特异于CLEC14A的新抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及新的特异性结合clec14a(C型凝集素结构域家族14，成员A)的抗体及其用途。更具体地，本发明专利技术涉及特异性结合clec14a的CTLD(C型凝集素样结构域)的抗体，用于制备所述抗体的方法，包含所述抗体的用于抑制血管生成的组合物，通过施用抗体或组合物来抑制血管生成的方法，包含所述抗体的用于预防或治疗癌症的组合物，通过施用抗体或组合物来治疗癌症的方法，包括所述抗体的用于诊断癌症的组合物，包括所述组合物的用于诊断癌症的试剂盒，使用组合物来诊断癌症的方法，用于抑制血管生成的组合物，其包含用于抑制clec14a表达的材料，包含所述组合物的用于血管生成的试剂盒，使用所述组合物来抑制血管生成或治疗癌症的方法以及clec14a的CTLD作为抑制血管生成的抗体的表位的用途。所述抗体可有效抑制cle14a介导的癌症进展。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及新的抗体及其用途，所述抗体特异性结合c型凝集素结构域家族14 的成员A(clecl4a)。更具体地，本专利技术涉及特异性结合clecl4a的C型凝集素样结构域 (CTLD)的抗体，制备此抗体的方法，用于抑制血管生成的包含此抗体的组合物，通过施用抗 体或组合物来抑制血管生成的方法，用于预防或治疗癌症的包含抗体的组合物，通过施用 抗体或组合物来治疗癌症的方法，用于诊断癌症的包含抗体的组合物，用于诊断癌症的包 含此组合物的试剂盒，使用此组合物诊断癌症的方法，用于抑制血管生成的包含用于抑制 clecl4a表达的物质的组合物，用于血管生成的包含此组合物的试剂盒，使用组合物抑制血 管生成或治疗癌症的方法，以及clecl4a的CTLD作为抑制血管生成的抗体的表位的用途。
技术介绍
重组抗体技术近期的快速发展已在全球范围内产生了约30种被批准用于人类治 疗的抗体以及超过270种目前处于临床开发的用于范围广泛的疾病的抗体。然而，传统的 抗体筛选仍然是时间和劳动密集型的且是昂贵的。传统上，使用目标蛋白的胞外区域以筛 选抗体。因此，大多数所选择的抗体结合到细胞，但其不是具有治疗潜力的功能性抗体。由 于分子生物学和蛋白质生物化学的最新进展，大量的可以将蛋白质结构域和基序的结构与 细胞功能联系起来的信息是可用的。使用功能性结构域以筛选重组抗体可以是鉴定功能性 抗体和研宄潜在作用模式的一种有效的方法。 肿瘤的血管生成在肿瘤的发展中起到了重要的作用。血管内皮生长因子 (VEGF)和表皮生长因子受体（EGFR)在血管生成中是关键的因素，并且靶向血管生成 已成为癌症治疗的有前途的策略。已经使用抗-VEGF抗体贝伐单抗（bevacizumab)来 治疗患有转移性结肠直肠癌、肾细胞癌、非小细胞肺癌、恶性脑胶质瘤的患者。西妥昔 单抗（Cetuximab)(其是抗-EGFR抗体）可以抑制内皮细胞与细胞的接触以及血管生 成因子如VEGF、白介素-8和碱性成纤维细胞生长因子的表达。然而，由于肿瘤分泌 的血管生成因子的冗余，其包括胎盘生长因子、血管生成素、碱性成纤维细胞生长因 子、肝细胞生长因子，这些药物在肿瘤中产生了抗性表型（KopetzS等人，PhaseII trialofinfusionalfluorouracil，irinotecan，andbevacizumabformetastatic colorectalcancer:efficacyandcirculatingangiogenicbiomarkersassociated withtherapeuticresistance.JournalofClinicalOncology.28 (3) :453-9 ; Lucio-EterovicAK等人，Mediatorsofglioblastomaresistanceandinvasionduring antivascularendothelialgrowthfactortherapy.ClinicalCancerResearch. 2009 ； 15(14) : 4589-99) 〇 贝伐单抗（人VEGF抗体）现被用于治疗多种癌症患者。然而，由于VEGF受体 (VEGFR)也在正常细胞中表达，它的使用可能与包括高血压、蛋白尿和胃肠穿孔的副作用相 关。