具有抑制脂堆积作用的六环三萜类化合物及其提取分离方法和应用技术

本发明专利技术公布了一种六环三萜类化合物，具有明显的抑制脂堆积作用，可用作抗肝炎、肝硬化的药物；本发明专利技术提供的六环三萜类化合物的提取分离方法，以天然野鸦椿为原料，来源广泛、无毒、无污染，制备过程简便，成本低廉，适合大规模推广应用。

【技术实现步骤摘要】
具有抑制脂堆积作用的六环三萜类化合物及其提取分离方法和应用
本专利技术属于医药领域，尤其涉及一种具有抑制脂堆积作用的六环三萜及其提取分离方法和应用。
技术介绍
野鸦椿，学名为Euscaphisjaponica(Thunb.)Dippel，别名酒药花、鸡肾果(广西)，鸡眼睛(四川)，小山辣子、山海椒(云南)，芽子木(湖南)，红椋(湖北、四川)。为省沽油科落叶小乔木或灌木，是一种极具利用潜力的观赏植物。其根价药用值为解毒，清热，利湿。用于感冒头痛，痢疾，肠炎，肝纤维化。目前国内外学者对野鸦椿进行过一些研究，主要报道有黄酮类，三萜类，酯类，甾醇类等化合物。为充分利用我国丰富的资源，进一步寻找新的活性天然产物，本专利技术对野鸦椿化学成分进行了研究，并从中分离到了一个新的三萜类化合物。该化合物有明显的抑制甘油三酯的作用。
技术实现思路
为了达到上述目的，本专利技术提供了一种具有抑制脂堆积作用的六环三萜及其提取分离方法和应用。一方面，本专利技术提供了一种六环三萜类化合物，其化学结构式如下：第二方面，本专利技术提供了第一方面所述的六环三萜类化合物的提取分离方法，其包括以下步骤：步骤一，取野鸦椿的干燥根，粉碎后用体积浓度为80-90％的乙醇回流提取，合并提取液，减压回收溶剂至无醇味，得浸膏；步骤二，将浸膏悬浮于水中，用石油醚萃取，回收溶剂，得石油醚部位，取石油醚部位干法上样，通过100～200目的硅胶柱色谱，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱，用TLC检测合并类似部分，得到7个组分根据极性从小到大依次命名为A-G；步骤三，将步骤二得到的组分C通过100～200目的硅胶柱色谱，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱，用TLC检测合并类似部分，得到4个组分根据极性从小到大依次命名为Ca-Cd；步骤四，将步骤三得到的组分Ca干法上样，通过200～300目的硅胶柱层析，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱，用TLC检测合并类似部分，得到8个组分根据极性从小到大命名为Ca1-Ca8,将Ca2流分在石油醚-乙酸乙酯混合溶液中结晶、重结晶得到最终产物。第三方面，本专利技术提供了第一方面所述的六环三萜类化合物在抑制脂肪堆积方面的应用。本专利技术提供的六环三萜类化合物有明显的抑制脂肪堆积作用，可用作抗肝炎、肝硬化的药物；本专利技术提供的六环三萜类化合物的提取分离方法，以天然野鸦椿为原料，来源广泛、无毒、无污染，制备过程简便，成本低廉，适合大规模推广应用。附图说明图1为本专利技术实施例1对最终产物进行NMR鉴定的结果。图2为本专利技术实施例2中空白组的实验照片。图3为本专利技术实施例2中对照组的实验照片。图4为本专利技术实施例2中同时添加5μM油酸和浓度为1μg/ml的所述六环三萜类化合物的实验组的实验照片。图5为本专利技术实施例2中同时添加5μM油酸和浓度为5μg/ml的所述六环三萜类化合物的实验组的实验照片。图6为本专利技术实施例2中同时添加5μM油酸和浓度为25μg/ml的所述六环三萜类化合物的实验组的实验照片。图7本专利技术实施例3的六环三萜类化合物对甘油三脂影响效果图。具体实施方式一方面，本专利技术提供了一种六环三萜类化合物，其化学结构式如下：第二方面，本专利技术提供了第一方面所述的六环三萜类化合物的提取分离方法，其包括以下步骤：步骤一，取野鸦椿的干燥根，粉碎后用体积浓度为80-90％的乙醇回流提取，合并提取液，减压回收溶剂至无醇味，得浸膏；步骤二，将浸膏悬浮于水中，用石油醚萃取，回收溶剂，得石油醚部位，取石油醚部位干法上样，通过100～200目的硅胶柱色谱，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱，用TLC检测合并类似部分，得到7个组分根据极性从小到大依次命名为A-G；步骤三，将步骤二得到的组分C通过100～200目的硅胶柱色谱，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱，用TLC检测合并类似部分，得到4个组分根据极性从小到大依次命名为Ca-Cd；步骤四，将步骤三得到的组分Ca干法上样，通过200～300目的硅胶柱层析，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱，用TLC检测合并类似部分，得到8个组分根据极性从小到大命名为Ca1-Ca8,将Ca2流分在石油醚-乙酸乙酯混合溶液中结晶、重结晶得到最终产物。