柳兰抗HIV‑1病毒有效部位及制法和应用制造技术

柳兰抗HIV‑1病毒有效部位及制法和应用，属于植物提取物技术领域。选自柳兰正丁醇部位或柳兰水相萃取部位。将柳兰全草粉碎，加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏分散在蒸馏水中得浸膏分散液，然后依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，将所得正丁醇萃取液挥去溶剂，得柳兰正丁醇部位；将萃取后剩余的浸膏分散液浓缩、干燥，得柳兰水相萃取部位。本发明专利技术的柳兰抗HIV‑1病毒有效部位在制备抗HIV‑1 病毒药物方面的应用，适用于开发成抗艾滋病新药。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及柳兰抗HIV-1病毒有效部位及制法和应用，属于植物提取物

技术介绍
柳兰（EpilobiumangustifoliumL.）为柳叶菜科（Onagraceae）柳兰属多年生粗壮草本植物，是藏医传统药用植物。其主要生于海拔2800~4250米的山坡林缘、林下及河谷湿草地。分布在我国西南、西北、华北至东北。北温带广布，北美洲、欧洲至日本、小亚细亚至喜马拉雅等地也有。柳兰全草味苦，无毒，有消肿利水，下乳，润肠之功能。主治乳汁不足，气虚浮肿。格尔•格桑扎西在《实用藏药名库》记载其具有清热利胆、止泻、杀虫功能。艾滋病即获得性免疫缺陷综合症（又译：后天性免疫缺陷症候群）。如今艾滋病己在全球范围内成为严重危害人类生存与发展的公共卫生和社会问题。我国艾滋病的流行经过传入期、扩散期，目前己进入快速增长期，处于全国低流行和局部地区及特定人群高流行并存的态势。艾滋病是一种危害性极大的传染病，由感染艾滋病病毒（HIV病毒）引起。HIV是一种能攻击人体免疫系统的病毒，即“人类免疫缺陷病毒”，它侵入人体后破坏人体的免疫系统，使人体发生多种难以治愈的感染和肿瘤，最终导致死亡，现已证实HIV分为两型：HIV-1型和HIV-2型。HIV-1型为逆转录病毒科慢病毒属，其病毒RNA基因组必须经先行由单链RNA逆转录为cDNA，形成RNA-DNA杂合体后，水解掉与DNA互补的RNA，再以单链的cDNA为模板合成双链DNA，从而可以整合人宿主DNA基因组当中，此过程由逆转录酶（RT酶）催化。RT酶功能多样，它由P66和P51两个蛋白单体构成异源二聚体，其中P66是酶活性的主要功能部分；除具有逆转录酶活性外，还具有DNA聚合酶活性以及RNase酶活性。逆转录过程的分子机制亦颇为复杂：逆转录过程的起始引物并非来自病毒自身合成，而是利用宿主细胞内的tRNALye-3，与病毒RNA的引物结合位点（PBS）相结合后，再高效启动逆转录过程。其次，逆转录酶因为缺泛3'-5'核酸外切酶活性，无法完成校读功能，复制忠实性差，是HIV病毒高变异性的重要原因之一。人类免疫缺陷病毒１型（即HIV-1型）逆转录酶（RT）一直是重要的抗HIV感染的靶点，用于开发治疗艾滋病的药物。蛋白酶是人类免疫缺陷病毒基因编码中的一种特异天冬酰蛋白酶，其作用是将基因和基因表达所产生的蛋白裂解，成为具有活性的病毒结构蛋白和酶，是HIV病毒复制的关键物质。HIV蛋白酶抑制剂主要作用于艾滋病病毒复制的最后阶段，由于蛋白酶被抑制，使之从感染的CD4细胞核中形成DNA不能聚集和释放，导致蛋白前体不能裂解和形成成熟病毒体。申请人在研究中发现：目前抗艾滋病药物的原料较为匮乏。现有的抗HIV病毒药物像其他类型的抗艾滋病病毒药物一样，随着HIV-1逆转录酶产生耐药性突变，已上市的治疗艾滋病的药物的疗效受到限制。目前，迫切需要开发新一代抗HIV-1型病毒药物。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是：克服现有技术的不足，提供柳兰抗HIV-1病毒有效部位及制法和应用，该柳兰抗HIV-1病毒有效部位能有效抑制HIV-1病毒活性，能够用于制备抗HIV-1病毒药物，适用于开发成抗艾滋病新药。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：该柳兰抗HIV-1病毒有效部位，其特征在于：选自柳兰正丁醇部位或柳兰水相萃取部位。所述的正丁醇部位含有黄酮苷和酚类化合物；水相萃取部位含有多糖和有机酸类化合物。该柳兰抗HIV-1病毒有效部位的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：将柳兰全草粉碎，加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏分散在蒸馏水中得浸膏分散液，然后依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，将所得正丁醇萃取液挥去正丁醇，得柳兰正丁醇部位；将萃取后剩余的浸膏分散液浓缩、干燥，得柳兰水相萃取部位。