用于DMD的多外显子跳跃组合物制造技术

提供了能够结合人肌营养不良蛋白基因中选定的靶位点以便诱导外显子跳跃的反义分子，和使用其治疗肌营养不良的方法。

【技术实现步骤摘要】
201610137572

【技术保护点】
用于在人肌营养不良蛋白预加工的mRNA的加工中产生外显子44跳跃的组合物，包含含有20‑35个通过含磷亚基间连接而连接的吗啉代亚基的基本不带电的反义化合物，所述连接将一个亚基的吗啉代氮与相邻亚基的5’环外碳连接，所述反义化合物包含选自SEQ ID NOS:1‑20且能够与肌营养不良蛋白基因外显子44中的互补mRNA序列在所述化合物和mRNA之间形成Tm为至少45℃的异源双链体的序列。

【技术特征摘要】
2008.10.24 US 61/108,4161.用于在人肌营养不良蛋白预加工的mRNA的加工中产生外显子44跳跃的组合物，包含
含有20-35个通过含磷亚基间连接而连接的吗啉代亚基的基本不带电的反义化合物，
所述连接将一个亚基的吗啉代氮与相邻亚基的5’环外碳连接，所述反义化合物包含选自
SEQIDNOS:1-20且能够与肌营养不良蛋白基因外显子44中的互补mRNA序列在所述化合物
和mRNA之间形成Tm为至少45℃的异源双链体的序列。
2.如权利要求1所述的组合物，其中所述化合物含有选自SEQIDNOS:8、11和12的序
列。
3.如权利要求1所述的组合物，其中所述化合物与具有选自SEQIDNOS:570-578的序
列的富含精氨酸的肽偶联。
4.用于在人肌营养不良蛋白预加工的mRNA的加工中产生外显子45跳跃的组合物，包含
含有20-35个通过含磷亚基间连接而连接的吗啉代亚基的基本不带电的反义化合物，
所述连接将一个亚基的吗啉代氮与相邻亚基的5’环外碳连接，所述反义化合物包含选自
SEQIDNOS:21-76和612-624且能够与肌营养不良蛋白基因外显子45中的互补mRNA序列在
所述化合物和mRNA之间形成Tm为至少45℃的异源双链体结构的序列。
5.如权利要求4所述的组合物，其中所述化合物含有选自SEQIDNOS:27、29、34和39的
序列。
6.如权利要求5所述的组合物，其中所述化合物含有选自SEQIDNOS:29和34的序列。
7.如权利要求4所述的组合物，其中所述化合物与具有选自SEQIDNOS:570-578的序
列的富含精氨酸的肽偶联。
8.用于在人肌营养不良蛋白预加工的mRNA的加工中产生外显子46跳跃的组合物，包含
含有20-35个通过含磷亚基间连接而连接的吗啉代亚基的基本不带电的反义化合物，
所述连接将一个亚基的吗啉代氮与相邻亚基的5’环外碳连接，所述反义化合物包含选自
SEQIDNOS:77-125且能够与肌营养不良蛋白基因外显子46中的互补mRNA序列在所述化合
物和mRNA之间形成Tm为至少45℃的异源双链体结构的序列。
9.如权利要求8所述的组合物，其中所述化合物含有选自SEQIDNOS:77-105的序列。
10.如权利要求9所述的组合物，其中所述化合物含有选自SEQIDNOS:82、84-87、90、
96、98、99和101的序列。
11.如权利要求8所述的组合物，其中所述化合物与具有选自SEQIDNOS:570-578的序
列的富含精氨酸的肽偶联。
12.用于在人肌营养不良蛋白预加工的mRNA的加工中产生外显子47跳跃的组合物，包
含
含有20-35个通过含磷亚基间连接而连接的吗啉代亚基的基本不带电的反义化合物，
所述连接将一个亚基的吗啉代氮与相邻亚基的5’环外碳连接，所述反义化合物包含选自
SEQIDNOS:126-169且能够与肌营养不良蛋白基因外显子47中的互补mRNA序列在所述化
合物和mRNA之间形成Tm为至少45℃的异源双链体结构的序列。
