孵育液体和灭活病毒的方法技术

本发明专利技术涉及一种孵育液体的方法、一种制备生物药物的方法以及一种制备生物药物的装置。

Method of incubation liquid and inactivation of virus

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】孵育液体和灭活病毒的方法
本专利技术涉及孵育液体的方法、制备生物药物的方法以及制备生物药物的装置。
技术介绍
在许多连续处理过程中，将液体进行混合，然后通过使液体通过处理设备(例如管或柱)来进行孵育。然而，当(液体)通过过程所用结构时，与距离该结构的表面更远的液体部分相比，距离该结构的表面更近的液体部分倾向于以更低的速度流动。例如，当液体混合物流过中空管时，与在管的周围的液体部分相比，在管的中央的液体部分往往以更高的速度流动。结果，即使当液体的所有部分同时进入结构时，液体的不同部分也具有不同的停留时间。换言之，液体的不同部分显示出停留时间的分布。如果液体的不同部分之间的流经时间差异较大，则停留时间分布较宽；如果液体的不同部分之间的流经时间差异较小，则停留时间分布较窄。当将液体混合物孵育一定的时间时，窄的停留时间分布是有利的。例如，在连续的生物药物生产过程中，可通过将含生物药物的液体与病毒灭活剂进行混合、使混合物在限定时间内通过过程中所用的结构对混合物进行孵育，来实现连续的病毒灭活。窄的停留时间分布使得混合物液体的所有部分与病毒灭活剂一起孵育相似的时间(即所需的时间)。如此，可避免液体的某些部分暴露于病毒灭活剂的时间过长(这可能会损害生物药物)，而液体的其他部分没有暴露于病毒灭活剂足够长的时间(这可能会导致病毒灭活不完全)。当前已知的孵育流动液体的方法不能提供窄的停留时间分布，或者它们还具有其他严重的缺点。例如，在连续生产过程中，孵育液体混合物的最简单方法是使液体通过足够长的空心管，以提供所需的最低停留时间。然而，中空管中的停留时间分布极其宽且不可再现。可将静态混合物添加到管中以促进径向混合(参考文献1)。但是，对于此种设置，扩大规模(scale-up)以及将静态混合物加到长延伸管中都是一个问题。或者，所谓的旋流逆变器(CFI，coiledflowinverter)通过使液体混合物通过具有附加90°弯曲的盘管来工作(参考文献2)。此设置可以在增加径向混合的同时最大程度地减少轴向混合，从而缩窄停留时间分布。最近描述了将该系统用于连续病毒灭活的用途(参考文献3、4)，并且最近使用了相同设置来缩窄杂质沉淀步骤中的停留时间分布(参考文献5)。但是，已证明CFI仅适用于直径为2mm至3mm的管，且扩大规模仍具有挑战性，因为系统中的流体动力学随管尺寸而变化。对于每个给定的设计，CFI还仅限于单一流量。最近，有人提出通过引入不混溶的分离介质在微反应器中对产物流进行分段，以实现具有窄停留时间分布的病毒的连续灭活(参考文献6)。然而，此种方法仅限于使用微反应器，这使得扩大规模非常困难。由于如上所述缺乏停留时间分布窄的孵育流动液体的合适方法，目前对时间灵敏的孵育通常以分批模式而不是连续模式进行。在分批模式下，在容器中孵育液体混合物，而孵育时间内的流是中断的。结果，分批模式下的生产率(例如，就单位时间段所孵育的液体的量而言，或就单位时间段所生产的生物药物的量而言)通常低于连续模式下的生产率。鉴于上述情况，迫切需要一种改进的方法，该方法能够使液体孵育一段限定的时间，同时提供高生产率。
技术实现思路
