用于血友病B的基因疗法的编码具有增加的表达的重组FIX的病毒载体制造技术

本公开提供了编码用于在哺乳动物细胞中表达的因子IX变体的密码子改变的多核苷酸以及其他方面。在一些实施方案中，本公开还提供了哺乳动物基因疗法载体和治疗血友病B的方法。

Viral vector encoding recombinant fix with increased expression for gene therapy of hemophilia B

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于血友病B的基因疗法的编码具有增加的表达的重组FIX的病毒载体相关申请的交叉参考本申请要求于2017年5月22日提交的美国临时申请No.62/509,616的权益，所述美国临时申请出于所有目的以全文引用的方式明确地并入本文中。对以光盘形式提交的“序列表”、表格或计算机程序列表附件的引用本公开通过引用合并了随同提交的于2018年5月21日创建的、名为008073_5117_WO_Sequence_Listing.txt并且大小为73KB的序列表文本副本。专利技术背景血液凝固是通过相互依赖的生化反应的复杂又动态的生物途径(称为凝血级联反应)来进行。凝血因子VIII(FVIII)和因子IX(FIX)是所述级联反应中的关键组分。因子VIII被募集至出血部位，并且与活化因子IX和因子X(FX)形成X酶复合物。所述X酶复合物使FX活化，这进而使凝血酶原活化为凝血酶，所述凝血酶接着使凝血级联反应中的其他组分活化，从而产生稳定的凝块(综述于Saenko等人,TrendsCardiovasc.Med.,9:185-192(1999)；Lentin本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸组合物，所述组合物包含编码因子IX蛋白的因子IX多核苷酸，所述因子IX多核苷酸包含与CS06-MP-NA(SEQ ID NO:17)的核酸序列具有至少97％同一性的核酸序列。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170522 US 62/509,6161.一种核酸组合物，所述组合物包含编码因子IX蛋白的因子IX多核苷酸，所述因子IX多核苷酸包含与CS06-MP-NA(SEQIDNO:17)的核酸序列具有至少97％同一性的核酸序列。


2.如权利要求1所述的核酸组合物，其中所述因子IX多核苷酸包含与CS06-MP-NA(SEQIDNO:17)的核酸序列具有至少99％同一性的核酸序列。


3.如权利要求1或2所述的核酸组合物，其中所述因子IX多核苷酸具有不超过10个CpG二核苷酸。


4.如权利要求1或2所述的核酸组合物，其中所述因子IX多核苷酸具有不超过3个CpG二核苷酸。


5.如权利要求1所述的核酸组合物，其中所述因子IX多核苷酸包含CS06-MP-NA(SEQIDNO:17)的核酸序列。


6.根据权利要求1-5中任一项所述的核酸组合物，其中所述因子IX多核苷酸编码相对于FIX-FL-NA(SEQIDNO:1)在核苷酸位置1150-1152处的亮氨酸。


7.根据权利要求1-6中任一项所述的核酸组合物，其中由所述因子IX多核苷酸编码的所述因子IX蛋白与FIXp-MP-AA(SEQIDNO:12)相比具有1至10个氨基酸取代。


8.根据权利要求1-6中任一项所述的核酸组合物，其中由所述因子IX多核苷酸编码的所述因子IX蛋白具有FIXp-MP-AA(SEQIDNO:12)的氨基酸序列。


9.根据权利要求1-8中任一项所述的核酸组合物，其中所述因子IX多核苷酸进一步包含编码前原前导肽的前原前导多核苷酸，所述前原前导肽包含FIX-PPP-AA(SEQIDNO:36)的氨基酸序列。


10.如权利要求9所述的核酸组合物，其中所述前原前导多核苷酸具有CS06-PPP-NA(SEQIDNO:23)的核酸序列。


11.根据权利要求1-10中任一项所述的核酸组合物，其中所述因子IX多核苷酸具有与CS06-FL-NA(SEQIDNO:9)的核酸序列具有至少99％同一性的核酸序列。


12.根据权利要求1-10中任一项所述的核酸组合物，其中所述因子IX多核苷酸具有CS06-FL-NA(SEQIDNO:9)的核酸序列。


13.一种核酸组合物，所述核酸组合物包含编码因子IX蛋白的因子IX多核苷酸，所述因子IX多核苷酸包含与CS02-MP-NA(SEQIDNO:13)的核酸序列具有至少95％同一性的核酸序列。


14.一种核酸组合物，所述核酸组合物包含编码因子IX蛋白的因子IX多核苷酸，所述因子IX多核苷酸包含与CS03-MP-NA(SEQIDNO:14)的核酸序列具有至少98％同一性的核酸序列。


15.一种核酸组合物，所述核酸组合物包含编码因子IX蛋白的因子IX多核苷酸，所述因子IX多核苷酸包含与CS04-MP-NA(SEQIDNO:15)的核酸序列具有至少99％同一性的核酸序列。


16.一种核酸组合物，所述核酸组合物包含编码因子IX蛋白的因子IX多核苷酸，所述因子IX多核苷酸包含与CS05-MP-NA(SEQIDNO:16)的核酸序列具有至少98％同一性的核酸序列。


17.根据权利要求13-16中任一项所述的核酸组合物，其中所述因子IX多核苷酸具有不超过10个CpG二核苷酸。


18.根据权利要求13-16中任一项所述的核酸组合物，其中所述因子IX多核苷酸具有不超过3个CpG二核苷酸。


19.根据权利要求13-16中任一项所述的核...

【专利技术属性】
技术研发人员：弗兰兹斯卡·霍林，约翰内斯·莱格勒，法尔克金特尔·福克纳，汉斯彼特·罗藤斯泰纳，弗里德里希·斯史夫林格，
申请(专利权)人：百深公司，百深有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国;US