发明专利技术人追踪研究了三七(：Panax pseudoginseng Wall.var.notoginseng(Burkill)Hoo et Tseng)抗肿瘤的活性，从活性部位(皂苷)中分离得到一个四环三萜单体化合物(代号：Y1218)，并用现代光谱技术鉴定了它的分子结构。该单体化合物具有抗癌效果。
【技术实现步骤摘要】
：本专利技术属于新医药研究领域。本专利技术涉及一个具有抗癌效果的化合物，具体涉及它的提取分离方法和体外抗癌的效果，还具体涉及它与药物载体(按一定比例)配物后的制剂及其应用。技术背景：三七叶(拉丁学名：Panax pseudoginseng Wall.var.notoginseng(Burkill)Hoo et Tseng)是五加科人参属多年生草本植物，也是名贵中药三七的枝叶部分。三七具有止血散瘀，消肿定痛等功效，近年发现具有一定的抗肿瘤作〈参考文献1.尚西亮，傅华群，刘佳等.三七总皂苷对入肝癌细胞的抑制作用[J]中国临床康复，2006.10(23)：121〉。专利技术人在系统追踪研究三七抗肿瘤的活性部位(皂苷)的抗癌活性成分的过程中，从三七叶中分离得到一个四环三萜单体化合物(代号：Y1218，下同)，并用现代光谱技术鉴定了它的分子结构(如式1)。该单体化合物具有抗癌效果。经过检索，国内外均没有发现化合物Y1218及其抗癌活性的相关文章、专利和报道。
技术实现思路
：本专利技术的目的，是用现代国内外最为先进的分离、鉴定和药物评价体系、技术，对传统名贵中药三七抗癌的物质基础进行系统的研究，以求发现新的具有成药前景的抗癌化合物单体，为抗癌新药的研究提供基础物质。本专利技术目的另一目的，是阐述Y1218制备方法及其分子结构确证。本专利技术目的另一目的，是Y1218的抗癌作用及其医药用途。本专利技术原料药三七产自我国云南文山，经过鉴定为人工种植的五加科人参属多年生草本植物三七(拉丁学名：Panax pseudoginseng Wall.var.notoginseng (Burkill)Hoo et Tseng)的枝叶(俗称：三七叶)。本专利技术涉及的化合物Y1218，是为式1.所表示的分子结构，其中文名称为：达玛烷-[12-羟基-20，25-环氧基]-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。英文名：Dammarane-[12-o1-20，25-epoxy]-3-O-beta-D-glucopyranside。代号为：Y1218。本专利技术涉及的化合物Y1218，是将三七叶，用当今的植物化学手段提取、分离得到的，并用当谱技术得以确证分子结构。具体地说，是原料药经过水或50-100％醇类，(可以是乙醇，丙醇或丁醇)的提取，将提取物浓缩至干燥，再用其他有机溶剂(可以是石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮)等提取，经过柱层析分离(柱层析洗脱剂可以是上述醇类和其他有机溶剂的任意组合)，再经过重结晶得到Y1218。专利技术人的结构鉴定手段，包括熔点、红外、质谱和核磁(1H MNR，13C NMR，HMBC，HMQC)等。提取分离和结构鉴定的具体实施过程，将在实施例中进行详细阐述。本法明还涉及Y1218及其组合物对癌症细胞的作用。具体的实施过程也将在实施 例中进行详细阐述本专利技术还涉及Y1218及其组合物，作为治疗和预防癌症的医药用途。本专利技术还涉及Y1218及药用载体，以及该药物化(组)合物可通过注射、口服或局部途径给药，给药剂型可以是例如片剂，胶囊、缓释和注射液等。根据本专利技术，本专利技术药物组合物可按本领域已知方法制备，例如将该化合物与药用载体混合。具体实施方式：现结合实例，对本专利技术做进一步的说明，但本专利技术的范围不限于以下的实施例。实施例1Y1218的制备。将干品三七叶原料药60kg常规粉碎，用乙醇提取，每次用乙醇1升，提取5次，合并。减压蒸发至恒重。得到乙醇提取物2.17kg。将乙醇提取物用热水溶解，并依次用正己烷、乙酸乙酯和正丁醇进行分配提取。得到正丁醇提取物0.73kg。将正丁醇取物反复经硅胶H(10～40μm)柱层析层分离，用正丁醇∶醋酸∶水＝(2～8)∶(1～4)∶(3～7)梯度洗脱，得到Fr1。将Fr1反复经硅胶柱层析，用氯仿∶甲醇＝(2～20)∶1洗脱，得到Y1218 0.78g(万分之0.013)。实施例2Y1218的结构鉴定。 Y1218为白黄色粉末。mp166-167；IR(cm-1)3400，2971，1450，1386；[α]20D+3.83°(MeOH；C＝0.5)；FAB-MS(m/z)，623[M+H]+，主要碎片峰495[623-128(C8H16O，侧链)]+，461[623-162(Glc)]+，提示有一个6碳糖，据此推测其分子量为622，分子式为C36H62O8；Y1218的13C NMR谱数据与人参皂苷Rh2相比较除了C20-C27不同外，其他的数据基本一致。