用于在细胞中标记蛋白质或其它生物分子的基于金属螯合的荧光探针制造技术

本发明专利技术提供用于使活细胞中的细胞内蛋白质或其它生物分子成像以监控生物事件的基于金属螯合的荧光探针。所述探针可以标记带多组氨酸标签的蛋白质或生物分子，同时还能够共价结合到标记的蛋白质以进一步分析蛋白质。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】专利技术背景鉴别和分子水平理解整个生命过程期间的相互作用化学反应在基本生物研究和医药科学中具有很大价值。荧光成像已长期用于这个目的，原因是其允许我们实时且以高空间分辨率探查活细胞和生物体包括人类中的事件。使用小荧光探针的位点特异性化学标记是研究细胞和组织中的生物事件的有力和吸引人的技术，且因此用于探查疾病的机理。具体而言，基于金属螯合的荧光标记具有高选择性、小尺寸和共价标记的优点。在现代生物化学中，将多组氨酸标签基因编码到POI为蛋白质化学中稳健的技术。His标签基本上是指具有寡组氨酸的短肽基序，且六个组氨酸的序列为最常见的His标签。His标签的组氨酸的咪唑环可以与各种过渡金属例如Ni2+、Cu2+、Zn2+等相互作用。因此，通常发现His标签与过渡金属复合物例如Ni2+-次氮基三乙酸(NTA)复合物相互作用，由此有助于使用固定化金属亲和层析法(IMAC)纯化过表达的蛋白质。该相互作用组合亦已广泛应用于位点特异性蛋白质标记，这说明了对所报道的广泛的现有带寡组氨酸-标签的蛋白质库的相容性，且His标签的基因编码是灵活的，其中其可经基因工程改造到用于标记的蛋白质靶标的末端或内部位点(So本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于靶向生物样品中的生物分子的荧光探针，其包含产生荧光信号的荧光团报道部分、螯合用于与编码到靶蛋白质的多组氨酸标签配位的金属离子的金属‑螯合部分、连接所述荧光团报道部分和金属‑螯合部分的接头，和充当到靶蛋白质上的锚点的光反应性交联剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.12.27 US 61/9211061.用于靶向生物样品中的生物分子的荧光探针，其包含产生荧光信号的荧光团报道部分、螯合用于与编码到靶蛋白质的多组氨酸标签配位的金属离子的金属-螯合部分、连接所述荧光团报道部分和金属-螯合部分的接头，和充当到靶蛋白质上的锚点的光反应性交联剂。2.根据权利要求1的荧光探针，其中在吸收光能之后所述报道部分的荧光信号具有约400-约800nm的波长。3.根据权利要求1-2中任一项的荧光探针，其中所述报道部分包含香豆素-衍生物、荧光素-衍生物或若丹明-衍生物。4.根据权利要求1-3中任一项的荧光探针，其中所述金属-螯合部分包含多齿配体。5.根据权利要求4的荧光探针，其中所述多齿配体包含次氮基三乙酸(NTA)或亚氮基二乙酸(IDA)。6.根据权利要求1-5中任一项的荧光探针，其中所述金属-螯合部分包含选自镍(II)、钴(II)和铜(II)金属离子的螯合金属离子。7.根据权利要求1-6中任一项的荧光探针，其中所述荧光团报道部分和所述金属-螯合部分之间的接头为烃链或肽序列。8.根据权利要求1-7中任一项的荧光探针，其中所述光反应性交联剂包含芳基叠氮化物、双吖丙啶或二苯甲酮。9.根据权利要求8的荧光探针，其中在所述荧光探针与生物样品中带多组氨酸标签的蛋白质配位之后，当经受紫外辐射约5-约15分钟时，所述光反应性交联剂呈现光激活。10.根据权利要求9的荧光探针，其中所述紫外辐射的范围为约340nm-约380nm。11.根据权利要求1-10中任一项的荧光探针，其中选自镍(II)、钴(II)和铜(II)离子的金属离子的螯合产生金属-螯合探针的荧光猝灭。12.根据权利要求1-11中任一项的荧光探针，其中所述探针以1:1摩尔比与金属离子配位。13.根据权利要求1-12中任一项的荧光探针，其中标记靶生物分子通过经...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙红哲，黎佑芷，阳娅，
申请(专利权)人：香港大学，
类型：发明
国别省市：中国香港;81