本文提供了在异源造血细胞移植(HCT)后增加混合造血细胞嵌合向完全供体细胞嵌合转化的方法和组合物，其中这样的移植可以用于治疗诸如白血病和淋巴瘤的癌症，或用于治疗需要重建造血系统的其他疾病，例如治疗贫血、地中海贫血、自身免疫病等。本发明专利技术通过在异源HCT之后利用充分纯化的供体记忆性CD8+ T细胞的组合物作为DLI改善了常规DLI，其中在移植后的适合时间给予该细胞。该方法提供更完全的供体嵌合，并且还具有杀死肿瘤细胞而不发生GVHD的益处。记忆性CD8+ T细胞可包括中枢记忆性T细胞和效应记忆性T细胞中的一者或二者，通常包括二者。
【技术实现步骤摘要】
【专利说明】异源造血干细胞移植的增强 本申请是在2013年8月9日提交的申请号为201280008500. 9的专利技术名称为"异 源造血干细胞移植的增强"的专利申请的分案申请。 政府权利 本申请在国立卫生研宄院（NationalInstitutesofHealth)给予的政府支持 下做出（批准号为CA49605)，并且还获得了白血病和淋巴瘤学会（Leukemiaand淋巴瘤 Society)给予的支持（批准号为6038-09)。
技术介绍
癌症也被称为恶性肿瘤，其特征为表现为不受控细胞分化的细胞的异常生长、侵 袭和破坏临近的组织、并且有时转移至体内的其他位置。存在超过100种类型的癌症，包括 乳腺癌、皮肤癌、肺癌、结肠癌、前列腺癌和淋巴瘤。在美国，癌症是导致死亡的第二大主要 原因，所有死亡的约13%是由癌症导致的。癌症会影响所有年龄段的人，甚至胎儿，但大多 数类型癌症的风险随年龄增加。癌症能够影响所有的动物。 化疗已经成为许多癌症的标准治疗方法。化疗是指使用抗肿瘤药物来治疗癌症或 将这些药物结合到细胞毒素标准化治疗方案中。最常用的是，化疗通过杀死快速分化的细 胞（这是癌细胞的主要特性之一）而起作用。这种方法也会伤害在正常情况下快速分化的 细胞：骨髓、消化道和毛囊中的细胞；这会导致的最常见的副作用是化疗-骨髓抑制（血细 胞产生减少）、粘膜炎（消化道内衬发炎）和秃头症（脱发）。新的抗癌药物直接对癌细胞 中的异常蛋白起作用；这被称为靶向治疗。 异源造血细胞移植（HCT)能够用于对患有白血病和淋巴瘤的患者进行治疗，尤其 是当移植时接受治疗的患者处于完全缓解（completeremission)状态时。然而，如果接 受治疗的患者在移植时处于部分缓解状态，或者当采用非清髓性处理（non-myeloablative conditioning)时发生混合嵌合而不是完全嵌合，则进行性疾病和复发的风险相当大。 尽管出现了这些新的药剂和改进的组合，但目前的治疗方法对于许多类型的癌症 或不同阶段的癌症仍然是无效的。对于癌症治疗非常需要改进的治疗方案和治疗方法。
技术实现思路
在本专利技术的一种实施方式中，提供了用于在异源造血细胞移植（或异基因造血细 胞移植）之后通过加入纯化的供体淋巴细胞亚群来促进癌症（包括但不限于白血病和淋巴 瘤）治疗的组合物和方法，该供体淋巴细胞亚群能够杀死肿瘤细胞而不引起移植物抗宿主 病（GVHD)的主要并发症。 在一种相关的实施方式中，提供了在异源造血细胞移植（HCT)之后增强混合的造 血细胞嵌合向完全供体细胞嵌合转化的方法和组合物，其中这样的移植可被用于治疗癌症 或需要重建造血系统的其他病症，例如用于治疗贫血症、地中海贫血、自身免疫病等。混合 嵌合与比通过随后的异源HCT达到完全供体嵌合的患者高得多的癌症发展或复发率相关。 尽管在移植后的时间点可常规地进行供体淋巴细胞输注（DLI)，但DLI通常由血液中含有T 细胞全部亚群的外周血单核细胞构成，因此会带来引起严重GVHD的主要风险。 本专利技术通过利用基本上纯的供体记忆性⑶8+T细胞的组合物作为异源HCT之后的 DLI来改善常规DLI，其中在人类中进行移植后的适合时间给予该细胞，例如从约2个月至 约6个月，以防止肿瘤复发，或在肿瘤复发时候给予该细胞以治疗该复发。该方法提供了更 完全的供体嵌合，并且具有杀死肿瘤细胞的进一步益处。该记忆性CD8+T细胞可包括中枢 记忆性T细胞和效应记忆性T细胞中的一种或两种，通常包括二者。该供体记忆性T细胞 通常是纯化的，并且可以单独利用特异于CD8的亲和性试剂或与本领域已知的这种细胞的 其他标志物（包括但不限于⑶8+⑶44+群）的组合来进行选择。以对于促进完全嵌合有效 的剂量给予该T细胞，并且在适当的时候，增强肿瘤细胞的杀灭。 在一些实施方式中，癌症是实体瘤。