一种利用大型蚤检测急性毒性的试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开了一种利用大型蚤检测急性毒性的试剂盒，该试剂盒主要包括：包装壳(1)、观察通道(2)、加液通道(3)、补光系统(4)、培养容器，所述的试剂盒将优选的大型溞卵直接孵化测定的，过程直接简单，有效的排除因为外界环境对溞卵生长特性的影响，通过物理补光系统(4)，可以优先判断待测液的毒性，提高定性检测效率，然后更进一步的进行定量检测计算，节省检测时间，应用范围广，待测物质不仅仅局限于水质等其他液体，固体或不同状态的物质也可以使用。

【技术实现步骤摘要】
一种利用大型蚤检测急性毒性的试剂盒
本技术涉及大型溞快速检测水质毒性
，具体地涉及一种利用大型蚤检测急性毒性的试剂盒。
技术介绍
大型溞属于节肢动物门、甲壳纲、枝角类，是常见的浮游甲壳动物，是淡水食物链中不可缺少的组成成分。因其生活周期短、生长快、生殖量高、易培养、对水环境胁迫敏感等特点使其成为国内外实验室广泛使用的模式生物，在农药、化学品的急慢性毒性和环境激素效应的测试方面具有重要的作用，且其在水域生态系统中具有重要的地位，因此受到众多国家毒理学工作者的重视。大型溞是敏感性较强，非常有代表性的一种浮游动物，现已成为一种标准试验生物，被广泛用于水生生物毒理学的研究中。目前，ISO标准、OECD指南、美国EPA标准以及我国国标中都有涉及大型溞的生长抑制和繁殖的标准。大型蚤急性毒性试验以蚤体的死亡和运动抑制表征急性毒性，大型蚤的急性毒性测定即用大型蚤为试验生物，测定物质或废水的24或48小时的半数抑制浓度(24h-EC50或48h-EC50)，或半数致死浓度(24h-LC50或48h-LC50)，以反映物质或废水的毒性程度。在水质物质对溞类(大型溞)的急性毒性测定方法中的测定原理主要是：24h-EC50、48h-EC50指在24h或48h内百分之五十的受试蚤运动受抑制时被测物浓度。(运动受抑制是指反复转动试验容器，15s之内失去活动能力的大型蚤，被认为运动受抑制；即使其触角仍能活动，也应算做不活动的个体。)24h-LC50、48h-LC50指在24h或48h内百分之五十的受试蚤死亡时被测物的浓度，以受试蚤心脏停止跳动为其死亡标志。以试验样品浓度(或其对数)和相应浓度下大型蚤的死亡率(或运动受抑制率)为基础建立正相关关系，并据此估算得到该物质对大型蚤的LC50、EC50值，因此如果能结合此原理快速测定液体毒性，从物理的角度直观的表征方便判断，那么就是对此方法应用的更大进步。
技术实现思路
本技术的目的是提供一种利用大型蚤检测急性毒性的试剂盒，设计合理、结果直观、使用方便，检测效率高。本技术的技术方案为：一种利用大型蚤检测急性毒性的的试剂盒，试剂盒主要包括：包装壳、观察通道、加液通道、补光系统、培养容器；所述的观察通道为白色的透光片，所述的加液通道为漏斗形的加液管连接的管路，所述的补光系统是由发光装置、导线、开关、电池组成，所述的培养容器分为两组，对照组和试验组，每组包含稀释水母液容器、饵料容器和大型溞卵容器；所述的观察通道安装在培养容器上方，所述的补光系统安装在培养容器的下方，所述的加液通道分别连接对照组和试验组的培养容器。进一步的，所述的试剂盒的制备方法主要包括以下步骤：a.挑选大型溞幼虫进行培养，然后选择母溞制备溞卵，保存溞卵，备用；b.制备稀释水母液、饵料；c.制备试剂盒盒体，并将观察通道、加液通道、补光系统、培养容器进行生产组装，即得到所述的利用大型蚤检测急性毒性的的试剂盒。进一步的，所述的饵料容器是将小球藻经过实验室培养后进行脱水，离心，将收集到的小球藻冷冻干燥后按照常规工艺制备冻干粉，得到的饵料放入饵料容器中保存。所述的稀释水母液容器使用的是白色PE塑料瓶，所述的饵料容器使用的是黑色PE塑料瓶，所述的大型溞卵容器使用的是蓝色PE塑料瓶。进一步的，所述的发光装置是指LED灯管，所述的LED灯管为与观察通道的白色的透光片相同的轮廓形状，所述的开关通过导线连接，螺丝固定在包装壳外侧正前方，所述的电池为两节5号电池。进一步的，所述的加液通道的漏斗形状管与进液管之间装有流量控制开关。进一步的，所述的试剂盒部件均选用无毒材料制成，每个组成部分都有明确的中英文标记。与现有技术相比，本技术的试剂盒的有益效果体现在：由于该试剂盒是将优选的大型溞卵直接孵化测定的，过程直接简单，有效的排除因为外界环境对溞卵生长特性的影响，通过物理补光系统，可以优先判断待测液的毒性，提高定性检测效率，然后更进一步的进行定量检测计算，节省检测时间，应用范围广，待测物质不仅仅局限于水质等其他液体，固体或不同状态的物质也可以使用。