一种具有高抗氧化性的大豆油脂体的提取方法技术

一种具有高抗氧化性的大豆油脂体的提取方法，属于保健食品或生物技术领域。本发明专利技术的具有高抗氧化性的大豆油脂体以大豆种子为原料，采用浸泡、研磨、过滤、离心、均质等工艺提取而成。本发明专利技术以水为介质提取油脂体，方法无毒，操作简便，能得到稳定的及纯度较高的大豆油脂体，利于在食品中的应用。本发明专利技术提取的油脂体也可以干燥或再水化地被添加至任何其他食品或动物饲料产品中，如花生酱等。

【技术实现步骤摘要】
一种具有高抗氧化性的大豆油脂体的提取方法
本专利技术属于保健食品或生物
，涉及一种具有高抗氧化性和稳定性的大豆油脂体的制备方法。
技术介绍
大豆将脂类作为主要储藏物质存于某种亚细胞器颗粒中，分散成许多小的相对稳定的亚细胞微滴，这些小的亚细胞微滴称为油脂体（oilbody)。大豆油脂体的粒径是0.2～0.5μm，内部为液态的三酰甘油，外部是由单层磷脂分子及其镶嵌蛋白（oleosin）组成的半单位膜。目前，国内外主要用蛋白质作表面活性剂，用油、蛋白质和水通过均质的过程生产乳液，用作乳化剂应用在食品工业中，这种乳化剂极不稳定且该过程需要消耗大量能量，并且工业上通常用有机溶剂从植物种子中提取植物油，如正己烷、异丙醇等，这些有机溶剂一般有毒，易燃易爆，容易挥发，在植物油提取过程中，有机溶剂的浸泡容易造成植物蛋白的变性并且容易残留。因此，迫切需要一种无毒、不易挥发的溶剂提取植物油和蛋白，且不影响它们的功能性质。而以水为介质提取大豆油脂体的方法，使大豆油脂体作为天然的稳定的乳化剂直接添加到食品中，省去了溶剂提取植物油的过程，安全无毒，在食品工业中应用有一定的优势。近年来，大豆油脂体已经得到了越来越多的关注，因为其可能应用在食品、化妆品及制药工业中，而且不需要乳化和均质过程。因此，对大豆油脂体的提取方法进行研究有一定的实际意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种具有高抗氧化性的大豆油脂体的提取方法，该方法提取的大豆油脂体可作为天然的稳定的乳化剂。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：一种具有高抗氧化性的大豆油脂体的提取方法，以大豆种子为原料，采用浸泡、研磨、过滤、离心、均质等工艺提取而成，具体步骤如下：（1）浸泡：将80.00±1.00g大豆种子用450~500ml蒸馏水浸泡12~14h。（2）研磨：将浸泡之后颗粒饱满的种子加入到组织捣碎机中进行研磨，得到匀浆物。（3）过滤：匀浆物过滤。（4）分离：a、收集滤液进行分装离心，每150~200ml滤液置于500ml离心管的底部，每管用150~200ml浮选介质（含0.4M蔗糖和10mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5）层叠在上层，并将离心管离心；b、收集所有离心管上层的油脂体并重新悬浮于1L洗涤溶液（含有0.1%吐温20、0.2M蔗糖和5mM磷酸钠的缓冲液，pH7.5）中，然后被分装放置在500ml离心管(每管150~200ml)中，每管用150~200ml的10mM的磷酸钠缓冲液（pH为7.5）层叠在顶部，离心；c、收集所有离心管上层的油脂体并重新悬浮于1L离子洗脱缓冲液（含0.6M蔗糖、2MNaCl和10mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5）中，悬浮液被分装放置在500ml离心管底部（每管150~200ml），每管用150~200ml浮选介质（含0.25M蔗糖、2MNaCl和10mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5）层叠在顶部，并将离心管离心；d、收集所有离心管上层的油脂体并重新悬浮于1L9M尿素中，悬浮液在振荡器上室温震荡，然后分装放置在500ml的离心管的底部（每管150~200ml），每管用150~200ml的10mM的磷酸钠缓冲液（pH7.5）层叠在顶部，将离心管离心；e、收集所有离心管上层的油脂体并重新悬浮在1L研磨介质（含0.6M蔗糖和10mