超临界二氧化碳制备辅酶Q10脂质体的方法技术

本发明专利技术涉及一种超临界二氧化碳制备纳米辅酶Q10脂质体的方法，将磷脂酰胆碱、胆固醇及辅酶Q10加入无水乙醇中，搅拌使其充分溶解并制备成溶液，放入超声波震荡器中，混合；将制得的溶液置入超临界反应釜中，打开二氧化碳钢瓶，二氧化碳气体经冷机冷却成液体后，由高压泵加压后进入反应釜中，控制压力和温度，并保压一定时间；通过喷嘴快速喷射至磷酸缓冲溶液中,经分散并沉析，即可得到辅酶Q10纳米脂质体混悬液；收集，即为辅酶Q10纳米脂质体。本方法环境友好，绿色，无毒，价廉；流程简单，粒径及包封率易于控制；在现行药品生产管理规范（CGMP）条件下有可能实现脂质体的工业化且制备的脂质体粒径分布均匀，单分散性好，稳定性高。

【技术实现步骤摘要】
超临界二氧化碳制备辅酶Q10脂质体的方法
本专利技术属于药物制剂领域，具体涉及一种利用超临界二氧化碳制备纳米辅酶QlO脂质体的方法。技术背景辅酶QlO是一种脂溶性抗氧化剂，是人类生命不可缺少的重要元素之一，能激活人体细胞和细胞能量的营养，具有提高人体免疫力、增强抗氧化、延缓衰老和增强人体活力等功能，医学上广泛用于心血管系统疾病，国内外广泛将其用于营养保健品及食品添加剂。它集治疗、保健、预防三重功能于一身，不过辅酶QlO分子量大、水溶性非常差，尽管与含有脂肪的膳食一同食用，其在肠道中的吸收仍很慢，口服生物利用度较低。因此，如何有效提高辅酶QlO的体内生物利用度已成为国外近年来研究的热点。脂质体技术是一种新型的微胶囊和纳米胶囊制备技术，它是由磷脂双分子层构成的亲水性囊泡，其结构类似于细胞，可包封水溶性和脂溶性两种物质，具有靶向高效、缓释可控和安全无毒的特点。近年来在食品工业中显现出巨大的应用潜力。采用纳米胶囊技术制备辅酶QlO纳水脂质体，不仅能增强其稳定性，防止氧化降解，而日能提高其水溶性，促进辅酶QlO的吸收。国外已有文献报道将辅酶QlO制成脂质体喷剂后显著提高了生物利用度及疗效。 目前脂质体的制备方主要有薄膜分散法、逆向蒸发法、表面活性剂除去法、乙醇/乙醚注入法、乳化法以及PH梯度法等，这些制备方法由于步骤过多，不适用于大规模工业化的生产。并且采用传统制备法获得的脂质体，在制备过程中必须要使用氯仿、乙醚、甲醇等有机溶剂，这对环境和人体都是有害的。脂质体粒径分布较宽，与有机溶剂、杂质等难以分离，尤其对热敏性、生物活性的特殊物质的操作安全性差。因此，近年国际上己开始研究安全可靠、方便快速、可控制调节的微粒制备新技术。随着人们对超临界流体性质的认识不断深入，超临界流体在材料领域中的应用得到广泛重视，超临界流体技术己经渗入生命科学与技术的诸多领域。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有辅酶QlO脂质体制备方法中存在的有毒有机溶剂残留，粒度单分散性不强，脂质体稳定性较差等缺陷，提供一种超临界二氧化碳制备无有毒溶剂残留，产物单分散性好，稳定性好辅酶QlO脂质体的方法。一种超临界二氧化碳制备辅酶QlO纳米脂质体的方法，其特征在于，具体步骤如下: (1)将磷脂酰胆碱、胆固醇及辅酶QlO加入无水乙醇中，搅拌使其充分溶解并制备成溶液，放入超声波震荡器中5分钟，混合均匀后放入冰箱中待用； (2)将步骤(1)制得的溶液置入超临界反应釜中，打开二氧化碳钢瓶，二氧化碳气体经冷机冷却成液体后，由高压泵加压后进入反应釜中，控制压力和温度，并保压一定时间；(3)将上述超临界溶液通过喷嘴快速喷射至磷酸缓冲溶液中，经分散并沉析，即可得到辅酶QlO纳米脂质体混悬液； (4)收集上述辅酶QlO纳米混悬液，即为本专利技术所述辅酶QlO纳米脂质体。