本发明专利技术属纳米材料技术领域，具体涉及一种人血清白蛋白金纳米簇的制备方法。包括如下步骤：1)将氯金酸溶液缓慢加入到人血清白蛋白溶液中，剧烈搅拌后加入NaOH溶液调节pH值为11～12.5，于室温～37℃下，选择超声开-关比例对混合溶液进行超声，得到金纳米簇溶液；2)将金纳米簇溶液与ZnCl2溶液进行共轭沉淀，离心后取沉淀并用蒸馏水洗涤，再将沉淀物重新溶入PBS缓冲液中，于PBS缓冲液、去离子水中分别透析后得到人血清白蛋白金纳米簇溶液。本发明专利技术采用人血清白蛋白代替异源蛋白作为保护剂和还原剂来制备金簇，消除了人体的免疫原性，在短时间内可以制备出粒径小且分布均一，量子产率高，具有强烈近红外荧光的金纳米簇。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属纳米材料
，具体涉及。
技术介绍
癌症，又称为恶性肿瘤，严重威胁着人类的健康和性命，在当今医学上仍被看作不 治之症。在癌症的治疗过程中，对肿瘤细胞进行有效的初期诊断和实时追踪，是提升其治愈 率和存活率的重要手段。而一些传统荧光成像诊断材料在一定的光激发下很轻易地被漂 白，成分上具有毒性，生物相容性、稳定性差，对肿瘤进行诊断成像的同时，对其它正常组织 也造成了严重的伤害。 随着纳米科技的快速发展，纳米材料与医学的联系亦愈发紧密。金纳米簇是近几 年来发展比较快的一种新型荧光纳米材料，由于具有粒径小，抗光漂白，斯托克位移大，毒 性低，高强荧光，良好的生物相容及合成条件简单等优点，在近红外分子成像和医学诊断等 方面具有潜在的发展前景。而当前的一些关于金纳米簇制备方法及其性能的研宄存在以 下几个方面的问题：（1)以牛血清蛋白/谷胱甘肽等异源蛋白作为还原剂和保护价剂来制 备金纳米簇是最为常见的方法之一，但这种异源蛋白质在进入人体后会诱发抗体抗原反应 而被清除，引起免疫原性，甚至会导致过敏反应；（2)水浴法也是制备金纳米簇最为常见的 方法，但反应时间耗时过长，通常需要24h，量子产率低；此外，金纳米簇的粒径、量子产率、 最大发射峰的波长等均会对金纳米簇的荧光特性造成一定的影响，如何快速制备出具有优 异荧光特性的金纳米簇仍是亟待解决的问题；（3)可见光区成像：可见光区成像会存在许 多的问题，比如遭受活体组织中内源性物质的吸收、散射等对光学成像会造成一定的影响； 而在近红外波段（650nm~900nm)，组织的吸收、散射现象及本身的自发荧光很低，在此波 长范围内组织的自发荧光对被监控的生物体的影响甚微，能显著提高成像的准确度和灵敏 度。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术存在的不足，目的在于提供一种人血清白蛋白金纳米簇 (HSA-AuNCs)的制备方法。 为解决上述专利技术目的，本专利技术所采用的技术方案为： ，它包括如下步骤： 1)将氯金酸溶液缓慢加入到人血清白蛋白（HSA)溶液中，剧烈搅拌混合均匀，然 后加入NaOH溶液调节pH值为11~12. 5,于室温~37°C下，选择合适的超声开-关比例， 对混合溶液施加一定功率的超声，即可得到深褐色的金纳米簇溶液； 2)将步骤1)制备好的金纳米簇溶液与ZnCl2溶液共轭沉淀得到浑浊溶液，离心后 取沉淀，采用蒸馏水洗涤，然后将沉淀重新溶入PBS缓冲液中，于PBS缓冲液、去离子水中分 别透析后得到清亮的棕色溶液，即为人血清白蛋白金纳米簇溶液。 按上述方案，步骤（1)中所述超声的开-关比例为5:5~9:1，即超声开5~9min， 关1~5min，多次重复循环，共超声30~120min。 按上述方案，步骤（1)中所述超声的开-关比例为7:3,即超声开7min，关3min，多 次重复循环，共超声90min。 按上述方案，步骤（1)中所述氯金酸溶液的浓度为l〇g/L，用量为I. 03mL ;所述人 血清白蛋白溶液的浓度为50mg/mL，用量为2. 5mL ;所述NaOH溶液的浓度为lmol/L，加入量 为 0· 25mL。 按上述方案，步骤（2)中所述金纳米簇溶液与2]1(：12溶液的体积比为1:1，所述 ZnCl2溶液的浓度为10g/L。 按上述方案，步骤（2)中所述离心的转速为2000rpm，离心时间为15min。 按上述方案，所述PBS缓冲液的pH值为7. 4。 本专利技术的有益效果是： (1)本专利技术利用超声化学具有强激发能量的特性对物质的化学反应进行加速，提 高反应产率，采用人血清白蛋白（HSA)代替牛血清白蛋白等异源蛋白作为保护剂和还原剂 来制备金簇，消除了人体的免疫原性，在短时间内成功制备出了粒径小且分布均一，量子产 率高，具有强烈近红外荧光的金纳米簇，并且该金纳米簇在模拟人体环境中比较稳定。 (2)本专利技术初次尝试将制备得到的人血清白蛋白金纳米簇进行近红外成像测试， 结果显示，人血清白蛋白金纳米簇能够发出明亮的近红外荧光，具有潜在的分子成像应用 前景。【附图说明】 图1为实施例3制备的人血清白蛋白金纳米簇的粒径表征图。 图2为实施例1~5制备的人血清白蛋白金纳米簇的荧光测试光谱图。 图3为本专利技术制备的人血清白蛋白金纳米簇置于pH值为7. 4的缓冲溶液中随时 间延长变化的荧光光谱图。 图4为本专利技术制备的人血清白蛋白金纳米簇置于等渗溶液中随时间延长变化的 荧光光谱图。【具体实施方式】 为了更好地理解本专利技术，下面结合实施例进一步阐明本专利技术的内容，但本专利技术的 内容不仅仅局限于下面的实施例。 实施例1 利用超声优化制备人血清白蛋白为模板的金纳米簇（HSA-AuNCs)的方法，它包括 如下步骤： 1)将I. 03mL氯金酸溶液（10g/L)缓慢加入到2. 5mL人血清白蛋白（HSA)溶液 (50mg/mL)中，剧烈搅拌混合均勾，然后加入0. 25mL lmol/L的NaOH，搅拌几分钟彻底混合 后，室温下，对其施加功率为150W的超声，设定超声的开关时间比例为5:5,即超声开5min， 关5min，多次循环重复，超声一小时即可得到深褐色金簇溶液； 2)取3ml制备好的金簇溶液装入玻璃瓶中，迅速注入3ml 10g/L的ZnCl2溶液，共 轭沉淀得浑浊溶液，2000rpm下离心15min ;然后取沉淀用蒸馏水洗涤，整个过程重复三次； 然后将沉淀物重新溶入Iml PBS (PH = 7. 4)缓冲液中，于PBS缓冲液中透析两天，去离子水 中透析两天，得到清亮的棕色溶液，即为人血清白蛋白金纳米簇。 实施例2 利用超声优化制备人血清白蛋白为模板的金纳米簇（HSA-AuNCs)的方法，它包括 如下步骤： 1)将I. 03mL氯金酸溶液（10g/L)加入到2. 5mL人血清白蛋白（HSA)溶液（50mg/ mL)中，剧烈搅拌混合均勾，然后加入0. 25mL lmol/L的NaOH，搅拌几分钟彻底混合后，室 温下，对其施加功率为150W的超声，设定超声的开关时间比例为6:4,即超声开6min，关 4min，多次循环重复，超声一小时即得到褐色溶液； 2)取3ml制备好的金簇溶液装入玻璃瓶中，迅速注入3ml 10g/L的ZnCl2溶液，共 轭沉淀得浑浊溶液，2000rpm下离心15min，然后取沉淀用蒸馏水洗涤，整个过程重复三次； 然后将沉淀物重新溶入Iml PBS (PH = 7. 4)缓冲液中，于PBS缓冲液中透析两天，去离子水 中透析两天，得到清亮的棕色溶液，即为人血清白蛋白金纳米簇。 实施例3 利用超声优化制备人血清白蛋白为模板的金纳米簇（HSA-AuNCs)的方法，它包括 如下步骤： 1)将I. 03mL氯金酸溶液（10g/L)加入到2. 5mL人血清白蛋白（HSA)溶液（50mg/ mL)中，剧烈搅拌混合均勾，然后加入0. 25mL lmol/L的NaOH，搅拌几分钟彻底混合后，室温 下，对其施加功率为150W的超声，设定超声的开关时间比例为7:3,即超声开7min，关3min， 多次循环重复，超声一小时得到褐色溶液； 2)取3ml制备好的金簇溶液装入玻璃瓶中，迅速注入3ml 10g/L的ZnCl2溶液，共 轭沉淀得浑浊溶液，2000rpm下离心15min ;然后本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种人血清白蛋白金纳米簇的制备方法，其特征在于，它包括如下步骤：1）将氯金酸溶液缓慢加入到人血清白蛋白溶液中，剧烈搅拌混合均匀，然后加入NaOH溶液调节pH值为11~12.5，于室温~37℃下，选择合适的超声开‑关比例，对混合溶液施加一定功率的超声，即可得到深褐色的金纳米簇溶液；2）将步骤1）制备好的金纳米簇溶液与ZnCl2溶液共轭沉淀得到浑浊溶液，离心后取沉淀，采用蒸馏水洗涤，然后将沉淀重新溶入PBS缓冲液中，于PBS缓冲液、去离子水中分别透析后得到清亮的棕色溶液，即为人血清白蛋白金纳米簇溶液。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：黄进，张娣，黄海涛，原弘，夏涛，余家会，
申请(专利权)人：武汉理工大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42
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