13.如权利要求12所述的组合物，其中所述化合物含有选自SEQIDNOS:126-149的序
列。
14.如权利要求13所述的组合物，其中所述化合物含有选自SEQIDNOS:126、128-130、
132、144和146-149的序列。
15.如权利要求12所述的组合物，其中所述化合物与具有选自SEQIDNOS:570-578的
序列的富含精氨酸的肽偶联。
16.用于在人肌营养不良蛋白预加工的mRNA的加工中产生外显子48跳跃的组合物，包
含
含有20-35个通过含磷亚基间连接而连接的吗啉代亚基的基本不带电的反义化合物，
所述连接将一个亚基的吗啉代氮与相邻亚基的5’环外碳连接，所述反义化合物包含选自
SEQIDNOS:170-224和634且能够与肌营养不良蛋白基因外显子48中的互补mRNA序列在所
述化合物和mRNA之间形成Tm为至少45℃的异源双链体结构的序列。
17.如权利要求16所述的组合物，其中化合物含有选自SEQIDNOS:170-201和634的序
列。
18.如权利要求17的组合物，其中所述化合物含有选自SEQIDNOS:176、178、181-183、
194和198-201的序列。
19.如权利要求16所述的组合物，其中所述化合物与具有选自SEQIDNOS:570-578的
序列的富含精氨酸的肽偶联。
20.用于在人肌营养不良蛋白预加工的mRNA的加工中产生外显子49跳跃的组合物，包
含
含有20-35个通过含磷亚基间连接而连接的吗啉代亚基的基本不带电的反义化合物，
所述连接将一个亚基的吗啉代氮与相邻亚基的5’环外碳连接，所述反义化合物包含选自
SEQIDNOS:225-266且能够与肌营养不良蛋白基因外显子49中的互补mRNA序列在所述化
合物和mRNA之间形成Tm为至少45℃的异源双链体结构的序列。
21.如权利要求20所述的组合物，其中所述化合物含有选自SEQIDNOS:225-248的序
列。
22.如权利要求21所述的组合物，其中所述化合物含有选自SEQIDNOS:227、229、234、
236、237和244-248的序列。
23.如权利要求20所述的组合物，其中所述化合物与具有选自SEQIDNOS:570-578的
序列的富含精氨酸的肽偶联。
24.用于在人肌营养不良蛋白预加工的mRNA的加工中产生外显子50跳跃的组合物，包
含
含有20-35个通过含磷亚基间连接而连接的吗啉代亚基的基本不带电的反义化合物，
所述连接将一个亚基的吗啉代氮与相邻亚基的5’环外碳连接，所述反义化合物包含选自
SEQIDNOS:267-308且能够与肌营养不良蛋白基因外显子50中的互补mRNA序列在所述化
合物和mRNA之间形成Tm为至少45℃的异源双链体结构的序列。
25.如权利要求24所述的组合物，其中所述化合物含有选自SEQIDNOS:277、287、290
和291的序列。
26.如权利要求25所述的组合物，其中所述化合物含有由SEQIDNOS:287组成的序列。
27.如权利要求24所述的组合物，其中所述化合物与具有选自SEQIDNOS:570-578的
序列的富含精氨酸的肽偶联。
28.用于在人肌营养不良蛋白预加工的mRNA的加工中产生外显子51跳跃的组合物，包
含
含有20-35个通过含磷亚基间连接而连接的吗啉代亚基的基本不带电的反义化合物，
所述连接将一个亚基的吗啉代氮与相邻亚基的5’环外碳连接，所述反义化合物包含选自
SEQIDNOS:309-371且能够与肌营养不良蛋白基因外显子51中的互补mRNA序列在所述化
合物和mRNA之间形成Tm为至少45℃的异源双链体结...

【专利技术属性】
技术研发人员：彼得·萨扎尼，瑞斯扎德·科勒，
申请(专利权)人：萨雷普塔治疗公司，
类型：发明
国别省市：美国;US