计算值311.1259)。结合1H和13C NMR谱给出一个分子式C17H20O4，不饱和度为8。红外光谱数据证实化合物中存在羟基(3426cm-1)、羰基(1715,1648cm-1)和芳环(1610,1546,1460
cm-1)功能团，紫外光谱在335和232nm处有强吸收也证实化合物中存在芳环结构。从1H和13CNMR谱(数据归属见表-1)信号可以看出化合物中有一个1,2,4,6,7-五取代的萘环(C-1～C-10；H-3，H-6和H-8)、一个异丙基(C-11～C-13；H-11，H6-12,13)、一个甲酸酯基(C-14、-OMe-14)、1个甲基(C-15，H3-15)、1个甲氧基(-OMe-7)，以及1个酚羟基(Ar-OH-2)；这些信号表明化合物为芳构化的倍半萜(Journal of Natural Products.,2013,76(6):1058-1063)。化合物的母核得到确认后，剩余的甲基、异丙基、甲氧基和酚羟基为母核上的取代基。根据H-11和C-3、C-4、C-10，H-12,13和C-4，以及H-3和C-11的HMBC(图-3)相关可证实异丙基取代在萘环的C-4位；根据H3-15和C-5、C-6、C-10的HMBC相关，可证实该甲基取代在母核的C-6位；根据甲氧基氢(δH3.84s)和C-7有HMBC相关，可证实甲氧基分别取代在母核的C-7位；根据酚羟基氢(δH11.93)和C-1、C-2、C-3的HMBC相关，可证实酚羟基取代在母核的C-2位；根据H-8和C-1有HMBC相关，以及H-3和酯羰基(C-14)没有HMBC相关，可推测酯羰基取代在母核的C-1位。至此本化合物的结构得以确定，该化合物命名为：2-羟基-4-异丙基-7-甲氧基-6-甲基-1-萘甲酸甲酯。采用半叶法进行了本专利技术化合物的抗烟草花叶病毒活性测试，结果明本化合物的相对抑制率为45.7％，超过对照宁南霉素的相对抑制率31.5％，说明化合物有很好的抗烟草花叶病毒活性。本专利技术的有益效果1、本专利技术的倍半萜类化合物是首次被分离，结构新颖。至今尚未见到相关报道。2、本专利技术的倍半萜类化合物原料易得，提取方法简单；所获得的本专利技术化合物纯度高，后续的工业化生产容易实现。3、本专利技术的倍半萜类化合物具有很好的抗烟草花叶病毒活性，可作为抗花叶病毒药物研发的先导性化合物用于抗花叶病毒药物制剂研发。附图说明图1为本专利技术的倍半萜类化合物的核磁共振碳谱；图2为本专利技术的倍半萜类化合物的核磁共振氢谱；图3为本专利技术的倍半萜类化合物的主要HMBC相关。图4为本专利技术的倍半萜类化合物的结构式。具体实施方式下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步的详细说明，但不以任何方式对本专利技术加以限制，基于本专利技术教导所作的任何变换或改进，均落入本专利技术的保护范围。制备倍半萜类化合物C17H20O4，包括浸膏提取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离，具体采用以下步骤：(1)浸膏提取：取烟叶粉碎，用高浓度甲醇(w％：95％)或高浓度乙醇(w％：95％)或高浓度丙酮(w％：70％)为提取溶剂，提取溶剂：烟草(重量比)＝3:5，浸泡54h，提取4次，合并提取液、过滤浓缩成浸膏。(2)硅胶柱层析：浸膏用重量比2.5倍量的纯甲醇或纯乙醇或纯丙酮溶解后用重量比1.2倍的80～100目硅胶拌样，用重量比3倍量的250目硅胶干法装柱进行硅胶柱层析；以体积配比为(1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1和1:2)的氯仿-丙酮溶液进行梯度洗脱，合并相同的部分，收集各部分洗脱液并浓缩。(3)高压液相色谱分离：柱层析洗脱液的8:2部分进一步用高压液相色谱分离本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种倍半萜类化合物，其特征在于，具有如下结构：该化合物的命名为：2‑羟基‑4‑异丙基‑7‑甲氧基‑6‑甲基‑1‑萘甲酸甲酯。

【技术特征摘要】
1.一种倍半萜类化合物，其特征在于，具有如下结构：该化合物的命名为：2-羟基-4-异丙基-7-甲氧基-6-甲基-1-萘甲酸甲酯。2.一种根据权利要求1所述的倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)浸膏提取:以烟叶为原料，将烟叶粉碎或切成小段，用重量百分浓度80％～100％的甲醇或乙醇、或重量百分浓度60％～90％的丙酮为提取溶剂，提取溶剂与烟叶的重量比为2～4:1，浸泡24h～72h，提取3～5次，合并提取液、过滤浓缩成浸膏；(2)硅胶柱层析：将步骤(1)得到的浸膏用其重量比2～4倍量的160～300目硅胶干法装柱进行硅胶柱层析，以氯仿-丙酮体积配比为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1和1:2的溶液进行梯度洗脱，合并相同的部分，收集各部分洗脱液并浓缩；(3)高压液相色谱分离：收集步骤(2)氯仿-丙酮...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈永宽，尚善斋，赵伟，李忠，刘志华，杨光宇，刘春波，申钦鹏，缪明明，
申请(专利权)人：云南中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：云南;53