通过提供以下实施方式，本专利技术满足了上述需求并解决了本领域中的上述问题。特别地，本专利技术人惊奇地发现，使液体通过具有多个互连通道的结构提供了比先前已知的方法更窄的停留时间分布。因此，根据本专利技术，可以通过将至少两种液体混合并使混合物通过具有多个互连通道的结构，来孵育所述至少两种液体的混合物，其中，混合和通过连续进行。专利技术人还发现，具有多个互连通道的结构可以是无孔珠(non-porousbead)的填充床。在此实施方式中，互连通道由无孔珠之间的空间形成。然后，专利技术人进行了大量实验来研究哪些性质会影响停留时间分布。专利技术人惊奇地发现，在测试范围内，形成填充床的珠粒的平均粒径和粒径分布对停留时间分布具有最大影响。具体地，专利技术人发现，当珠粒的平均粒径为0.05mm至1mm且当粒径分布窄时，所述无孔珠的填充床提供了特别窄的停留时间分布。此外，专利技术人发现，无孔珠的更大体积的填充床得到更窄的停留时间分布。此外，根据本专利技术，更长的珠床(例如，以柱的形式)也得到更窄的停留时间分布。与当前所用的许多方法相反，本专利技术的方法可以容易地扩大规模。这是因为本专利技术的方法对流量和表观线速度(superficiallinearvelocity)的变化并不敏感，并且因为当使用具有更大体积和更长的无孔珠的填充床时，停留时间分布变窄。因此，本专利技术的方法可以容易地整合到商业生产过程中。总言之，通过提供下文所述的优选实施方式，本专利技术提供了孵育液体的改进方法。1.一种孵育至少两种液体的混合物的方法，该方法包括：i)将所述至少两种液体混合，获得混合物；以及ii)使所述混合物通过具有多个互连通道的结构，从而孵育所述混合物。2.根据第1项所述的方法，其中，所述方法是连续流方法。3.根据第1或2项所述的方法，其中，所述混合和通过连续进行。4.根据前述项中任一项所述的方法，其中，具有多个互连通道的结构为无孔珠的填充床。5.根据第4项所述的方法，其中，所述无孔珠为惰性无孔珠。6.根据第4或5项所述的方法，其中，所述无孔珠为玻璃珠或陶瓷珠，或塑料珠，例如PMMA珠或钢珠。7.根据第4至6项中任一项所述的方法，其中，无孔珠的平均粒径为0.05mm至1mm，优选为0.05mm至0.6mm，更优选为0.05mm至0.5mm，最优选为0.05mm至0.3mm。8.根据第4至7项中任一项所述的方法，其中，95％的无孔珠对平均粒径偏离不超过50％，优选不超过35％，最优选不超过20％。9.根据第1至8项中任一项所述的方法，其中，具有多个互连通道的结构的长度为至少5cm，或至少10cm，或至少20cm，或至少30cm，或至少50cm，或至少70cm，或至少100cm。10.根据第1至9项中任一项所述的方法，其中，具有多个互连通道的结构的长度为至少20cm。11.根据第4至10项中任一项所述的方法，其中，无孔珠的填充床可以通过包括对所述无孔珠进行振动处理的方法获得。12.根据第4至11项中任一项所述的方法，其中，对于无孔珠的填充床，空隙体积占总体积的分数为0.2至0.45。13.根据第4至12项中任一项所述的方法，其中，对于无孔珠的填充床，空隙体积占总体积的分数为0.37至0.42。14.根据第4至13项中任一项所述的方法，其中，无孔珠的填充床被容纳在柱和/或反应器中。15.根据第14项所述的方法，其中，所述柱的直径大于5mm，优选直径为至少10mm。16.根据第4至15项中任一项所述的方法，其中，无孔珠的填充床的空隙体积为至少10mL，优选为至少40mL，更优选为至少150mL，甚至更优选为至少470mL，还更优选为至少700mL。17.根据第1、9和10项中任一项所述的方法，其中，具有多个互连通道的结构为整料(mo本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种孵育至少两种液体的混合物的方法，所述方法包括：/ni)将所述至少两种液体混合，获得混合物；以及/nii)使所述混合物通过具有多个互连通道的结构，从而孵育所述混合物。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170710 EP 17180477.6;20180130 EP 18154196.21.一种孵育至少两种液体的混合物的方法，所述方法包括：
i)将所述至少两种液体混合，获得混合物；以及
ii)使所述混合物通过具有多个互连通道的结构，从而孵育所述混合物。


