一种检测小鼠ndrg2基因的特异性cRNA原位杂交探针及其制备方法技术

技术编号:10333186 阅读:93 留言:0更新日期:2014-08-20 18:17
本发明专利技术公开了一种检测小鼠ndrg2基因的特异性cRNA原位杂交探针及其制备方法,其按照如下步骤进行:(1)根据NCBI网站GenBank数据库中小鼠ndrg2基因的序列,设计横跨编码区和3’-UTR的上、下游引物,此对引物扩增出636bp片段作为小鼠ndrg2基因的特异性探针序列;(2)构建ndrg2基因的cRNA原位杂交的探针质粒,转化细菌并进行培养扩增,之后对探针质粒进行测序鉴定;(3)制备ndrg2基因的cRNA原位杂交探针;(4)检测ndrg2基因cRNA探针的原位杂交。

【技术实现步骤摘要】
—种检测小鼠ndrg2基因的特异性cRNA原位杂交探针及其制备方法
本专利技术涉及一种检测小鼠於基因的特异性cRNA原位杂交探针及其制备方法,属于生物医学及生物技术应用领域。
技术介绍
/?基因即 Nnyc 下游调苄基因 2 (N-myc downstream-regulated gene 2),属于NDRG家族,该家族包括Ndrgl、Ndrg2、Ndrg3、Ndrg4四个成员。多项研究证明,Ndrg2在人类许多肿瘤组织中,如乳腺癌、肝癌、结直肠癌、恶性胶质瘤等表达明显降低或缺如,过表达Ndrg2则可抑制肿瘤的生长和转移,提示Ndrg2具有抑制肿瘤发生的作用。因此,目前多数学者认为Ndrg2是一种有效的抑癌候选分子。然而,最近研究表明Ndrg2亦高表达在正常的中枢神经系统中,对其生理功能、神经发生及疾病发生发挥重要的作用,这提示我们除了 Ndrg2的抑癌效应,对它功能的认识可能才刚刚开始。在研究Ndrg2功能之前,必须明确Ndrg2在各个组织中的表达情况,因此特异性的抗体十分重要。然而,NDRG家族四个成员氨基酸序列的同源性十分高,达到了 57 - 65%。目前商品化的Ndrg2抗体或是针对Ndrg2氨基酸序列全长,或是针对其N端或C端,因此都或多或少的与NDRG家族的其他三个成员有一定的交叉反应。另一方面,在基因功能研究策略层面,转基因或基因修饰小鼠是目前研究的主要手段,也是今后研究的趋势。然而,目前的Ndrg2抗体主要是来源于人的Ndrg2抗原。因此,设计一种特异性针对小鼠因的检测方法对于Ndrg2功能的研究十分必要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供。本专利技术是采用如下技术方案实现的: 一种检测小鼠於基因的特异性cRNA原位杂交探针,该探针的序列为:本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测小鼠ndrg2基因的特异性cRNA原位杂交探针,其特征在于,该探针的序列为:5’‑CTATCTCGGTCTCGCACAGCATCTCTGACCAGTGCAGCATCCATCGATGGCAGTCGGTCCCGATCCCGCACCCTGTCGCAGAGTAGCGAGTCTGGGACTCTCCCTTCTGGACCCCCAGGGCACACCATGGAAGTCTCCTGTTGAATGACCCTCATTGCCTTGGTGTGGATCCCAGCCCTCACCTCCTGCAACACTAATTTAAGAGGTGTTATCAGGGCACTGGGCCAGAGTAAGCAAGGAAAATGGGCAGATTGTGCAGGGAGATGACCTTGATCTTTAATTGCTACCCTAACCTTGACCTTTAACCTGTGATATCCTCTAGCTCCTAGGTGAGGTGTCCTAATATCTCTTAGAGATCTGGGCCCCCTAAATTACCCCCTCTTCCATTTTGGTGTTGAGAAGGCTTGTATGTTCTCTCCCTGACCTAGGTTCTATAGATGAGGAACAATGAGCTGTTCTAGCTGACACGGGGCCTCCATCACTCCCCCTCTTTAGCCCATATTTGCAAGGGTAGGAGAGAGAGTGTGTGTGTGTTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTAGGGTTGATGGTGAGAGATGGGGAGCTCCTTCCCCAAAGCTGACAGTGGCTTTGCCTTGATGTGTCAGGCCTCTCTGAA‑3’。...

【技术特征摘要】
1.一种检测小鼠於基因的特异性CRNA原位杂交探针,其特征在于,该探针的序列为:5,-CTATCTCGGTCTCGCACAGCATCTCTGACCAGTGCAGCATCCATCGATGGCAGTCGGTCCCGATCCCGCACCCTGTCGCAGAGTAGCGAGTCTGGGACTCTCCCTTCTGGACCCCCAGGGCACACCATGGAAGTCTCCTGTTGAATGACCCTCATTGCCTTGGTGTGGATCCCAGCCCTCACCTCCTGCAACACTAATTTAAGAGGTGTTATCAGGGCACTGGGCCAGAGTAAGCAAGGAAAATGGGCAGATTGTGCAGGGAGATGACCTTGATCTTTAATTGCTACCCTAACCTTGACCTTTAACCTGTGATATCCTCTAGCTCCTAGGTGAGGTGTCCTAATATCTCTTAGAGATCTGGGCCCCCTAAATTACCCCCTCTTCCATTTTGGTGTTGAGAAGGCTTGTATGTTCTCTCCCTGACCTAGGTTCTATAGATGAGGAACAATGAGCTGTTCTAGCTGACACGGGGCCTCCATCACTCCCCCTCTTTAGCCCATATTTGCAAGGGTAGGAGAGAGAGTGTGTGTGTGTTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTAGGGTTGATGGTGAGAGATGGGGAGCTCCTTCCCCAAAGCTGACAGTGGCTTTGCCTTGATGTGTCAGGCCTCTCT...

【专利技术属性】
技术研发人员:史明杜芳刘丽娟
申请(专利权)人:中国人民解放军第四军医大学
类型:发明
国别省市:陕西;61

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