一种人外周血单个核细胞的冻存保护剂及保存方法技术

本发明专利技术公开了一种人外周血单个核细胞的冻存保护剂，由以下组分组成：培养基43份~53份；自体血浆30份~40份；二甲基亚砜12份~17份；人血白蛋白5%~7%；海藻糖0.17molL/~0.23mol/L。本发明专利技术公开的保存方法为，采集新鲜抗凝血液，使用人血白蛋白将外周核细胞配置成细胞悬液，然后加入等体积的冻存保护剂，混合均匀后于-90℃~-70℃的条件下保存10h~20h，然后转入液氮中保存。本发明专利技术的公开的冻存保护剂和保存方法，可以使冻存后的细胞同时具有较高的活率和较强的细胞活性，缩短CIK细胞诱导扩增的周期。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物细胞保存的
，具体涉及到一种人外周血单个核细胞的冻 存保护剂及保存方法。
技术介绍
人外周血单个核细胞指外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞、单核细胞、树 突状细胞等细胞。人外周血单个核细胞是制备细胞因子诱导的CIK细胞的种子细胞，也是 诱导生成特定淋巴细胞的种子细胞。在实际临床使用中，通常会在患者健康时提取人外周 血单个核细胞进行冻存，在需要时再对其进行诱导扩增，因此冻存前后人外周血单个核细 胞的质量和数量直接关系到诱导CIK细胞的周期和细胞质量，这就要求在人外周血单个核 细胞冻存的过程中，将细胞的损伤降到最低；使细胞在复苏后有较高的活率；复苏后细胞 形态规则，扩增周期短。 现有的人外周血单个核细胞冻存技术主要采用血清、渗透性冷冻保护剂和培养基 配制冻存液对细胞进行冻存；或者在冻存保护液中加入羟乙基淀粉，采用这种方法冻存的 细胞在回输过程中可能导致过敏性反应，并且在复苏之后细胞的虽然存活率较高但细胞活 性较低，主要表现为不规则形态的细胞较多，并且在随后诱导培养杀伤细胞过程中，扩增周 期较长。 因此要能够满足实际的需要本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人外周血单个核细胞的冻存保护剂，由以下组分组成：培养基43份～53份；自体血浆30份～40份；二甲基亚砜12份～17份；人血白蛋白5％～7％；海藻糖0.17molL/～0.23mol/L。

【技术特征摘要】
1. 一种人外周血单个核细胞的冻存保护剂，由以下组分组成： 培养基43份?53份；自体血浆30份?40份；二甲基亚砜12份?17份； 人血白蛋白5%?7% ;海藻糖0· 17molL/?0· 23mol/L。2. 如权利要求1所述的保护剂，其特征在于：所述组分的组成为： 培养基50份；自体血浆35份；二甲基亚砜15份；人血白蛋白5% ;海藻糖0. 2mol/L。3. -种人外周单个核细胞的保存方法，其特征在于，包括以下步骤： A、 采集新鲜的抗凝人外周血进行离心处理，分别提取血浆和外周血单个核细胞；取血 浆配置人血白蛋白，外周血单个核细胞采用磷酸盐缓冲液清洗数次；使用人血白蛋白将清 洗后的外周血单个核细胞制成细胞悬液； B、 配置冻存保护剂，取培养基43...

【专利技术属性】
技术研发人员：张清友，王翔，李昌旭，海泉，李海燕，李俊，赵峻，
申请(专利权)人：成都清科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51