附图说明图1是本技术所述的一种利用大型蚤检测急性毒性的试剂盒的结构示意图；图2是本技术所述的一种利用大型蚤检测急性毒性的试剂盒的补光系统结构示意图；其中，1-包装壳，2-观察通道，3-加液通道，4-补光系统，5-试验组，6-对照组，7-发光装置，8-开关，9-电池，10-导线。具体实施方式为使本技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本技术的附图，对本技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本技术保护的范围。为便于对本技术实施例的理解，下面将结合附图及具体实施例为例做进一步的解释说明，实施例并不构成对本技术实施例的限定。实施例1：如图1所示，一种利用大型蚤检测急性毒性的的试剂盒，试剂盒主要包括：包装壳1、观察通道2、加液通道3、补光系统4、培养容器；观察通道2为白色的透光片，加液通道3为漏斗形的加液管连接的管路，如图2所示，补光系统4是由发光装置7、导线10、开关8、电池9组成，培养容器分为两组，对照组6和试验组5，每组包含稀释水母液容器、饵料容器和大型溞卵容器；观察通道2安装在培养容器上方，补光系统4安装在培养容器的下方，加液通道3分别连接对照组6和试验组5的培养容器。试剂盒的制备方法主要包括以下步骤：a.挑选大型溞幼虫进行培养，然后选择母溞制备溞卵，保存溞卵，备用；b.制备稀释水母液、饵料容器：饵料容器是将小球藻经过实验室培养后进行脱水，离心，将收集到的小球藻冷冻干燥后按照常规工艺制备冻干粉，得到的饵料放入饵料容器中保存；c.制备试剂盒盒体，并将观察通道2、加液通道3、补光系统4、培养容器进行生产组装，即得到利用大型蚤检测急性毒性的的试剂盒。稀释水母液容器使用的是白色PE塑料瓶；饵料容器使用的是黑色PE塑料瓶，大型溞卵容器使用的是蓝色PE塑料瓶。发光装置7是指LED灯管，LED灯管为与观察通道2的白色的透光片相同的轮廓形状，开关8通过导线连接，螺丝固定在包装壳1外侧正前方，电池9为两节5号电池。加液通道3的漏斗形状管与进液管之间装有流量控制开关。试剂盒部件均选用无毒材料制成，每个组成部分都有明确的中英文标记。实施例1制备的试剂盒的使用方法为：(1)取以上四种稀释水母液25mL混合，稀释至1L，必要时可用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节pH值，使其稳定在7.8，标准稀释水应容许大型蚤在其中生存至少48h，检查稀释水中不含有任何已知的对大型蚤有毒的物质，例如：氯、重金属、农药、氨或多氯联苯等。(2)将大型溞容器中的溞卵使用纯净水进行冲洗，将保存液冲洗干净；将冲洗干净的大型蚤卵转至孵化皿中，加入已配好的标准稀释水15ml，将试剂盒整体放入光照培养箱中，在22℃，6000LUX，72h的环境下进行孵化；(3)根据预试验的结果确定正式试验的浓度范围，按几何级数的浓度系列，即等比级数间距设计6个浓度；等比级系数不超过2.2，如1、2、4、8、16等比级系数为2，最高浓度处理组抑制或死本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用大型蚤检测急性毒性的试剂盒，其特征在于，试剂盒主要包括：包装壳(1)、观察通道(2)、加液通道(3)、补光系统(4)、培养容器；所述的观察通道(2)为白色的透光片，所述的加液通道(3)为漏斗形的加液管连接的管路，所述的补光系统(4)是由发光装置(7)、导线(10)、开关(8)、电池(9)组成，所述的培养容器分为两组，对照组(6)和试验组(5)，每组包含稀释水母液容器、饵料容器和大型溞卵容器；所述的观察通道(2)安装在培养容器上方，所述的补光系统(4)安装在培养容器的下方，所述的加液通道(3)分别连接对照组(6)和试验组(5)的培养容器。

【技术特征摘要】
1.一种利用大型蚤检测急性毒性的试剂盒，其特征在于，试剂盒主要包括：包装壳(1)、观察通道(2)、加液通道(3)、补光系统(4)、培养容器；所述的观察通道(2)为白色的透光片，所述的加液通道(3)为漏斗形的加液管连接的管路，所述的补光系统(4)是由发光装置(7)、导线(10)、开关(8)、电池(9)组成，所述的培养容器分为两组，对照组(6)和试验组(5)，每组包含稀释水母液容器、饵料容器和大型溞卵容器；所述的观察通道(2)安装在培养容器上方，所述的补光系统(4)安装在培养容器的下方，所述的加液通道(3)分别连接对照组(6)和试验组(5)的培...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛银刚，孔德洋，郑向群，陈桥，张小琼，沈丽娟，何健，许静，郭欣妍，吴文铸，
申请(专利权)人：常州市环境监测中心，环境保护部南京环境科学研究所，环境保护部固体废物与化学品管理技术中心，
类型：新型
国别省市：江苏,32