氟代7‑羟基香豆素化合物在蛋白激酶抑制剂或/和抗肿瘤药物中的应用，属于药物化学技术领域。本发明专利技术公开了氟代7‑羟基香豆素化合物的医药应用，经体外蛋白激酶活性及抗肿瘤细胞增殖活性检测，该化合物可抑制蛋白激酶CK2活性，并对肺癌细胞株A549及宫颈癌细胞株Hela的增殖具有一定的抑制作用，可应用作为蛋白激酶抑制剂及抗肿瘤药物。
【技术实现步骤摘要】
氟代7-羟基香豆素化合物在蛋白激酶抑制剂或/和抗肿瘤药物中的应用
本专利技术属于药物化学
，具体涉及氟代7-羟基香豆素化合物作为蛋白激酶抑制剂或/和抗肿瘤细胞增殖医药领域的应用。
技术介绍
蛋白激酶CK2是一种多功能的丝氨酸/苏氨酸类蛋白激酶，通过磷酸化多种底物，参与诱导细胞生长、抑制细胞凋亡及调节信号通路中癌基因和抑癌基因的活性等生理过程，具有促增长且抗凋亡的特性而成为重要的抗癌靶标。ATP竞争性抑制剂通过结合到催化活性口袋而发挥抑制功能。目前，仅有化合物CX-4945刚刚进入临床II期试验阶段，因此，新型蛋白激酶CK2的抗肿瘤抑制剂尚待研发。香豆素类化合物及其衍生物在自然界中分布极其广泛，具有抗菌、消炎、抗肿瘤、抗凝结等生物活性，具有潜在的药用价值，被认定为重要的药物先导化合物。现有技术表明，未被氟取代的4-甲基7-羟基类香豆素化合物作为蛋白激酶CK2的抑制剂，具有较低的抑制活性。
技术实现思路
本专利技术涉及氟代7-羟基香豆素化合物作为蛋白激酶抑制剂和抗肿瘤细胞增殖剂医药领域中的应用。现有技术所得到的蛋白激酶CK2抑制剂4-甲基-7-羟基香豆素类化合物，仅R7位OH与CK2催化活性口袋中的正电性区形成单一的极性作用,具有较低的抑制活性，本专利技术人基于7-羟基类香豆素化合物骨架，在不同的位置进行不同性质的官能团修饰优化，最终确定4-三氟甲基7-羟基香豆素类化合物，具有较高蛋白激酶CK2抑制活性及抗肿瘤细胞增殖活性。本专利技术氟代7-羟基香豆素化合物在蛋白激酶抑制剂或/和抗肿瘤药物中的应用，其中的氟代7-羟基香豆素化合物结构式如下：其中，R6为H、OH、Cl的任意一种，R8为H、OH、Cl的任意一种，但R6和R8不同时为OH或H。所述氟代7-羟基香豆素化合物的优选结构如式2、式3及式4所示。式2、式3及式4所示的氟代7-羟基香豆素化合物作为蛋白激酶抑制剂的应用。进一步，式1所示的氟代7-羟基香豆素类化合物作为蛋白激酶CK2抑制剂的应用，尤其式2、式3及式4对应的IC50值分别为107μM，56.23μM及0.4μM，活性优于甲基取代的同系列香豆素类化合物。式1所示的氟代7-羟基香豆素类化合物作为抗肿瘤细胞增殖药物的应用。进一步，式2、式3及式4所示的氟代7-羟基香豆素类化合物具有一定抗肿瘤细胞增殖的活性。肿瘤细胞株包括肺癌A549及宫颈癌Hela，活性优于甲基取代同系列香豆素类化合物。本专利技术中，由于式1所述化合物其R7的OH与CK2催化活性口袋中的正电性区形成单一的极性作用，具有一定的抑制活性，而当R4为CF3时，在原有R7位OH与正电性区所形成极性作用的基础上，新增了CF3的氟与CK2催化活性口袋铰链区形成的卤键作用，从而使化合物的抑制活性得以提高。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步说明，但本专利技术并不限于以下实施例。实施例1结构式2所示化合物的制备方法将化合物1,4-苯醌(0.500g，4.63mmol))分散于3mL乙酸酐中，随后加入0.12mL浓硫酸。反应液被加热至50℃，1小时后恢复至室温，用饱和碳酸氢钠和乙酸乙酯分液。有机相用饱和食盐水洗涤，以无水硫酸镁干燥，柱层析(正己烷：乙酸乙酯＝5：1)得中间产物1,2,4-苯三酚醋酸酯(0.82g)，为黄色固体，产率为70％。将化合物1,2,4-苯三酚醋酸酯(0.488g，1.94mmol)分散于2mL70％高氯酸中，随后加入化合物三氟乙酰乙酸乙酯(0.34mL，2.3mmol)。反应液在搅拌下被加热至80℃，3小时后恢复至室温，以饱和碳酸氢钠和乙酸乙酯分液。有机相用饱和食盐水洗涤后，以无水硫酸镁干燥，柱层析(正己烷：乙酸乙酯＝2：1)，得到结构式2所示化合物(0.32g)，为浅黄色固体，产率为68％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):10.59(brs,1H),9.76(brs,1H),7.03(d,1H,J＝1.4Hz),6.85(s,1H),6.69(s,1H).HRMS(ESI)m/zcalculatedforC10H5O4F3[M+H]+:246.0067,found:246.0140。