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5）中，然后放置在500ml的离心管的底部（每管150~200ml），每管用150~200ml浮选介质（含0.4M蔗糖和10mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5）层叠在顶部，离心；f、再次收集所有离心管上层油脂体，并重新悬浮在1L研磨介质（含0.6M蔗糖和10mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5）中，然后放置在500ml的离心管的底部（每管150~200ml），每管用150~200ml浮选介质（含0.4M蔗糖和10mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5）层叠在顶部，离心。（5）收集所有离心管上层的油脂体，均质处理，即得到油脂体。本专利技术具有如下有益效果：1、以水为介质提取油脂体，方法无毒，操作简便，能得到稳定的及纯度较高的大豆油脂体，利于在食品中的应用。2、本专利技术提取的大豆油脂体组分如表1所示，大豆油脂体在25℃条件下贮藏过程中磷脂组分的变化如表2所示。表1大豆共和大豆油脂体组分脂肪（%）蛋白质（%）水分（%）灰分（%）大豆20.9±0.2937.55±0.066.07±0.054.97±0.08油脂体41.51±3.471.99±0.1549.51±2.290.27±0.11表2大豆油脂体在25℃条件下贮藏过程中磷脂组分的变化0d1d7d14d脑磷脂0.59±0.05b0.66±0.13ab0.78±0.15a0.61±0.02ab卵磷脂1.35±0.11b1.44±0.27ab1.71±0.29a1.25±0.04b溶血磷脂酰胆碱0.05±0.00a0.05±0.01a0.04±0.01a0.04±0.02a3、本专利技术提取的油脂体也可以干燥或再水化地被添加至任何其他食品或动物饲料产品中，如花生酱等。附图说明图1为不同贮藏时间下油脂体TBARS值的变化；图2为不同贮藏时间下油脂体过氧化值的变化；图3为温度对大豆油脂体乳化性和乳化稳定性的影响。具体实施方式下面对本专利技术的技术方案作进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本专利技术技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的精神和范围，均应涵盖在本专利技术的保护范围中。具体实施方式一：本实施方式提供了一种具有高抗氧化性的大豆油脂体的提取方法，以大豆种子为原料，采用浸泡、研磨、过滤、离心、均质等工艺提取而成，具体步骤如下：（1）浸泡：将80g大豆种子在使用之前用450ml水浸泡12h。（2）研磨：将浸泡之后颗粒饱满的种子加入到组织捣碎机中，14000rpm研磨2min。研磨介质为1L含0.6M蔗糖和10mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5。（3）过滤：匀浆物通过三层粗棉布过滤。（4）离心：a、收集滤液进行分装离心，每150~200ml滤液置于500ml离心管的底部，每管用150~200ml浮选介质（含0.4M蔗糖和10mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5）层叠在上层，10,000g离心20min。b、收集所有离心管上层的油脂体并重新悬浮于1L洗涤溶液（含有0.1%吐温20、0.2M蔗糖和5mM磷酸钠的缓冲液，pH7.5）中，然后分装放置在500ml离心管中（每管150~200ml），每管用150~200ml的10mM的磷酸钠缓冲液（pH为7.5）层叠在顶部，离心。c、收集所有离心管上层的油脂体并重新悬浮于1L离子洗脱缓冲液（含0.6M蔗糖、2MNaCl和10mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5），悬浮液被分装放置在500ml离心管底部（每管150~200ml），每管用150~200ml浮选介质（含0.25M蔗糖、2MNaCl和10mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5）层叠在顶部，并将离心管离心。