一种抗精子抗体检测方法技术

本发明专利技术公开了一种抗精子抗体检测方法，属于测定体内血液特性的方法。本发明专利技术的试剂盒内装有检测用的浓缩磷酸缓冲液、生物素化羊抗人精子凝集抗体，生物素化羊抗人精子制动化抗体，生物素化羊抗人精子细胞毒抗体，荧光素标记的链霉亲和素，封片剂等试剂及生物薄片，本发明专利技术中生物薄片以纯化的精子作为抗原，在反应区内加待测血清，经孵育、漂洗、甩干后，加入相应的生物素化抗精子抗体，经孵育、漂洗、甩干后，再加入荧光素标记的链霉亲和素，形成荧光素标记的链霉亲和素‑生物素荧光复合物，并产生黄绿色荧光，本发明专利技术方法能够同时检测患者血清中抗精子凝集抗体、制动化抗体、细胞毒抗体。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及测量体内血液特性的方法，具体是检测血液中抗精子抗体类型的检测方法。
技术介绍
抗精子抗体是一个复杂的病理产物，男女均可罹患，男性的精子、精浆，对女性来说皆属特异性抗原，接触到血液后，男女均可引起免疫反应，产生相应的抗体，阻碍精子与卵子结合，而致不孕，男性及女性患者血中和体液中的抗精子抗体是精子、精浆通过自身免疫或同种免疫而产生的，由于精子抗原的多样性，决定了抗精子抗体的复杂性，其中与不育症病因有关，日常临床应用最广的抗精子凝集抗体、精子制动化抗体和精子毒素抗体等抗精子抗体最引人注目。1.精子凝集抗体精子凝集抗体在男性和女性不育患者血清中均可发现，它是由精子自身免疫和同种免疫所产生。男性的阳性率约为10％，女性在67.2％～78.9％之间，在37℃对精子有很强的吸着力，凝集精子的类型有头对头、尾对尾和头尾混合3种。2.精子制动化抗体精子制动化抗体具有抗体的特性，原因不明不孕妇女血中的阳性率约为17.6％，而对照群的孕妇和未婚妇女，精子凝集阳性率为45.8％，制动化抗体全为阴性。3.精子细胞毒抗体精子细胞毒抗体的特点是直接作用于精子，发挥杀灭精子的作用。在有精子凝集因子的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗精子抗体检测方法，其特征在于取生物薄片放置室温后，加入1：100PBS稀释的血清，20～37℃1～2h或4℃过夜，0.01mol/L PBS洗2min 3次；依次分别滴加0.01mol/L PBS1:100稀释的生物素化羊抗人精子凝集抗体，生物素化羊抗人精子制动化抗体，生物素化羊抗人精子细胞毒抗体，20～37℃1～2h，0.01mol/L PBS洗2min 3次；各反应区分别滴加0.01mol/L PBS1:100稀释的异硫氰酸荧光素偶联链霉亲和素，20～37℃1～2h，0.01mol/L PBS洗2min 4次；封片剂封片，荧光显微镜10ⅹ40倍视野下观察；FITC在490～495nm...

【技术特征摘要】
1.一种抗精子抗体检测方法，其特征在于取生物薄片放置室温后，加入1：100PBS稀释的血清，20～37℃1～2h或4℃过夜，0.01mol/LPBS洗2min3次；依次分别滴加0.01mol/LPBS1:100稀释的生物素化羊抗人精子凝集抗体，生物素化羊抗人精子制动化抗体，生物素化羊抗人精子细胞毒抗体，20～37℃1～2h，0.01mol/LPBS洗2min3次；各反应区分别滴加0.01mol/LPBS1:100稀释的异硫氰酸荧光素偶联链霉亲和素，20～37℃1～2h，0.01mol/LPBS洗2min4次；封片剂封片，荧光...

【专利技术属性】
技术研发人员：李立和，丁弘，李铮，
申请(专利权)人：天津市宝坻区人民医院，
类型：发明
国别省市：天津;12