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一种制备内源性逆转录病毒多克隆抗体的方法技术

技术编号:9823263 阅读:191 留言:0更新日期:2014-03-31 17:30
本发明专利技术公开了一种制备内源性逆转录病毒多克隆抗体的方法。步骤如下:将基因片段诱导至脂肪酸结合蛋白中;然后用粒子交换法重组蛋白;高纯度纯化;得到所需要的高纯度白蛋白;然后改良免疫测试;加入脱色液;脱色液中可以加入90ml超纯水,即可;所述重组蛋白,可以与单抗蛋白发生特异性反应。;所述蛋白需要从抗血清中组分纯化分离出来。本发明专利技术的有益效果是,实验简单,费用较低,抗体的制备为将来检测临床器官和人工肝中的PERV的表达及传播具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种实验方法,具体来说,。
技术介绍
界种移植在治疗人类疾病方面提供了极为丰富的器官、组织和细胞来源。因为猪来源方便,易于繁育,与人体解剖和生现有很高的相似性,可选择合适大小的器官和丰富且功能以好肝细胞,成为了奸种移植和生物人工肝的首选。然而,对于异种移植和生物人工肝而言,作为异种来源的猪器官、组织和细胞,其内存在猪内源性逆转求病毒(porcineendogenous retrovirus, PERV), PERV是一种Y逆转录病毒,它整合于猪的染色体中;根据诂种的不同,其PERV拷贝数和mRNA的表达贵岜有很大差异。I三I itHhf ?抑制PERV表达的猪成纤维细胞均来源子只有高PERVmRNA表达背贵的德国人白猪,经RNA干扰技术行基W沉默后,111然其表达量下降,但足山于RNAl 二扰技术存在“脱靶效应”,所以这种有PERVmRNA高表达背景的核供体细胞在-定程度上仍然ft有较高的潜在感染风险。
技术实现思路
为克服上述技术问题,我们提出了以下技术方案: ,步骤如下:将基因片段诱导至脂肪酸结合蛋白中;然后用粒子交换法重组蛋白;高纯度纯化;得到所需要的高纯度白蛋白;然后改良免疫测试;加入脱色液;脱色液中可以加入90ml超纯水,即可。 本专利技术中,所述重组蛋白,可以与单抗蛋白发生特异性反应。 本专利技术中,所述蛋白需要从抗血清中组分纯化分离出来。 本专利技术的有益效果是,实验简单,费用较低,抗体的制备为将来检测临床器官和人工肝中的PERV的表达及传播具有重要意义。【具体实施方式】 ,步骤如下:将基因片段诱导至脂肪酸结合蛋白中;然后用粒子交换法重组蛋白;高纯度纯化;得到所需要的高纯度白蛋白;然后改良免疫测试;加入脱色液;脱色液中可以加入90ml超纯水,即可,所述重组蛋白,可以与单抗蛋白发生特异性反应。 本专利技术中,所述蛋白需要从抗血清中组分纯化分离出来。 以上所述,仅为本专利技术较佳的【具体实施方式】,但本专利技术的保护范围并不局限于此,任何熟悉本
的技术人员在本专利技术披露的技术范围内,根据本专利技术的技术方案及其专利技术构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种制备内源性逆转录病毒多克隆抗体的方法,其特征在于,步骤如下:将基因片段诱导至脂肪酸结合蛋白中;然后用粒子交换法重组蛋白;高纯度纯化;得到所需要的高纯度白蛋白;然后改良免疫测试;加入脱色液;脱色液中可以加入90ml超纯水,即可。

【技术特征摘要】
1.一种制备内源性逆转录病毒多克隆抗体的方法,其特征在于,步骤如下:将基因片段诱导至脂肪酸结合蛋白中;然后用粒子交换法重组蛋白;高纯度纯化;得到所需要的高纯度白蛋白;然后改良免疫测试;加入脱色液;脱色液中可以加入90ml超纯水,即可。2...

【专利技术属性】
技术研发人员:仲集华
申请(专利权)人:仲集华
类型:发明
国别省市:

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