本发明专利技术提供了降低源自血浆的蛋白质组合物的丝氨酸蛋白酶和/或丝氨酸蛋白酶原含量的新型方法。还提供了制造丝氨酸蛋白酶和/或丝氨酸蛋白酶原含量降低的源自血浆的蛋白质组合物的方法。在其它方面，本发明专利技术提供了丝氨酸蛋白酶和/或丝氨酸蛋白酶原含量降低的源自血浆的蛋白质的水性和冻干组合物。其它方面包括治疗、处理和/或预防疾病的方法，所述方法包括施用丝氨酸蛋白酶或丝氨酸蛋白酶原含量降低的源自血浆的蛋白质组合物。
【技术实现步骤摘要】
通过用微细分的二氧化硅处理去除丝氨酸蛋白酶本申请是申请日为2011年5月26日、申请号为201180036374.3(国际申请号为PCT/US2011/038247)、名称为“通过用微细分的二氧化硅处理去除丝氨酸蛋白酶”的专利技术专利申请的分案申请。相关申请的交叉引用本申请要求2010年5月26日提交且作为澳大利亚专利号2010202125颁布的AU专利申请号2010202125、2010年5月27日提交的美国专利申请序号12/789,365以及2010年7月23日提交的美国专利申请序号12/842,944的优先权，所述文献的公开内容据此以全文引用的方式并入本文中以便达成所有目的。专利技术背景源自血浆的血液产品不仅用以治疗多种血液病症，而且用于治疗其它来源的疾病。例如，1952年首次使用来自人类血浆的免疫球蛋白(IgG)产品来治疗免疫缺乏症。从那以后，IgG制剂被广泛用于至少三个主要类别的医学病状中：(1)免疫缺乏症，如X连锁无γ球蛋白血症、低γ球蛋白血症(原发性免疫缺乏症)以及后天免疫力低下病状(继发性免疫缺乏症)，特征为抗体水平低；(2)发炎性和自体免疫性疾病；以及(3)急性感染。同样地，因子H被暗示作为数种人类疾病病况的潜在治疗剂，所述病况包括年龄相关的黄斑变性(AMD)、溶血尿毒症综合症(aHUS)以及膜增生性肾小球肾炎(MPGN)。具体来说，已经表征了因子H的补体控制蛋白(CCP)模块7中的单核苷酸多形现象(SNP)与年龄相关的黄斑变性(AMD)之间的因果关系。研究已显示间α抑制蛋白(IaIp)血浆水平减低与患严重败血症的患者死亡率之间的关联性(Lim等,JInfectDis.(2003)9月15日；188(6):919-26和Opal等,CritCareMed.(2007)2月；35(2):387-92)。此外，数种研究已显示施用IaIp可降低与败血症和败血性休克相关的死亡率(Jourdain等,AmJRespirCritCareMed.(1997)12月；156(6):1825-33；Yang等,CritCareMed.(2002)3月；30(3):617-22；Lim等,JInfectDis.(2003)9月15日；188(6):919-26；以及Wu等,CritCareMed.(2004)8月；32(8):1747-52；所述出版物的公开内容是以全文引用的方式并入本文中以便达成所有目的)。当制造和配制源自血浆的生物治疗剂时必须考虑各种安全预防措施。这些措施包括去除和/或使由使用捐赠的血浆所产生的血浆携带的病原体(例如病毒性和细菌性病原体)、抗补体活性以及其它有害污染物灭活的方法。研究表明施用高水平的酰胺水解活性(amidolyticactivity)会引起有害血栓栓塞事件(WolbergAS等,CoagulationfactorXIisacontaminantinintravenousimmunoglobulinpreparations.AmJHematol2000；65:30-34；和AlvingBM等,Contact-activatedfactors:contaminantsofimmunoglobulinspreparationswithcoagulantandvasoactiveproperties.JLabClinMed1980；96:334-346；所述出版物的公开内容据此以全文引用的方式并入本文中以便达成所有目的)。突显这一问题的是在有关血栓栓塞事件的报告增加之后，近来在美国自动撤销(Octapharma)和欧洲委员会(EuropeanCommission)中止和octagam10％的销售授权。血栓事件增加可能由生物制剂中由丝氨酸蛋白酶和丝氨酸蛋白酶原杂质如因子XI、因子XIa、因子XII以及因子XIIa引起的高水平的酰胺水解活性所致(FDA通知：2010年9月23日，自市场自动撤销Octagam[静脉注射用免疫球蛋白(人类)]5％液体制剂；AFSSAPS于2010年9月9日在线公布，检疫隔离所有批次的Octagam50mg/ml输注药液(solutionpourperfusion)(OctapharmaFrance)；以及欧洲药品管理局(EuropeanMedicinesAgency)于2010年9月23日在线公布的关于中止Octagam(人类正常免疫球蛋白5％和10％)的销售授权的问答)。一般称为凝血因子的专用丝氨酸蛋白酶为凝血级联反应的接触活化与组织因子路径的必要组分。当刺激凝血路径时，作为无活性的酶前体的丝氨酸蛋白酶原成为可催化下一个蛋白酶原活化的活化蛋白酶，从而引起活化级联反应。这种凝血级联反应以活化凝血酶(因子IIa)和因子XIIIa而终结，凝血酶和因子XIIIa功能分别在于使纤维蛋白原(因子I)转化成纤维蛋白(因子Ia)和使纤维蛋白交联而形成纤维蛋白凝块。