基于普鲁士蓝仿生标记检测小分子化合物的方法技术

本发明专利技术涉及电化学免疫技术领域，是一种基于普鲁士蓝仿生标记检测小分子化合物的方法。包括以下步骤：以一种具有类过氧化氢酶催化活性的普鲁士蓝微粒子标记待测物的类似物作为标记抗原；将磁性四氧化三铁微粒固定抗体，并将其分散在反应液中；形成竞争性免疫反应、电化学检测体系中的氧化电流信号进而对待测物实现定量测量。该检测方法采用普鲁士蓝代替生物酶分子标记小分子抗原，并结合磁性微粒进行竞争性免疫反应，通过电化学检测标记抗原对于过氧化氢和对苯二酚的催化氧化反应产生的电信号，由于其电信号大小与待测小分子浓度呈线性相关，可实现对小分子化合物的高灵敏度定量检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及电化学免疫
，是一种。
技术介绍
在目前的生物医药检测领域，对于环境污染物、农药、激素、抗生素等小分子的高灵敏度定量免疫检测已成为广大研究人员关注的焦点问题之一。为了实现微量或痕量的小分子化合物的高灵敏度检测，各种基于生物特异性反应，如抗原抗体技术、蛋白配体技术等不同的方法和体系已经被建立。其中，具有典型性的是竞争性免疫检测技术，其利用标记抗原和待测分析物对抗体的竞争，通过检测被抗体吸附的标记抗原可以推断出体系中含有的待测分析物的浓度。但常用的标记技术有放射性标记、辣根过氧化物酶(HRP)等酶标记，以及荧光化学探针等光学标记。电化学免疫分析技术是将免疫分析技术与电化学技术结合的一种免疫分析方法，通过将一些易于测定并具有高度敏感性的物质标记到抗原或抗体分子上，并结合抗原与抗体间的特异性结合反应，通过检测标记物的产生或放大的电信号，可以实现对于待测物质的高灵敏度特异性检测。电化学免疫标记的物质一般是生物酶类，如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酯酶、葡萄糖氧化酶等，但这些酶类对于温度、溶剂等外界条件要求严格，难以制备且价格昂贵。普鲁士蓝微粒具有类似过氧化物酶的催化本文档来自技高网...

【技术保护点】
基于普鲁士蓝仿生标记检测小分子化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：a)以一种具有类过氧化氢酶催化活性的普鲁士蓝微粒子标记待测物的类似物作为标记抗原；b)将磁性四氧化三铁微粒固定抗体，并将其分散在反应液中；c)在反应液中加入步骤a中制得的标记抗原和待测物后，标记抗原与待测物竞争抗体，形成竞争性免疫反应；d)通过磁铁分离，将磁性抗体及其吸附的抗原分离至试管底部，吸取上清，在其中加入含有对苯二酚和过氧化氢的溶液，通过差分脉冲伏安法，电化学检测体系中的氧化电流信号进而对待测物实现定量测量。

【技术特征摘要】
1.基于普鲁士蓝仿生标记检测小分子化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤: a)以一种具有类过氧化氢酶催化活性的普鲁士蓝微粒子标记待测物的类似物作为标记抗原； b)将磁性四氧化三铁微粒固定抗体，并将其分散在反应液中； c)在反应液中加入步骤a中制得的标记抗原和待测物后，标记抗原与待测物竞争抗体，形成竞争性免疫反应； d)通过磁铁分离，将磁性抗体及其吸附的抗原分离至试管底部，吸取上清，在其中加入含有对苯二酚和过氧化氢的溶液，通过差分脉冲伏安法，电化学检测体系中的氧化电流信号进而对待测物实现定量测量。2.如权利要求1所述的基于普鲁士蓝仿生标记检测小分子化合物的方法，其特征在于: 所述小分子化合物是指分子量在1000以下，且不能直接产生免疫原性的有机化合物分子。3.如权利要求1所述的基于普鲁士蓝仿生标记检测小分子化合物的方法，其特征在于: 所述四氧化三铁微粒和普鲁士蓝微粒子的尺寸是μ m级或nm级的。4.如权利要求1所述的基于普鲁士蓝仿生标记检测小分子化合物的方法，其特征在于:所述具有类过氧化氢酶催化活性的材料为普鲁士蓝。...

【专利技术属性】
技术研发人员：王静，王淼，佘永新，李腾飞，刘广洋，杜欣蔚，于海龙，金芬，邵华，金茂俊，王珊珊，
申请(专利权)人：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11