针对程序性细胞死亡蛋白配体-1(PD-L1)的抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及：一种针对程序性死亡配体1(PD

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】针对程序性细胞死亡蛋白配体
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1(PD
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L1)的抗体及其用途


[0001]本专利技术涉及一种针对PD
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L1(程序性死亡配体1)的抗体或其抗原结合片段、一种编码所述抗体或其抗原结合片段的核酸、一种包含所述核酸的载体、一种用所述载体转染的细胞、一种产生所述抗体或其抗原结合片段的方法、一种用于预防或治疗癌症的包含所述抗体或其抗原结合片段的组合物、以及一种用于预防或治疗癌症的组合疗法的包含所述抗体或其抗原结合片段的组合物。

技术介绍

[0002]PD
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L1是1型跨膜蛋白，其具有在胞外区内的两个Ig样结构域、一个跨膜结构域和一个短胞质结构域。所述胞质结构域没有已知的信号转导基序，这表明PD
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L1没有用于与其受体相互作用的信号传导。PD
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L1的分子量为40kDa(290个氨基酸)，并且由小鼠19号染色体和人9号染色体上的CD274基因编码。PD
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L1是B7蛋白家族的成员，并且与B7.1和B7.2具有约20％氨基酸序列同一性。人PD
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L1与鼠和食蟹猴直系同源物的PD
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L1分别具有70％和93％的氨基酸同一性。
[0003]PD
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L1与其受体PD
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1以770nM的亲和力(KD)结合。PD
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1在激活的T细胞、B细胞和骨髓细胞上表达，并调节细胞免疫应答的激活或抑制。细胞中的PD
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L1表达可以介导针对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)死亡的保护，这是一种在病毒感染期间钝化慢性免疫应答的调节机制。癌症(如慢性和促炎性疾病)通过上调PD
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L1表达来破坏免疫保护途径，从而逃避宿主免疫应答。在主动免疫应答中，IFNγ也上调PD
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L1的表达。
[0004]PD
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L1还通过与另一种蛋白质B7.1(也称为CD80)的相互作用介导免疫抑制，从而阻断通过CD28将激活的次级信号之一传递给T细胞的能力。鉴于肿瘤细胞上的PD
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L1表达和与B7.1的接合，这种特异性相互作用在肿瘤免疫抗性中的相关性仍不清楚。
[0005]人体的免疫功能在抗原识别的同时通过控制共刺激和共抑制信号来调节T淋巴细胞的整体功能。这种调节机制被称为免疫检查点。人体的免疫功能检测由于变化如肿瘤细胞中发生的突变而表达的肿瘤特异性新抗原，并借此去除肿瘤细胞或病毒感染的来源。
[0006]然而，一些肿瘤细胞通过改变肿瘤微环境来抑制免疫功能以避免这种免疫攻击，或通过T细胞免疫耐受或免疫编辑促进免疫逃逸。
[0007]作为这些逃逸策略之一，肿瘤特异性T淋巴细胞的功能通过免疫检查点功能的变化而受到抑制。具体地，通过激活肿瘤细胞中的抑制性免疫检查点，避免了肿瘤特异性T淋巴细胞的攻击。在这点上，可以通过使用针对PD
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1或配体PD
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L1的单克隆抗体抑制其功能来增强被抑制的肿瘤特异性T淋巴细胞活性和作用，从而获得抗肿瘤效果。
[0008]在此技术背景下，本申请的专利技术人已努力开发与PD
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L1特异性结合的抗体。因此，本专利技术人已开发了一种以高亲和力与PD
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L1结合的抗PD
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L1抗体，并确定所述抗PD
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L1抗体能够抑制PD
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1/PD
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L1复合物的形成并且因此可以理想地用作免疫肿瘤药物，从而完成本专利技术。