所述辅酶QlO为脂溶性辅酶QlO。所述磷脂酰胆碱与胆固醇的质量比为30:1— 1:1。所述磷脂酰胆碱和胆固醇总量与辅酶QlO的质量比为50:1—5:1。步骤(2)所述压力为15MPa — 40MPa.步骤(2)所述温度为313K—343K。步骤(2)所述时间为20— 60分钟。步骤(1)所述无水乙醇的用量以在二氧化碳中的摩尔分数计为5% — 30%。所述磷酸缓冲溶液浓度为0.01Mol/L, PH值为7.2。所述喷嘴直径为100— 500 μ m。采用本专利技术所述方法制备的辅酶QlO纳米脂质体,脂质体粒径通常在60nm-150nm之间，数均粒径约为lOOnm，粒径分布窄，单分散性很好，且包封率能高达75%以上。与传统制备脂质体 的方法相比，本专利技术方法的优势主要体现在以下几个方面: 1)环境友好，绿色，无毒，价廉； 2)流程简单，粒径及包封率易于控制； 3)在现行药品生产管理规范(CGMP)条件下有可能实现脂质体的工业化； 4)制备的脂质体粒径分布均匀，单分散性好，稳定性高。超临界二氧化碳是一种无毒、惰性且对环境无害的反应介质，且在制备结束后易于与产物分离。随着超临界二氧化碳流体技术的不断发展，其渐渐被应用于脂质体的制备中。因此，采用超临界二氧化碳法制备辅酶QlO脂质体，制备过程不使用有毒有机溶剂，所制备的辅酶QlO脂质体粒径均一，稳定性好，确保了脂质体的安全性，具有技术与应用的新颖性和创造性。【具体实施方式】下面通过实施例进一步说明本专利技术，而不是限制本专利技术的范围。实施例1: 按照配方精确称取一定量磷脂、胆固醇及辅酶QlO(磷脂与胆固醇的质量比为3:1，膜材与辅酶QlO的质量比为20:1)，将其加入一定量无水乙醇中(质量分数为15%)，搅拌使其充分溶解并制备成溶液，放入超声波震荡器中5分钟，混合均匀后放入冰箱中待用。将上述溶液置入超临界反应釜中，打开二氧化碳钢瓶，二氧化碳气体经冷机冷却成液体后，由高压泵加压后进入反应釜中。控制一定的压力(20MPa)和温度(323K)，并保压一定时间(40min)；将上述超临界溶液通过喷嘴(直径为500 μ m)快速喷射至PBS缓冲溶液中，经分散并沉析，即可得到数均粒径为99nm，包封率约为75%的辅酶QlO纳米脂质体混悬液。实施例2: 按照配方精确称取一定量磷脂、胆固醇及辅酶QlO (磷脂与胆固醇的质量比为10:1，膜材与辅酶QlO的质量比为30:1)，将其加入一定量无水乙醇中(质量分数为10%)，搅拌使其充分溶解并制备成溶液，放入超声波震荡器中5分钟，混合均匀后放入冰箱中待用。将上述溶液置入超临界反应釜中，打开二氧化碳钢瓶，二氧化碳气体经冷机冷却成液体后，由高压泵加压后进入反应釜中。控制一定的压力(20MPa)和温度(333K)，并保压一定时间(30min);将上述超临界溶液通过喷嘴(直径为250 μ m)快速喷射至PBS缓冲溶液中，经分散并沉析，即可得到数均粒径为113nm，包封率约为82%的辅酶QlO纳米脂质体混悬液。