【技术实现步骤摘要】
—种针对HBx的s i RNA及其脂质体制剂
本专利技术涉及医药制剂领域,具体涉及一种针对HBx的siRNA,以及用于转送该siRNA的脂质体。
技术介绍
RNA干扰(RNA interfering, RNAi)是指双链RNA进入细胞后诱导靶基因mRNA发生特异性降解,导致目标基因mRNA沉默的现象,是生物长期进化过程中形成的对病毒等外源物质的防御系统。长度为21-23nt的siRNA (Small interfering RNA,小干扰核酸)能够引发RNAi,可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,并具备的高效性、易合成及易操作的特点,所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。HBV (乙型肝炎病毒)可导致急慢性肝炎及肝细胞癌。目前全球范围内约3.5亿人携带有HBV,而其中每年约有100万死于HBV感染的慢性并发症,如肝硬化、肝癌或两者并存。虽然目前已有预防用疫苗供应,但是对于慢性感染者的治疗选择仍然有限。研究表明,现有药物多数具有较强毒性和抗药性,因此更多的研究把目光集中到安全有效的RNAi上。乙型肝炎病毒X基因编码的X蛋白(HBx),是一种多功能病毒调节蛋白,具有广泛的基因转录调控作用,并能与宿主细胞的多种蛋白质直接作用,从而调苄基因表达及宿主细胞蛋白质功能,进而影响病毒的复制、宿主细胞信号转导、细胞增殖与分化、细胞凋亡及癌变等。设计针对HBx的siRNA将为治疗乙肝病毒提供一个新的方向。 siRNA的制备方法可分为体外和体内两种。体外化学合成、体外转录及体外利用RNaseIII (核糖核酸酶III)将大片段的RNA ...
【技术保护点】
一种siRNA序列,如SEQ ID NO.1所示:5’‑ GGTCTTTGTACTAGGAGGC‑3’ (SEQ ID NO.1)。
【技术特征摘要】
1.一种 SiRNA 序列,如 SEQ ID N0.1 所示:5’ - GGTCTTTGTACTAGGAGGC-3’ (SEQ ID N0.1)。2.—种siRNA表达载体,其特征在于它能体内表达如SEQ ID N0.1所示的siRNA序列。3.—种如权利要求2所述siRNA表达载体的制备方法,其特征在于含有如下步骤: ①初步筛选得到具有明显抑制HBx基因表达的如SEQ ID N0.1所示的siRNA序列,②构建HBx的siRNA表达质粒,③测序鉴定连接得到的pDual_oligo5质粒。4.一种含有如权利要求2所述siRNA表达载体的脂质体,其特征在于含有siRNA质粒,阳离子脂98N12-5,胆固醇和PEG化磷脂。5.一种如权利要求4所述脂质体,其特征在于98N12-5...
【专利技术属性】
技术研发人员:李春雷,王雅娟,高玉清,王彩霞,倪蓓蓓,王艳玲,
申请(专利权)人:石药集团中奇制药技术石家庄有限公司,
类型:发明
国别省市:河北;13
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