表明Y1218的基本骨架与Rh2是相同的，即为达玛烷型基本结构。 1H MNR出现δ4.96(1H，d，J＝7.84Hz)，表明Y1218分子中含有1个β构型的吡喃糖，将Y1218经盐酸水解后得到D-吡喃葡萄糖，确证糖基为葡糖。也就进一步证实Y1218 与Rh2除了C20～C27的连接方式不同外，其他完全相同。经1H MNR，13C NMR，HMBC和HMQC综合解析，首先确定了Y1218分子中C20～C27的碳氢归属，并比对Rh2的碳氢归属，进一步确定了Y1218整个分子的碳氢归属及其结构(如式2)。与先前赵平等人报道的化合物1结构一致〈参考文献2：赵平，刘玉清，杨崇仁等.三七根的微量成分(1)[J]云南植物研究1993，15(4)，409-412〉。Y1218的碳氢主要归属如下：13C NMR(NO.)：δ39.2(C1)，26，7(C2)，88.8(C3)，40.1(C4)，56.4(C3)，18.5(C6)，35，2(C7)，37.0(C8)，50.1(C9)，39.7(C10)，31.2(C11)，70.2(C12)，49.8(C13)，51.3(C14)，31.3(C15)，25.4(C16)，55.0(C17)，16.8(C18)，16.5(C19)，76.9(C20)，27.3(C21)，35.8(C22)，30.0(C23)，36.5(C24)，73.0(C25)，33.2(C26)，19.6(C27)，28.2(C28)，15.8(C29)，17.2(C30)，106.9(C1’)，75.8(C2’)，78.8(C3’)71.8(C4’)，78.4(C5’)，63.1(C6’)1H MNR(NO.)：δ4.96(1H，d，J＝7.84Hz，Glc H-1)，3.63(1H-C12)，1.94(1H-C17)，1.63(1H-C13)，1.27(1H-C9)，1.16(3H-C26)，1.10(3H-C27)，1.10(3H-C21)，0.86(3H-C18)0.78(3H-C19)，0.78(3H-C30)0.77(3H-C28)，0.72(3H-C29)。实施例3 Y1218体外对肿瘤细胞的活性在体外对肿瘤细胞的抑制作用 实验肿瘤细胞：转移性结肠癌SW620、胃腺癌BGC-823等。用MTT方法测定体外细胞毒性，取生长良好的细胞200ul加入96孔板中，CO2培养箱中培养24小时。加入受试药物20μl/孔，培养48小时。将20μl MTT加入96孔板中，反应4小时，吸去上清液，加入20μl DMSO/孔，用酶联免疫检测仪在波长为570nm处测定每孔的吸光值，计算对细胞的杀伤作用。测定Y1218抑制50％肿瘤细胞生长的浓度(IC50)，并与紫杉本文档来自技高网...
【技术保护点】
化合物Y1218(式1.)。名称：达玛烷‑[12‑羟基‑20，25‑环氧基]‑3‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷。英文名：Dammarane‑[12‑ol‑20，25‑epoxy]‑3‑O‑beta‑D‑glucopyranside。
【技术特征摘要】
1.化合物Y1218(式1.)。名称：达玛烷-[12-羟基-20，25-环氧基]-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。英文名：Dammarane-[12-ol-20，25-epoxy]-3-O-beta-D-glucopyranside。2.Y1218制备方法。乙醇提取，得到乙醇提取物。将乙醇提取物在正丁醇-水中进行分配。得到正丁醇提取物。将正丁醇取物经硅胶柱层析层分离，正丁醇/醋酸/水梯度洗脱，得到Y1218。所用的有机体溶剂包括水，醇类如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等；酮类如丙酮，丁酮等。3.根据权利要求1含有Y1218的药物载体的组合物。4.根据权利1和3所述的Y1218药物组合物的制...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘桂珍，董晓林，张秀国，杨明，
申请(专利权)人：北京佗林医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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