优选的，所述步骤二中硅胶柱层析所采用的梯度洗脱溶剂为石油醚和乙酸乙酯，浓度为石油醚：乙酸乙酯＝100:0-0:100。优选的，所述步骤三中硅胶柱层析所采用的梯度洗脱溶剂为石油醚和乙酸乙酯，浓度为石油醚：乙酸乙酯＝50:1-3:1。优选的，所述步骤四中硅胶柱层析所采用的梯度洗脱溶剂为石油醚和乙酸乙酯，浓度为石油醚：乙酸乙酯＝65:1-10:1。第三方面，本专利技术提供了第一方面所述的六环三萜类化合物在抑制脂肪堆积方面的应用。优选的，本专利技术提供了第一方面所述的六环三萜类化合物在抑制甘油三酯方面的应用。下面结合具体实施例，进一步对本专利技术进行详细描述。当然所描述的实施例仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本专利技术中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术的保护范围。实施例1首先提取分离本专利技术所述的六环三萜类化合物。本专利技术所用野鸦椿样品采集自湖南省泠水江市和青镇，经中国科学院华南植物园宁祖林博士鉴定为省沽油科野鸦椿属(StaphyleaceaeEuscaphis)植物野鸦椿(Euscaphisjaponica)的干燥根，标本存放于湖北大学生命科学学院中药生物技术省重点实验室。步骤一，取野鸦椿的干燥根40kg，适当粉碎后用体积浓度为90％乙醇回流提取，每次提取2小时，提取3次，合并提取液，减压回收溶剂至无醇味，得浸膏1177g；步骤二，将浸膏悬浮于水中，用石油醚萃取，回收溶剂，得石油醚部位取石油醚部位干法上样，通过100-200目的硅胶柱层析，其中采用石油醚：乙酸乙酯浓度为100:0-0:100的洗脱液进行梯度洗脱，用TLC检测合并类似部分，得到7个组分根据极性从小到大依次命名为A-G。组分A和B主要是挥发油和油脂类物质，未做分离。步骤三，将步骤二得到的组分C通过100-200目的硅胶柱层析，其中采用石油醚：乙酸乙酯浓度为50:1-3:1的洗脱液进行梯度洗脱，用TLC检测合并类似部分，得到4个组分根据极性从小到大依次命名为Ca-Cd；步骤四，将步骤三得到的组分Ca干法上样，通过200-300目的硅胶柱层析，其中采用石油醚：乙酸乙酯浓度为65:1-10:1的洗脱液进行梯度洗脱，用TLC检测合并类似部分，得到8个组分根据极性从小到大命名为Ca1～Ca8，组分Ca2流分在石油醚-乙酸乙酯混合溶液中结晶、重结晶得到最终产物34mg。对最终产物各项性能进行分析表征结果如下：无色针晶；熔点：201-203℃；比旋光度：紫外光谱(MeOH)λmax(logε)206.2(4.12),249(4.12)nm；红外光谱νmax3392,3069,2940,2858,1724,1665,1613,1454,1339,1196,1169,1140,832,738cm-1；质谱：ESI-MS:m/z481[M+H]+；479[M-H]-；高分辨质谱：HR-ESIMS:m/z479.3149[M-H]-(理论计算值C31H44O4,479.3167[M-H]-)。对最终产物分别进行H谱和C谱NMR鉴定，得到如表1的结果：表1：由以上分析表征结果本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种六环三萜类化合物，其化学结构式如下：

【技术特征摘要】
1.一种六环三萜类化合物，其化学结构式如下：2.如权利要求1所述的六环三萜类化合物的提取分离方法，其包括以下步骤：步骤一，取野鸦椿的干燥根，粉碎后用体积浓度为80-90％的乙醇回流提取，合并提取液，减压回收溶剂至无醇味，得浸膏；步骤二，将浸膏悬浮于水中，用石油醚萃取，回收溶剂，得石油醚部位，取石油醚部位干法上样，通过100～200目的硅胶柱色谱，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱，用TLC检测合并类似部分，得到7个组分根据极性从小到大依次命名为A-G；步骤三，将步骤二得到的组分C通过100～200目的硅胶柱色谱，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱，用TLC检测合并类似部分，得到4个组分根据极性从小到大依次命名为Ca-Cd；步骤四，将步骤三得到的组分Ca干法上样，通过200～300目的硅胶柱层析，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱，用TLC检测合并类似部分，得到8个组分根据极性从小到大命名...

【专利技术属性】
技术研发人员：李路军，李燕慈，吴正治，孙丽娟，陈勇，田珂，
申请(专利权)人：湖北大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42