技术实现思路

[0009]本专利技术的目的是提供针对PD
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L1的新型抗体或其抗原结合片段。
[0010]本专利技术的另一个目的是提供编码所述抗体或其抗原结合片段的核酸。
[0011]本专利技术的仍另一个目的是提供包含所述核酸的载体、用所述载体转染的细胞及其产生方法。
[0012]本专利技术的又另一个目的是提供用于预防或治疗癌症或感染性疾病的组合物，所述组合物包含所述抗体或其抗原结合片段。
[0013]本专利技术的仍又另一个目的是提供用于通过将所述抗体或其抗原结合片段与另一种抗癌剂组合施用来预防或治疗癌症的组合疗法的组合物。
[0014]为实现上述目的，本专利技术提供了一种与PD
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L1结合的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含含有与SEQ ID NO:1的序列具有至少90％序列同源性的序列的重链CDR1；含有与SEQ ID NO:2的序列具有至少90％序列同源性的序列的重链CDR2；含有与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:11的序列具有至少90％序列同源性的序列的重链CDR3；含有与SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:13的序列具有至少90％序列同源性的序列的轻链CDR1；含有与SEQ ID NO:6的序列具有至少90％序列同源性的序列的轻链CDR2；以及含有与SEQ ID NO:7的序列具有至少90％序列同源性的序列的轻链CDR3。
[0015]另外，本专利技术提供了一种编码所述抗体或其抗原结合片段的核酸。
[0016]另外，本专利技术提供了一种包含所述核酸的载体。
[0017]另外，本专利技术提供了一种用所述载体转染的细胞。
[0018]另外，本专利技术提供了一种产生所述抗体或其抗原结合片段的方法，所述方法包括(a)培养上述细胞和(b)从培养的细胞纯化抗体或其抗原结合片段。
[0019]另外，本专利技术提供了一种用于预防或治疗癌症的包含所述抗体或其抗原结合片段作为活性成分的组合物。
[0020]另外，本专利技术提供了一种用于通过将所述抗体或其抗原结合片段与另一种抗癌剂组合施用来预防或治疗癌症的组合疗法的组合物。
【附图说明】
[0021]图1显示了用于验证通过噬菌体展示实验获得的单独抗体克隆(约1400个)在PD
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L1抗原蛋白上的结合的ELISA反应的结果；
[0022]图2显示了针对293T细胞进行的代表性抗体克隆的FACS实验的结果，在所述细胞中人PD
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L1基因在其表面上人工表达以分析PD
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L1结合抗体克隆与在所述细胞表面上的抗原蛋白的结合；
[0023]图3显示了通过用于证实9种代表性抗体克隆的PD
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1/PD
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L1结合抑制性能的基于SPR的性能评价测试得到的与仅含有PD
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L1抗原蛋白的溶液条件(蓝色线)相比抗体样品被包含在一起时的SPR传感图的变化的验证结果；
[0024]图4显示了使用mIFN
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γ处理的小鼠结肠癌细胞系MC38对IgG型PD
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L1靶抗体候选物与小鼠PD
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L1蛋白的结合进行分析的结果；
[0025]图5显示了在候选抗体的基于细胞的体外性能验证本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种与PD
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L1结合的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有与SEQ ID NO:1的序列具有至少90％序列同源性的序列的重链CDR1，含有与SEQ ID NO:2的序列具有至少90％序列同源性的序列的重链CDR2，含有与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:11的序列具有至少90％序列同源性的序列的重链CDR3，含有与SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:13的序列具有至少90％序列同源性的序列的轻链CDR1，含有与SEQ ID NO:6的序列具有至少90％序列同源性的序列的轻链CDR2，以及含有与SEQ ID NO:7的序列具有至少90％序列同源性的序列的轻链CDR3。2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:1的重链CDR1、SEQ ID NO:2的重链CDR2和SEQ ID NO:3的重链CDR3的重链可变区，或含有SEQ ID NO:1的重链CDR1、SEQ ID NO:2的重链CDR2和SEQ ID NO:11的重链CDR3的重链可变区。3.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含：含有SEQ ID NO:5的轻链CDR1、SEQ ID NO:6的轻链CDR2和SEQ ID NO:7的轻链CDR3的轻链可变区，或含有SEQ ID NO:13的轻链CDR1、SEQ ID NO:6的轻链CDR2和SEQ ID NO:7的轻链CDR3的轻链可变...

【专利技术属性】
技术研发人员：金大熙，李应硕，金玟廷，太罗，崔钟湁，
申请(专利权)人：斯克里普斯抗体研究所，
类型：发明
国别省市：