实施例2结构式3所示化合物的制备方法将化合物1,2,3-苯三酚(0.500g，3.97mmol)分散于2mL70％的高氯酸，随后加入化合物三氟乙酰乙酸乙酯(0.70mL，4.8mmol)。反应液在搅拌下被加热至80℃，2小时后恢复至室温，以饱和碳酸氢钠溶液和乙酸乙酯分液。有机相分离后用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥后，以柱层析分离(正己烷：乙酸乙酯＝5：1)，得到结构式3所示化合物(0.60g)，为浅黄色固体，产率为61％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):7.06(dd,1H,J＝2.1Hz,J＝8.8Hz),6.91(d,1H,J＝8.8Hz),6.72(s,1H).HRMS(ESI)m/zcalculatedforC10H5O4F3[M+H]+:246.0067,found:246.0140。实施例3结构式4所示化合物的制备方法将化合物2-氯-1,3-苯二酚(0.400g，2.07mmol))分散于1.5mL70％的高氯酸中，随后加入化合物三氟乙酰乙酸乙酯((0.36mL，2.48mmol)。)。该反应液在搅拌下被加热至80℃，2小时后恢复至室温，用饱和碳酸氢钠和乙酸乙酯分液。有机相用饱和食盐水洗涤后，以无水硫酸镁干燥，柱层析分离(正己烷：乙酸乙酯＝2：1)，得到结构式4所示化合物(0.39g)，为浅黄色固体，产率为72％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):11.74(brs,1H),7.52(dd,1H,J＝1.9Hz,J＝9.0Hz),7.10(d,1H,J＝9.0Hz),6.86(s,1H).HRMS(ESI)m/zcalculatedforC10H4O3F3Cl[M+H]+:263.9801,found:263.9733。实施例4香豆素化合物抑制蛋白激酶CK2活性测定本专利技术中式2、式3及式4，以及表1中化合物5，6及7作为受试化合物。将酶反应混合液(包括50mMTris-HCl，10mMMgCl2，10μMγ32P－ATP和去磷酸化酪蛋白2g/L)设置为阴性对照，向96孔微量培养板中分别加入酶反应混合液稀释过的本专利技术表1中不同浓度的受试化合物，加入CK2启动反应。室温反应10min，取一定量反应液点至直径2cm的P18磷酸纤维素滤纸上终止反应，阴干，用85mM的正磷酸及丙酮洗涤，80℃烤干，加入闪烁液，液闪仪计数。以浓度的对数为横坐标，相应浓度抑制率的概率单位为纵坐标绘制曲线，求得IC50值。结果见表1。实施例5香豆素化合物抗肿瘤细胞增殖活性测定采用MTT法测定式2、式3及式4所示的化合物及表1中化合物5，6及7对肺癌细胞株A549及宫颈癌细胞株Hela的抑制作用。将处于细胞对数生长期的肿瘤细胞配成一定浓度的细胞悬液，以每孔7500个细胞量接种到96孔板内。在37℃，5％CO2条件下孵育培养24h，孵育培养24h，设置阴性对照3孔，其他孔每孔加入本专利技术表1不同浓度的受试化合物，培养48h。每孔加入MTT，继续培养4h，终止培养。向每孔加入DMSO溶解结晶，用酶标仪在490-570nm波长范围内测定其光本文档来自技高网...
【技术保护点】
氟代7‑羟基香豆素化合物在蛋白激酶抑制剂或/和抗肿瘤药物中的应用，其中的氟代7‑羟基香豆素化合物结构式如下：R6为H、OH、Cl的任意一种，R8为H、OH、Cl的任意一种，但R6和R8不同时为OH或H。
【技术特征摘要】
2014.11.19 CN 20141066492941.氟代7-羟基香豆素化合物在制备作为抗肿瘤药物中的...
【专利技术属性】
技术研发人员：张娜，陈文娟，张凤娟，钟儒刚，
申请(专利权)人：北京工业大学，
类型：发明
国别省市：北京;11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。