【技术实现步骤摘要】
一种CHO细胞无血清培养基及其制备方法
本专利技术涉及生物
,尤其涉及一种CHO细胞无血清培养基及其制备方法。
技术介绍
传统的含血清培养基中的血清给科研和生产等带来多种不利因素。血清的主要作用在于给细胞提供生长增值所需的激素、生长因子、转移蛋白和其他营养物质,但其存在很多缺点:批间差异较大、需要大量验证工作、使用不方便、成分不明确、有抑制生长的成分、尤其不利于疫苗和单克隆抗体等目的产物的分离纯化、容易被病毒和支原体感染;血清昂贵可能发生供应紧张,血清的来源不稳定等问题。 近年来,国内开始针对CHO细胞无血清培养开发了许多无血清培养基产品,但是大多数均为了保证细胞的活性,在已有DMEM,DMEM/F12,MDM等基础培养基的基础上添加了不同来源的蛋白质等添加剂,由于成分复杂,蛋白质及其水解产物会在细胞培养过程中带来污染,影响下游分离纯化,目的产物表达量降低。 国外商品化的CHO细胞无血清培养基存在如下现状:大多以液体的形式提供,不适合大规模生产、价格昂贵、培养基成分配方不确定,Sigma、In-vitrogen、Hyclone和Lonza等国际知名培养基,每升价格高达上千元,在一定程度上限制了它的实际应用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种CHO细胞无血清培养基及其制备方法,通过加入化学成分明确的多种氨基酸、维生素、无机盐、微量元素及生物碱、脂肪酸及激素等补充因子,使该培养基能使CHO细胞在悬浮培养条件下无需适应即可快速生长,细胞密度和细胞活性都可以与有血清培养基相当,既能满足CHO细胞培养需求,又能有 ...
【技术保护点】
一种CHO细胞无血清培养基,其特征在于,包括下列重量份的组分:氨基酸组合物 1300‑2000;维生素组合物 12‑25;无机盐组合物 10‑15;微量元素组合物 0.005‑0.006;无菌水 900‑1100。
【技术特征摘要】
1.一种CHO细胞无血清培养基,其特征在于,包括下列重量份的组分: 氨基酸组合物1300-2000 ; 维生素组合物12-25 ; 无机盐组合物10-15 ; 微量元素组合物0.005-0.006 ; 无菌水 900-1100。2.如权利要求1所述的CHO细胞无血清培养基,其特征在于,所述氨基酸组合物包括下列重量份的组分中的一种或几种: 丙氨酸7.35-31.5、精氨酸152.13-211.5、天冬酰胺40.26-250.48、半胱氨酸38.26-45.12、谷氨酸 8.14-32.51、甘氨酸 8.14-30.45、组氨酸 30.48-105.98、异亮氨酸53.41-131.25 、亮氨酸 58.94-167.23、赖氨酸 91.25-193.26、甲硫氨酸 15.26-61.42、苯丙氨酸 34.12-83.56、脯氨酸 17.34-35.41、丝氨酸 27.31-95.15、苏氨酸 54.16-97.24、色氨酸8.27-52.41、酪氨酸 57.21-145.13、缬氨酸 53.25-118.31 和谷氨酰胺 583.41-1248.93 ; 其中所述氨基酸均为L-氨基酸。3.如权利要求2所述的CHO细胞无血清培养基,其特征在于,所述维生素组合物包括下列重量份的组分中的一种或几种: 维生素 B6 0.01-0.2、维生素 B12 0.02-0.42、维生素 C9-10、维生素 E0.30-0.31、生物素 0.4-1.21、氯化胆碱 0.064-0.072、D-泛酸钙 0.004-0.005、叶酸 0.062-0.081、肌醇0.83-1.43、烟酰胺0.17-0.20、吡哆醇盐酸盐0.0015-0.0017、核黄素0.06-0.29、腐胺二酸盐 0.00501-0.00503、氢化可的松 0.0015-0.0018 和吡哆醛.HCL1.01-9.48。4.如权利要求3所述的CHO细胞无血清培养基,其特征在于,所述无机盐组合物包括下列重量份的组分中的一种或几种: 碳酸氢钠 2440-2451、氯化钠 6995.50-7031.20、氯化钾 312.81-313.90、氯化镁29.65-30.42、硫酸镁48.85-49.21、一水磷酸二氢钠62.51-62.53、磷酸氢二钠71.03-72.15、硫酸锌 0.431-0.445、氯化钙 116.60-117.32、五水硫酸铜 0.0014-0.0016 和七水硫酸铁0.062-0.071。5.如权利要求4所述的CHO细胞无血清培养基,其特征在于,所述微量元素组合物包括下列重量份的组分中的一种...
【专利技术属性】
技术研发人员:张春颖,
申请(专利权)人:西藏天虹科技股份有限责任公司,
类型:发明
国别省市:西藏;54
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