2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述方法是连续流方法。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述混合和通过连续进行。


4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，具有多个互连通道的结构为无孔珠的填充床。


5.根据权利要求4所述的方法，其中，所述无孔珠为惰性无孔珠。


6.根据权利要求4或权利要求5所述的方法，其中，所述无孔珠为玻璃珠，或陶瓷珠，或塑料珠，例如PMMA珠或钢珠。


7.根据权利要求4至6中任一项所述的方法，其中，所述无孔珠的平均粒径为0.05mm至1mm，优选为0.05mm至0.6mm，更优选为0.05mm至0.5mm，最优选为0.05mm至0.3mm。


8.根据权利要求4至7中任一项所述的方法，其中，95％的无孔珠对平均粒径偏离不超过50％，优选不超过35％，最优选不超过20％。


9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中，具有多个互连通道的结构的长度为至少5cm，或至少10cm，或至少20cm，或至少30cm，或至少50cm，或至少70cm，或至少100cm。


10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中，具有多个互连通道的结构的长度为至少20cm。


11.根据权利要求4至10中任一项所述的方法，其中，所述无孔珠的填充床可以通过包括对所述无孔珠进行振动处理的方法获得。


12.根据权利要求4至11中任一项所述的方法，其中，对于无孔珠的填充床，空隙体积占总体积的分数为0.2至0.45。


13.根据权利要求4至12中任一项所述的方法，其中，对于无孔珠的填充床，空隙体积占总体积的分数为0.37至0.42。


14.根据权利要求4至13中任一项所述的方法，其中，所述无孔珠的填充床被容纳在柱和/或反应器中。


15.根据权利要求14所述的方法，其中，所述柱的直径大于5mm，优选地，直径为至少10mm。


16.根据权利要求4至15中任一项所述的方法，其中，所述无孔珠的填充床的空隙体积为至少10mL，优选为至少40mL，更优选为至少150mL，还更优选为至少470mL，还更优选为至少700mL。


17.根据权利要求1、9和10中任一项所述的方法，其中，具有多个互连通道的结构为整料或预制结构，例如3D打印的几何形状。


18.根据权利要求17所述的方法，其中，具有多个互连通道的结构为整料，对于所述整料，空隙体积占总体积的分数为0.5至0.75。


19.根据权利要求1至18中任一项所述的方法，其中，所述方法用于病毒灭活，所述至少两种液体中的第一种液体为可能含有病毒的液体，所述至少两种液体中的第二种液体包含病毒灭活剂。


20.根据权利要求19所述的方法，其中，所述第一种液体包含生物药物。


21.根据权利要求19或20所述的方法，其中，所述方法用于包膜病毒的病毒灭活。


22.根据权利要求19至21中任一项所述的方法，其中，所述病毒为逆转录病毒和/或黄病毒科的病毒。


23.根据权利要求22所述的方法，其中，所述病毒为逆转录病毒，优选为X-MuLV。


24.根据权利要求22所述的方法，其中，所述病毒为黄病毒科的病毒，优选为BVDV。


25.根据权利要求19至24中任一项所述的方法，其中，所述病毒灭活剂为适用于溶剂/去污剂病毒灭活处理的溶剂/去污剂混合物，或适用于低pH病毒灭活处理的酸性溶液。


26.根据权利要求19至25中任一项所述的方法，其中，所述病毒灭活剂为用于溶剂去污剂处理的溶剂/去污剂混合物。


27.根据权利要求19至26中任一项所述的方法，其中，所述方法对至少一种病毒实现了至少1Log10下降值(LRV)，至少2LRV，至少4LRV或至少6LRV。


28.根据权利要求27所述的方法，其中，所述至少一种病毒为权利要求22至24中任一项所述的病毒。


29.根据权利要求1至28中任一项所述的方法，其中，所述混合物通过所述结构的表观线速度为600cm/h以下，或300cm/h以下，或200cm/h以下，或100cm/h以下，或50cm/h以下，或20cm/h以下。


30.根据权利要求1至29中任一项所述的方法，其中，当通过具有多个互连通道的所述结构时，所述混合物的博登斯坦数为50以上，优选为300以上，更优选为400以上，还更优选为500以上，还更优选为600以上，最优选为800以上。


31.一种制备生物药物的方法，所述方法包括：进行权利要求20至31中任一项所述的方法，以及回收所述生物药物。

【专利技术属性】
技术研发人员：N·哈默施密特，J·森卡，A·荣鲍尔，D·L·马丁斯，
申请(专利权)人：百深公司，百深有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国;US