副作用也可能限制抗促血管生成因子如VEGFR-2和血管生成素-2的许多抗体的治疗 用途。因此，鉴定通过抑制血管生成来治疗癌症患者的新的癌症特异性靶标对于开发具有 较少副作用的治疗性抗体是至关重要的。 此外，贝伐单抗和西妥昔单抗是治疗性抗体，其通过抑制可溶性血管生长因子与 它们的受体的相互作用来抑制血管生成。然而，由于肿瘤细胞分泌的促血管生成生长因子 的冗余，这些药物的长期使用产生了抗性肿瘤表型。这可能对在需要长期治疗的患者中使 用抗可溶性生长因子的抗体形成最大的挑战。Clecl4a是I型跨膜蛋白，其细胞外结构域由C型凝集素样结构域（CTLD)、一系列 的表皮生长因子样结构域和寿司样结构域组成。一些报道表明了clecl4a在肿瘤血管生成 中的作用。Rho等人报道称，clecl4a是内皮细胞特异性的，并且可能在血管生成中的细胞 与细胞的接触中发挥了关键作用（RhoSS等人，Clecl4aisspecificallyexpressedin endothelialcellsandmediatescelltocelladhesion.Biochemical&Biophysical ResearchCommunications. 404(1): 103-8)。Mura等人表明，clecl4a对于调节与外肉伪 足形成、细胞迀移和内皮血管形成相关的促血管生成表型是至关重要的；这个小组还鉴 定了作为肿瘤内皮细胞标记物的clecl4a没有在正常组织的内皮细胞中表达（MuraM等 人，Identificationandangiogenicroleofthenoveltumorendothelialmarker CLEC14A.Oncogene. 31 (3):293-305)。 尽管近年来对clecl4a的兴趣增加了，其分子机制尚未被清楚地鉴定。必须对 clel4a负责血管生成的功能部分或结构域进行研宄，以便挖掘和开发临床上可应用的抗 体。此时，迫切需求一种单克隆抗体，其特异性结合小鼠和人的clecl4a并可转换成人源化 抗体或人抗体，以用于临床前和临床研宄。优选地，需要一种抗体，其在临床上可用于抑制 肿瘤血管生成并从而治疗癌症。此外，需要鉴定一个新的部分，其抑制肿瘤血管生成并从而 进一步抑制血管生成并治疗癌症。
技术介绍
部分所公开的上述信息仅用于增加对本专利技术背景的理解，因此其可能包 含本领域技术人员已知的不形成现有技术的信息。
技术实现思路
技术问题 本专利技术人首次鉴定了CTLD在细胞迀移和外肉伪足形成中的功能，其是血管生成 中的关键事件。通过使用噬菌体展示技术，本专利技术人开发了抗人和小鼠clecl4aCTLD的重 组人抗体。功能测定表明，所述抗体特异性抑制内皮细胞的迀移和血管的形成，而不影响活 力或活化。最后，本专利技术人提出了一种作用机制，借此，抗体可以通过调节CTLD介导的细胞 与细胞的相互作用并下调内皮细胞表面上的clecl4a表达来抑制血管生成。这些结果证明 了CTLD在血管生成中的功能重要性和CTLD特异性人抗体阻止clecl4a介导的肿瘤血管生 成的潜力。 问题的解决方案 为了达到上述目的，本专利技术提供了一种抗体，其特异性结合clecl4a(C型凝集素 结构域家族14,成员A)。 本专利技术还提供了一种编码所述抗体的核酸。 本专利技术还提供了包含所述核酸的载体。 本专利技术还提供了一种宿主细胞，其包含所述载体或所述核酸。 本专利技术还提供了一种生产所述抗体的方法，包括培养所述宿主细胞，使得所述核 酸表达以产生所述抗体。 本专利技术还提供了一种抗体-药物偶联物，其包含附着到药物上的所述抗体。 本专利技术还提供了一种用于预防或治疗血管生成相关疾病的药物组合物，其包含所 述抗体。 本专利技术还提供了一种所述抗体用于制备预防或治疗血管生成相关疾病的药物组 合物的用途。 本专利技术还提供了所述抗体，其用于预防本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗体，其特异性结合clec14a(C型凝集素结构域家族14，成员A)。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：李硕默，奇珉庚，郑美贤，崔钟湁，
申请(专利权)人：斯克里普斯抗体研究所，
类型：发明
国别省市：韩国;KR