能够利用本专利技术所述的方式治疗的实体瘤的 实例包括，但不限于，结肠直肠癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、前列腺癌和卵巢癌。在其他 实施方式中，癌症为白血病或淋巴瘤，包括但不限于，急性淋巴细胞白血病（ALL)、急性髓性 白血病（AML)、慢性髓性白血病（CML)、淋巴瘤（如霍奇金淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤）等。在 一些实施方式中，肿瘤细胞为原发瘤或转移瘤。【附图说明】 所附权利要求书特别地描述了本专利技术的新特征。通过参照以下描述了其中利用了 本专利技术的原则的示例性实施方式的详细说明和附图将更好地理解本专利技术的特征和优势。 图1.用供体C57BL/6T⑶BM细胞移植的、具有或不具有总T细胞或T细胞亚群 的BALB/c宿主的存活。A，致死性辐照（800cGy)宿主给予来自供体的2X106TCDBM细胞， 具有或不具有（N= 12)来源于脾脏的0. 5XIO6分选的供体总T(N= 10)或总⑶4+T(N= 10)细胞。从两次独立实验收集数据。B，从图A中确定小鼠体重的连续测量值。+当组中 的仅剩不超过两只小鼠时停止体重测量。C，在辐照后6小时使宿主接受500BCL^#巴瘤细 胞。向经致命性辐照的宿主给予2XIO6T⑶BM细胞，具有或不具有（N= 8)0. 5XIO6分选 的0)62^0)441°初始（N= 10)或CD44hH己忆性表型CD4 +T细胞（N= 10)。也向对照未处 理宿主给予肿瘤细胞（N= 8)。从两次独立实验收集数据。D和F，示出了在仅T⑶BM移植 或分别与记忆性CD4+T细胞或记忆性总T细胞移植28天后，分别在C和E中来自具有进行 性肿瘤生长的受体的外周血中的⑶19与BCI^个体基因型标志物的代表性双色流式细胞分 析。 图2.初始表型⑶8+T细胞和记忆性表型⑶8+T细胞的表征。A，用抗-⑶8、抗-⑶44 和抗-⑶62LmAbs对C57BL/6脾细胞进行染色。分析门控⑶62Lhira44lQW和⑶44hkD8+T的 CCR9、a40 7，、⑶122和CXCR3表达。通过同型染色来确定门。对于⑶441°⑶8+T细胞（粗 线）和⑶44hira8+T(彩色区域），各标志物的柱状图重叠。B，在MLR的第5天在三个平行孔 中每一次细胞混合的C57BL/6应答初始表型⑶8+T细胞或记忆性表型⑶8+T细胞（2XIO5) 与BALB/c刺激细胞（8XIO5)的3H-胸苷结合（平均值土SE)。结果为至少3次MLR试验的 代表性结果。Allo和Syn分别表示BALB/c和C57BL/6刺激细胞。+表示3H-胸苷结合小于 5,OOOcpm。C，在MLR中第60小时示出了C57BL/6供体初始表型CD8+T细胞和记忆性表型 ⑶8+T细胞（IXIO5)对经辐照的BALB/c刺激细胞（5XIO5)的细胞因子反应。左图示出了 IL-2的平均值土SEM浓度；右图示出了IFN-y的平均值土SEM浓度。#，细胞因子的浓度 为〈10pg/ml。结果是至少三次MLR培养的代表性结果。D，分选的初始细胞（naivecells) 和记忆性细胞被用于针对表达的荧光素酶-BCL1细胞的细胞毒性实验。用经辐照的BALB/c 脾细胞刺激分选的初始或记忆性表型CD8+T细胞96小时。将表达荧光素酶的BCL1淋巴瘤 细胞与经刺激的初始或记忆性表型细胞以不同的效应细胞：靶细胞比率混合。在16小时 后测量荧光素酶信号。然本文档来自技高网...
【技术保护点】
对于加强杀死残余肿瘤细胞有效的、有效量的至少1×106并且80％纯的、未接触抗原的人类供体来源的中枢和效应记忆性CD8+T细胞在制备用于在针对癌症进行治疗的人类个体中增强异源造血细胞移植的药物中的应用，其中在所述异源造血细胞移植后向宿主人类给予所述有效量的人类供体来源的记忆性CD8+T细胞，所述人类供体来源的中枢和效应记忆性T细胞是CD8+CD45RA‑和/或CD8+CD45RO+。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：塞缪尔·斯特罗伯，苏帕尔纳·达特，罗伯特·洛夫斯基，
申请(专利权)人：小利兰·斯坦福大学托管委员会，
类型：发明
国别省市：美国;US
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。