d、收集所有离心管上层的油脂体并重新悬浮于1L9M尿素中，悬浮液在振荡器上室温震荡，60rpm，10min，然后分装放置在500ml的离心管的底部（每管150~200ml），每管用150~200ml的10mM的磷酸钠缓冲液（pH7.5）层叠在顶部，将离心管离心。e、收集所有离心管上本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有高抗氧化性的大豆油脂体的提取方法，其特征在于所述方法具体步骤如下：（1）浸泡：将80.00±1.00 g大豆种子用450~500 ml蒸馏水浸泡12 ~14 h；（2）研磨：将浸泡之后颗粒饱满的种子加入到组织捣碎机中进行研磨，得到匀浆物；（3）过滤：匀浆物过滤；（4）分离：a、收集滤液进行分装离心，每150~200 ml滤液置于500 ml离心管的底部，每管用150~200 ml浮选介质层叠在上层，并将离心管离心；b、收集所有离心管上层的油脂体并重新悬浮于1L洗涤溶液中，然后每150~200 ml悬浮液放置在500 ml离心管中，每管用150~200 ml的10 mM的磷酸钠缓冲液层叠在顶部，离心；c、收集所有离心管上层的油脂体并重新悬浮于1L离子洗脱缓冲液中，每150~200 ml悬浮液放置在500 ml离心管底部，每管用150~200 ml浮选介质层叠在顶部，并将离心管离心；d、收集所有离心管上层的油脂体并重新悬浮于1L 9 M 尿素中，悬浮液在振荡器上室温震荡，然后每150~200 ml悬浮液放置在500 ml的离心管的底部，每管用150~200 ml的10 mM的磷酸钠缓冲液层叠在顶部，将离心管离心；e、收集所有离心管上层的油脂体并重新悬浮在1L研磨介质中，然后每150~200 ml悬浮液放置在500 ml的离心管的底部，每管用150~200 ml浮选介质层叠在顶部，离心；f、再次收集所有离心管上层油脂体，并重新悬浮在1L研磨介质中，然后每150~200 ml悬浮液放置在500 ml的离心管的底部，每管用150~200 ml浮选介质层叠在顶部，离心；（5）收集所有离心管上层的油脂体，均质处理，即得到油脂体。...

【技术特征摘要】
1.一种具有高抗氧化性的大豆油脂体的提取方法，其特征在于所述方法具体步骤如下：（1）浸泡：将80.00±1.00g大豆种子用450~500ml蒸馏水浸泡12~14h；（2）研磨：将浸泡之后颗粒饱满的种子加入到组织捣碎机中进行研磨，得到匀浆物，研磨介质为含0.6M蔗糖和10mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5；（3）过滤：匀浆物过滤；（4）分离：a、收集滤液进行分装离心，每150~200ml滤液置于500ml离心管的底部，每管用150~200ml浮选介质层叠在上层，并将离心管离心，浮选介质为含0.4M蔗糖和10mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5；b、收集所有离心管上层的油脂体并重新悬浮于1L洗涤溶液中，洗涤溶液为含有0.1%吐温20、0.2M蔗糖和5mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5；然后每150~200ml悬浮液放置在500ml离心管中，每管用150~200ml的10mM的磷酸钠缓冲液层叠在顶部，离心；c、收集所有离心管上层的油脂体并重新悬浮于1L离子洗脱缓冲液中，离子洗脱缓冲液为含0.6M蔗糖、2MNaCl和10mM磷酸钠的缓冲液，pH为7.5；每150~200ml悬浮液放置在500ml离心管底部，每管用150~200ml浮选介质层叠在顶部，并将离心管离心；d、收集所有离心管上层的油脂体并重新悬浮于1L9M尿素中，悬浮液在振荡器上室温震荡，然后每150~200ml悬浮液放置在500ml的离...

【专利技术属性】
技术研发人员：侯俊财，江连洲，王胜男，梁新婷，刘悦，王秋岭，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23