本发明专利技术公开了一种特异结合钙网蛋白的核酸适体及试剂盒。本发明专利技术提供的核酸适体，与钙网蛋白具有较好的亲和能力。利用本发明专利技术的核酸适体，可以捕获溶液中的钙网蛋白，将其制备成为相应的试剂盒，将有利于癌症血清学诊断和血液筛查。利用本发明专利技术的核酸适体进行钙网蛋白检测，具有高灵敏、成本低、易制备、易保存的优点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种特异结合癌症标志物钙网蛋白，属于生物领域。
技术介绍
f丐网蛋白（Calreticulin)发现至今已有十多年，其主要功能是藏f丐。人妈网蛋 白基因的编码序列有1251个核苷酸，核苷酸序列见GenBank No:匪004343,编码的钙网蛋 白由417个氨基酸组成。近年发现其N-端具有抗肿瘤的作用，已证明钙网蛋白的N-端第 1-180 位氨基酸或第 120-180 位氨基酸组成的蛋白质可通过抑制肿瘤的新生血管内皮细胞的生长而发 挥抗肿瘤作用。目前该基因可从生物技术公司（http://www.invivogen.com)获得。在肿 瘤发生时，分泌性的CRT在肝癌病人的血清以及膀胱癌患者的尿液中都有上升趋势，除此 之外，对妇科肿瘤如乳腺癌、宫颈癌的研宄也显示相比健康对照CRT的表达量有所增加；用 免疫组化染色研宄胃癌时发现CRT阳性的患者往往伴有远处淋巴结的转移、肿瘤微血管 聚集以及五年存活率低下的症状。然而，由于肿瘤发生发展的机制至今尚未阐明，因此肿 瘤的早期发现也变得越来越重要。 在肿瘤的研究和临床实践中，早期发现、早期诊断、早期治疗是关键。肿瘤标志物 (Tumor Marker，TM)在肿瘤普查、诊断、判断预后和转归、评价治疗疗效和高危人群随访观 察等方面都具有较大的实用价值。随着单克隆抗体技术的不断成熟，出现了大量的抗肿瘤 标志物的单克隆抗体，并与特异敏感的免疫学检测技术（RIA、IRMA、ELISA、CLIA、IFA、TRFIA 等）相结合，发展了众多的肿瘤标志物检测项目并不断地应用于临床，已成为肿瘤患者的一 个重要检查指标。现有技术中已经有选择CRT作为肿瘤标志物进行方法学的建立及临床试 验，发现肿瘤病人血清中的CRT水平明显高于正常对照。并且建立了针对于肿瘤诊断的CRT 抗体检测的ELISA试剂盒。但是制备相应的抗体比较复杂，成本也高，并不利于大规模的推 广应用。 核酸适体（Aptamer,又称适配体，适配子)是能高亲和性、高特异性的结合某种生 物革E1标的单链寡核酸分子（ssDNA或ssRNA)。核酸适体是通过指数富集配体系统进化技 术（Systematic Evolution of Ligands by Exponential enrichment, SELEX)从人工合 成的DNA/RNA文库中筛选得到的能够高度特异性结合靶标分子的单链DNA/RNA。已报道核 酸适体的靶标包括金属离子、有机小分子、多肽、蛋白质、细胞甚至组织等。核酸适体的分子 识别功能与抗体类似，具有与抗体分子相当甚至更强的靶标识别能力，但与抗体相比具有 很多优良的特性，如分子量小，能批量生产，不易失活，无免疫原性、容易合成与标记、快速 的穿透组织、良好的代谢动力学、不同批次之间产品不会存在差异和具有很好化学稳定性， 在生物检测、疾病诊断治疗等领域具有重要的应用前景。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种特异结合钙网蛋白的核酸适体及其试剂盒。 本专利技术提供的核酸适体，是如下序列所示： 序列表的序列1-30所示的单链DNA。 GWDB-1 :5' -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCCCCTTTACTATCCGCCATCATCTTATCATAAGACTTT CTTCTGAACGTTCTCACGCA-3' ； GWDB-2 :5'-ACGTTCGGATCGCACTAGAGCAACATTCCCGCCTTTACTATCCCCATCATCTGTATCACTTCT GAACGTTCTCACGCA-3,； GffDB-3 ：5? -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCTTCACTAACCCAATTGTTTAACCCACCACCACAAGAACTTC TGAACGTTCTCACGCA-3,； GffDB-4 ：5? -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCCCCAATTGTTTAACCCACCACCACAAGAATCAACAATCTTC TGAACGTTCTCACGCA-3,； GWDB-5 :5' -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCTACCTGCCAATTACCCTTACCGACCTACACAATCTATCTTC TGAACGTTCTCACGCA-3,； GWDB-6 :5' -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCAATCATGCTCCATCTACTTAATTACCGCCCTCTTCAACTTC TGAACGTTCTCACGCA-3,； GffDB-7 ：5? -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCTCACAGACAAATCTAACCTCCTAAGAACATTTAACACCTTC TGAACGTTCTCACGCA-3,； GWDB-8 :5' -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCTCTCTCACTCCGCCTATCCACAATGTTTAATACAAATCTTC TGAACGTTCTCACGCA-3,； GWDB-9 :5' -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCTATTATGTTATAACACATCACGACCATCTCATCATCTCTTC TGAACGTTCTCACGCA-3,； GWDB-10 :5 ' -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCCTAACTGTACATCTAACACTCTATCTCAGAACCTTTTCTT CTGAACGTTCTCACGCA-3,； GWDB-11 :5 ' -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCACCCTGCTCTAAACACTTTACACCTGTCCCAAATCCCCTT CTGAACGTTCTCACGCA-3,； GWDB-12 :5 ' -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCTACATGTTATTTCACTTTGTCCTCACCACTATACTTACTT CTGAACGTTCTCACGCA-3,； GWDB-13 :5 ' -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCACACACCTGTTTACCTCCAATTACCCGTTACCACCTACTT CTGAACGTTCTCACGCA-3,； GWDB-14 :5 ' -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCATTATTAGACCACTTCCAAAATCTCGTCTCCCATATTCTT CTGAACGTTCTCACGCA-3,； GWDB-15 :5 ' -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCTACTCTCGTCTCAATCTACACCCCCGACCATCTACCACTT CTGAACGTTCTCACGCA-3,； GWDB-16 :5 ' -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCCACTAGATACTTCCACCAAATCGTCAAAACCCATTCTCTT CTGAACGTTCTCACGCA-3,； GWDB-17 :5 ' -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCAATTCCCTGAACAACTACAACCTGCTATAATCTTTATCTT CTGAACGTTCTCACGCA-3,； GWDB-18 :5 ' -ACGTTCGGATCGCACTAGAGCCCTACTTCGCTATTACTTTTCTAC本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种核酸适体，其特征在于:能特异性结合钙网蛋白。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：查文娟，
申请(专利权)人：查文娟，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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