实施例3: 按照配方精确称取一定量磷脂、胆固醇及辅酶QlO(磷脂与胆固醇的质量比为5:1，膜材与辅酶QlO的质量比为10:1)，将其加入一定量无水乙醇中(质量分数为20%)，搅拌使其充分溶解并制备成溶液，放入超声波震荡器中5分钟，混合均匀后放入冰箱中待用。将上述溶液置入超临界反应釜中，打开二氧化碳钢瓶，二氧化碳气体经冷机冷却成液体后，由高压泵加压后进入反应釜中。控制一定的压力(25MPa)和温度(328K)，并保压一定时间(50min)；将上述超临界溶液通过喷嘴(直径为170 μ m)快速喷射至PBS缓冲溶液中，经分散并沉析，即可得到数均粒径为105nm，包封率约为73%的辅酶QlO纳米脂质体混悬液。实施例4: 按照配方精确称取一定量磷脂、胆固醇及辅酶QlO(磷脂与胆固醇的质量比为3:1，膜材与辅酶QlO的质量比为30:1)，将其加入一定量无水乙醇中(质量分数为15%)，搅拌使其充分溶解并制备成溶液，放入超声波震荡器中5分钟，混合均匀后放入冰箱中待用。将上述溶液置入超临界反应釜中，打开二氧化碳钢瓶，二氧化碳气体经冷机冷却成液体后，由高压泵加压后进入反应釜中。控制一定的压力(15MPa)和温度(318K)，并保压一定时间(30min)；将上述超临界溶液通过喷嘴(直径为500 μ m)快速喷射至PBS缓冲溶液中，经分散本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种超临界二氧化碳制备辅酶Q10纳米脂质体的方法，其特征在于，具体步骤如下：（1）将磷脂酰胆碱、胆固醇及辅酶Q10加入无水乙醇中，搅拌使其充分溶解并制备成溶液，放入超声波震荡器中5分钟，混合均匀后放入冰箱中待用；（2）将步骤（1）制得的溶液置入超临界反应釜中，打开二氧化碳钢瓶，二氧化碳气体经冷机冷却成液体后，由高压泵加压后进入反应釜中，控制压力和温度，并保压一定时间；（3）将上述超临界溶液通过喷嘴快速喷射至磷酸缓冲溶液中, 经分散并沉析，即可得到辅酶Q10纳米脂质体混悬液；（4）收集上述辅酶Q10纳米混悬液，即为本专利技术所述辅酶Q10纳米脂质体。

【技术特征摘要】
1.一种超临界二氧化碳制备辅酶Qio纳米脂质体的方法，其特征在于，具体步骤如下: (1)将磷脂酰胆碱、胆固醇及辅酶QlO加入无水乙醇中，搅拌使其充分溶解并制备成溶液，放入超声波震荡器中5分钟，混合均匀后放入冰箱中待用； (2)将步骤(1)制得的溶液置入超临界反应釜中，打开二氧化碳钢瓶，二氧化碳气体经冷机冷却成液体后，由高压泵加压后进入反应釜中，控制压力和温度，并保压一定时间； (3)将上述超临界溶液通过喷嘴快速喷射至磷酸缓冲溶液中，经分散并沉析，即可得到辅酶QlO纳米脂质体混悬液； (4)收集上述辅酶QlO纳米混悬液，即为本发明所述辅酶QlO纳米脂质体。2.根据权利要求1所述超临界二氧化碳制备辅酶QlO纳米脂质体的方法，其特征在于，所述辅酶QlO为脂溶性辅酶QlO。3.根据权利要求1所述超临界二氧化碳制备辅酶QlO纳米脂质体的方法，其特征在于，所述磷脂酰胆碱与胆固醇的质量比为30:1 —1:1。4.根据权利要求1所述超临界二氧化碳制备辅酶QlO纳米脂质...

【专利技术属性】
技术研发人员：何丹农，徐少洪，陈超，
申请(专利权)人：上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31