针对蜂蜜中MRJP1抗体对的制备方法、检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种针对蜂蜜中MRJP1抗体对的制备方法、检测方法及试剂盒。所述的MRJP1的特异性多肽M4的氨基酸序列为IKEALPHVPIFD，如SEQ ID NO：1所示；所述的MRJP1的特异性多肽M5的氨基酸序列为SGEYDYKNNYPSDID，如SEQ ID NO：2所示；然后免疫新西兰白兔。ELISA双抗夹心法，按以下步骤进行处理：包被捕获抗体SP-1，封闭，洗涤，加入抗原，加入酶标的检测抗体HRP-SP-2，洗涤，加显色底物，加显色终止液，用酶标仪测定样品的吸光值450 nm-630 nm。所述的抗原为待测蜂蜜或已知蜜源的纯蜂蜜，通过比较待测蜂蜜和已知蜜源的纯蜂蜜的MRJP1的吸光值判断待测蜂蜜的质量。本发明专利技术为蜂蜜质量及掺假量检测提供了一种可靠的快速检测新方法，可用于蜂产品质量监管部门、加工贸易企业蜂蜜产品质量控制。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蜂蜜成分含量的测定技术，尤其涉及一种蜂蜜所含的由蜜蜂封后分泌的内源性蜂王浆主蛋白MRJP1特异性双抗体的制备方法，及用双抗体检测掺假蜂蜜的双抗体夹心方法等。
技术介绍
蜂蜜是蜜蜂工蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，与自身分泌物结合后，在巢脾中经充分酿造形成的天然甜物质。我国是蜂蜜生产和出口大国，2012年全国产量达到45.16万吨，占世界蜂蜜总产量的1/4；2013年出口蜂蜜12.5万吨，占世界蜂蜜贸易量的1/4。根据中华人民共和国供销合作行业标准GH/T18796-2012《蜂蜜》对蜂蜜真实性的描述，“蜂蜜中不得添加任何当前明确或不明确的添加物；如果在蜂蜜中添加其它物质,不应以’蜂蜜’或’蜜’作为产品名称或名称主词；采用我国国家标准GB/T18932.1(2012)《蜂蜜中碳-4植物糖含量测定方法稳定碳同位素比率法》方法检测，蜂蜜中的碳-4植物糖含量不得大于7。”由于蜂蜜掺假成本低廉，检测困难，不法商贩容易牟利，已严重扰乱蜂蜜市场秩序，导致产品信任度严重下降，导致行本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种针对蜂蜜中内源MRJP1抗体对的制备方法，其特征在于，所述的MRJP1的特异性多肽M4的氨基酸序列为IKEALPHVPIFD，如SEQ ID NO：1所示；所述的MRJP1的特异性多肽M5的氨基酸序列为SGEYDYKNNYPSDID，如SEQ ID NO：2所示；然后免疫新西兰白兔。

【技术特征摘要】
1.一种针对蜂蜜中内源MRJP1抗体对的制备方法，其特征在于，所述的MRJP1的特异性
多肽M4的氨基酸序列为IKEALPHVPIFD，如SEQIDNO：1所示；所述的MRJP1的特异性多肽M5
的氨基酸序列为SGEYDYKNNYPSDID，如SEQIDNO：2所示；然后免疫新西兰白兔。
2.一种针对蜂蜜中内源MRJP1的免疫检测方法，其特征在于，
1）利用MRJP1特异性多克隆抗体SP-1为捕获抗体，MRJP1特异性多克隆抗体SP-2为检测
抗体，以免疫双抗夹心法测定待测蜂蜜中MRJP1含量；
所述的MRJP1特异性多克隆抗体SP-1通过利用MRJP1特异性多肽M4免疫新西兰白兔得
到；所述的MRJP1特异性多肽M4的氨基酸序列为IKEALPHVPIFD，如SEQIDNO：1所示；
所述的MRJP1特异性多克隆抗体SP-2通过利用MRJP1特异性多肽M5免疫新西兰白兔得
到，所述的MRJP1特异性多肽M5的氨基酸序列为SGEYDYKNNYPSDID，如SEQIDNO：2所示。
3.根据权利要求2所述的免疫检测方法，其特征在于，所述的免疫双抗夹心法为ELISA
双抗夹心法，按以下步骤进行处理：包被捕获抗体SP-1，封闭，洗涤，加入抗原，加入酶标的
检测抗体HRP-SP-2，洗涤，加显色底物，加显色终止液，用酶标仪测定样品的吸光值450nm-
630nm。
4.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈立荣，王一然，谌迪，张一帆，沈苗宏，辛晓璇，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33