检测MMP-13活性的FRET融合荧光探针、检测方法、DNA和表达载体技术

本发明专利技术提供了一种检测MMP-13活性的FRET融合荧光探针，包括通过MMP-13特异性识别降解多肽底物连接的FRET荧光供体蛋白和FRET荧光受体蛋白。本发明专利技术的探针，其利用FRET荧光供体蛋白、FRET荧光受体蛋白分别作为能量共振转移的荧光供体和受体，并通过一段能被待测的MMP-13特异性识别和降解的多肽底物连接，使其能产生能量共振转移现象。在检测的过程中，探针的上述多肽底物被MMP-13特异性识别和降解，那么FRET荧光供体蛋白和FRET荧光受体蛋白之间由于失去连接，产生相互分离，因此导致FRET现象消失，此时根据荧光信号的变化情况，便可以得到待测的样品中MMP-13的含量，从而实现简捷快速和能更加准确地检测MMP-13活性的目的。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于蛋白酶生物活性检测
，具体涉及一种检测MMP-13活性的 FRET融合荧光探针。
技术介绍
而在细胞内众多生命活动中，胶原酶-3也即基质金属蛋白酶13 (MMP - 13)在胶 原原纤雏的降解过程中发挥重要作用，明胶酶和间质溶素1主要降解软骨基质中的非腔原 成分。目前研宄认为基质金属蛋白酶13在软骨中表达水平升高是导致骨关节炎关节软骨 退变的主要因素之一。基质金属蛋白酶13 (MMP - 13)所主导的II型胶原的降解和破坏会导 致软骨支架结构的崩塌，软骨细胞赖以发挥功能的结构基础遭到破坏，软骨基质代谢的平 衡破坏进一步加剧，激发进一步的炎症反应和软骨组织破坏，造成炎症与破坏的恶性循环。 因此MMP - 13的浓度变化，活性高低能够及时反应骨关节炎关节软骨退变的进展情况和严 重程度，对其浓度的测定可以更有利地掌握病变进展和施治时机。临床上检测滑膜组织中 MMP - 13的表达有助于指导骨性关节炎的治疗及病情的评估，将MMP - 13和与其他的生物 学指标的检测可以更高效率地确定OA的进展情况，有利于OA的早期诊断和预防。 而在现有滑膜组织中的MMP 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测MMP‑13活性的FRET融合荧光探针，其特征在于，包括FRET荧光供体蛋白、FRET荧光受体蛋白；所述FRET荧光供体蛋白和FRET荧光受体蛋白之间通过MMP‑13特异性识别降解多肽底物连接。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王大平，梁宇杰，段莉，
申请(专利权)人：深圳市第二人民医院，
类型：发明
国别省市：广东;44