所述的回流提取为超声波辅助回流提取，具体操作为：将粉碎后的柳兰全草加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液超声波提取0.5~3小时，过滤，滤渣加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液回流提取1~3次，合并提取液，即得。该柳兰抗HIV-1病毒有效部位的应用，其特征在于：在制备抗HIV-1病毒药物中的应用。所述抗HIV-1病毒药物是通过柳兰正丁醇部位或柳兰水相萃取部位，与药用辅料混合后，制成的口服制剂或注射制剂。所述的注射制剂为脂质体注射剂、纳米粒注射剂或微球注射剂。所述的口服制剂为散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服溶液剂。申请人对于本专利技术的说明如下：制备方法中，浸膏为粗提取物，采用不同的溶剂萃取浸膏分散液，指的是依次将石油醚加入浸膏分散液萃取分离获得石油醚萃取液、将乙酸乙酯加入浸膏分散液萃取分离获得乙酸乙酯萃取液、将正丁醇加入浸膏分散液萃取分离获得正丁醇萃取液；取乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液分别挥发去除溶剂后，所得即选自柳兰乙酸乙酯部位和柳兰正丁醇部位；将萃取后剩余的浸膏分散液（溶剂为水），挥发去除溶剂即得柳兰水相萃取部位。水相萃取部位也可以称作水相萃取物，水相萃取部位易溶于水；而相对的，石油醚、乙酸乙酯和正丁醇为有机相，石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位对应易溶于石油醚、乙酸乙酯和正丁醇。其中，柳兰正丁醇部位含有皂苷和酚类化合物；柳兰水相萃取部位含有多糖和有机酸类化合物。挥去溶剂即挥发去除溶剂。挥去溶剂可以采用常压加热使溶剂（石油醚、乙酸乙酯和正丁醇）挥发。优选的，挥去溶剂采用减压浓缩，该方法效率高，并且能避免热敏性成分因高温丧失药性。优选的剂型为口服制剂或注射制剂。口服制剂和注射制剂口服制剂和注射制剂为最佳给药途径。此处所述口服制剂为经肠胃道给药制剂，优选的，口服制剂为缓释、控释型口服制剂。胶囊剂包括软胶囊和硬胶囊。另外，该柳兰抗HIV-1病毒有效部位的制剂也可以为其他给药途径的制剂：如呼吸道给药制剂（喷雾剂、气雾剂、粉雾剂）；皮肤给药制剂（外用溶液剂、洗剂、搽剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂、贴剂）；膜给药制剂（滴眼剂、滴鼻剂、眼用软膏、含漱剂、舌下片剂）；腔道给药制剂（栓剂）。注射制剂可以为常规注射制剂。根据药物传递系统进行分类，优选的，本专利技术的注射制剂为脂质体注射剂、纳米粒注射剂或微球注射剂；其他的，本专利技术的注射剂还可以为微囊注射剂、聚合物胶束注射剂、微乳或亚微乳注射剂、亚微粒注射剂或凝胶注射剂，以上药物传递系统的注射剂能延长药物载体在体内的循环时间、延长载药微粒在吸收部位的停留时间、控制药物在释放初期的突释效应。药用辅料包括药物载体、及溶剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、助悬剂、澄清剂、反絮凝剂、矫味剂、着色剂、防腐剂、化学灭菌剂、吸附剂、助滤剂、抗氧剂、pH调节剂、等渗调节剂、稀释剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、抗粘着剂、缓释剂、控释剂、包衣材料、成膜材料、胶囊材料中的一种或多种。制备方法中：所述的超声波提取为常温下进行。所述的浓缩和干燥为减压浓缩、真空干燥，以避免具有挥发性的柳兰有效部位的散失。所述的回流提取1~3次是指：向回流加热装置中加入超声提取后的滤渣和乙醇溶液，加热、回流提取，放冷过滤得一次提取液和药渣；向药渣中加入乙醇溶液，加热、进行第二次回流提取，放冷过滤得二次提取液和药渣；合并多次提取液，即得回流提取的提取液。优选的，每次本文档来自技高网...

【技术保护点】
柳兰抗HIV‑1病毒有效部位，其特征在于：选自柳兰正丁醇部位或柳兰水相萃取部位。

【技术特征摘要】
1.柳兰抗HIV-1病毒有效部位，其特征在于：选自柳兰正丁醇部位或柳兰水相萃取部位。2.权利要求1所述的柳兰抗HIV-1病毒有效部位的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：将柳兰全草粉碎，加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏分散在蒸馏水中得浸膏分散液，然后依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，将所得正丁醇萃取液挥去正丁醇，得柳兰正丁醇部位；将萃取后剩余的浸膏分散液浓缩、干燥，得柳兰水相萃取部位。3.根据权利要求2所述的柳兰抗HIV-1病毒有效部位的制备方法，其特征在于：所述的提取为超声波辅助回流提取，具体操作为：将粉碎后的柳兰全草加入体积百分比浓度65%~95%乙醇溶液超声波...

【专利技术属性】
技术研发人员：林鹏程，胡秦，曾擎屹，
申请(专利权)人：青海民族大学，
类型：发明
国别省市：青海;63