还称为固有凝血路径的接触活化路径分别由激肽释放酶和因子XIIa(FXIIa)自前激肽释放酶和因子XII的活化开始。所活化的丝氨酸蛋白酶FXIIa裂解因子XI(FXI)，使酶原转化成因子XIa(FXIa)，即一种活性丝氨酸蛋白酶，其会参与因子Xa(FXa)的后续活化。由于对源自血浆的蛋白质组合物中存在丝氨酸蛋白酶和丝氨酸蛋白酶原的担忧不断增加，因此本领域中仍存在对降低这些污染物并且尤其是FXI、FXIa、FXII以及FXIIa的水平的方法的需要。本专利技术通过提供所述方法和丝氨酸蛋白酶与丝氨酸蛋白酶原水平降低的源自血浆的蛋白质组合物来实现这些和其它需要。专利技术概述一方面，本专利技术是基于以下令人意外的发现：丝氨酸蛋白酶和丝氨酸蛋白酶原，并且具体来说FXI、FXIa、FXII以及FXIIa可以通过用微细分的二氧化硅(SiO2)处理而自源自血浆的蛋白质组合物去除。以此方式，本专利技术提供降低源自血浆的蛋白质组合物的丝氨酸蛋白酶活性、丝氨酸蛋白酶含量以及丝氨酸蛋白酶原含量的方法。还提供丝氨酸蛋白酶活性、丝氨酸蛋白酶含量以及丝氨酸蛋白酶原含量降低的治疗性源自血浆的蛋白质组合物，以及通过施用所述组合物来治疗或预防疾病的方法。在第一方面中，本专利技术提供一种用于降低源自血浆的目标蛋白质组合物中丝氨酸蛋白酶或丝氨酸蛋白酶原的量的方法，该方法包括以下步骤：(a)在适合于结合至少一种丝氨酸蛋白酶或丝氨酸蛋白酶原的条件下使所述组合物与微细分的二氧化硅(SiO2)接触；和(b)使SiO2与组合物分离以去除所结合的丝氨酸蛋白酶。在一个优选实施方案中，丝氨酸蛋白酶或丝氨酸蛋白酶原为因子XIa(FXIa)、因子XIIa(FXIIa)、因子XI(FXI)或因子XII(FXII)。在某些实施方案中，上述方法进一步包括以下步骤：执行第一目标蛋白质浓化步骤以形成第一浓化组合物，然后使所述组合物与微细分的二氧化硅(SiO2)接触。在一个实施方案中，第一目标蛋白质浓化步骤是蛋白质沉淀步骤。在一个特定实施方案中，蛋白质沉淀步骤是醇分离步骤。在另一个实施方案中，第一目标蛋白质浓化步骤是超滤/透滤步骤。在上述方法的其它实施方案中，所述方法进一步包括以下步骤：执行第二目标蛋白质浓化步骤，然后使浓化组合物与微细分的二氧化硅(SiO2)接触。在一个实施方案中，第二目标本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.微细分的二氧化硅(SiO2)在从源自血浆的目标蛋白质组合物中除去丝氨酸蛋白酶中的应用，所述应用是在一种降低源自血浆的目标蛋白质组合物中的丝氨酸蛋白酶的量的方法中的应用，所述方法包括以下步骤：(a)执行第一目标蛋白质浓化步骤以形成第一浓化组合物；(b)在适合于结合至少一种丝氨酸蛋白酶的条件下使所述组合物与微细分的二氧化硅(SiO2)接触；和(c)使所述SiO2与所述组合物分离以去除所结合的丝氨酸蛋白酶；其中所述至少一种丝氨酸蛋白酶为因子XIa(FXIa)；其中所述第一目标蛋白质浓化步骤是蛋白质沉淀步骤；其中所述蛋白质沉淀步骤是醇分离步骤；和其中所述源自血浆的目标蛋白质是免疫球蛋白(Ig)。
【技术特征摘要】
2010.05.26 AU 2010202125;2010.05.27 US 12/789,365;1.微细分的二氧化硅(SiO2)在从源自血浆的目标蛋白质组合物中除去丝氨酸蛋白酶中的应用，所述应用是在一种降低源自血浆的目标蛋白质组合物中的丝氨酸蛋白酶的量的方法中的应用，所述方法包括以下步骤：(a)执行第一目标蛋白质浓化步骤以形成第一浓化组合物；(b)在适合于结合至少一种丝氨酸蛋白酶的条件下使所述组合物与微细分的二氧化硅(SiO2)接触；和(c)使所述SiO2与所述组合物分离以去除所结合的丝氨酸蛋白酶；其中所述至少一种丝氨酸蛋白酶为因子XIa(FXIa)；其中所述第一目标蛋白质浓化步骤是蛋白质沉淀步骤；其中所述蛋白质沉淀步骤是醇分离步骤；和其中所述源自血浆的目标蛋白质是免疫球蛋白(Ig)。2.根据权利要求1所述的应用，其中所述方法进一步包括以下步骤：执行第二目标蛋白质浓化步骤，然后使所述浓化组合物与微细分的二氧化硅(SiO2)接触。3.根据权利要求2所述的应用，其中所述第二目标蛋白质浓化步骤是：(i)蛋白质沉淀步骤；(ii)超滤/透滤步骤；或(iii)色谱浓化步骤。4.根据权利要求3所述的应用，其中所述蛋白质沉淀步骤是醇分离步骤。5.根据权利要求1～4中任一项所述的应用，其中所述方法进一步包括以下步骤：在使所述组合物与微细分的二氧化硅(SiO2)接触之后，执行第三目标蛋白质浓化步骤。6.根据权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：W·特施纳，H·P·施瓦茨，R·马德利纳，S·斯瓦托斯，A·普列夫科维奇，A·韦伯，
申请(专利权)人：百深公司，百深有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国,US
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