一种不同乙酰度的N-乙酰化壳六糖的分离纯化方法技术

本发明专利技术属于海洋化学工程技术，具体涉及一种不同乙酰度的N-乙酰化壳六糖的分离纯化方法。首先制备全脱乙酰化壳六糖为原料，将其溶于甲醇/水溶液中，加入一定量的乙酸酐室温下进行乙酰化修饰得到N-乙酰化壳六糖混合物，然后将混合物用离子交换色谱柱CM?Sephadex?C-25或CM?Sepharose?Fast?Flow以0-2M浓度的NaCl溶液在pH3-6，流速为2-5mLmin-1的条件下进行分离纯化，收集洗脱液，将洗脱组分分别经活性碳萃取脱盐后浓缩，即得到不同乙酰度N-乙酰化壳六糖，本发明专利技术以全脱乙酰化壳六糖为原料，采用离子交换色谱分离得到六种不同乙酰度的N-乙酰化壳六糖，具有流速快、分辨率高、产率高的特点，而且分离步骤少，只经过一步分离就能够得到不同乙酰度N-乙酰化壳六糖。

【技术实现步骤摘要】
—种不同乙酰度的N-乙酰化壳六糖的分离纯化方法
本专利技术属于海洋化学工程技术，具体涉及一种不同乙酰度的N-乙酰化壳六糖的分离纯化方法。
技术介绍
壳寡糖，又称低聚葡萄糖胺、低聚氨基葡萄糖，是一种由D-氨基葡萄糖和N-乙酰-D氨基葡萄糖通过β -1，4糖苷键连接而成线性寡糖。壳寡糖被发现具有多种生理活性，如抗肿瘤，抗菌，抗炎，抗氧化，调节血糖血脂，增强免疫力，活化肠道菌群等。目前，壳寡糖主要通过壳聚糖的酸解，氧化降解，或酶解三种技术得到。然而，这些技术制备的壳寡糖产物是一个非常复杂的混合物，其中含有各个分子量和各种乙酰度的壳寡糖。而大部分壳寡糖的生物活性都是采用这些混合物进行实验，这很难知道具体是哪个或哪些壳寡糖分子在生物活性试验中起作用。因此，为了进一步研究壳寡糖的生物活性，从壳寡糖混合物中分离得到带有准确脱乙酰度和窄聚合度的壳寡糖是十分必要的。壳寡糖的生理活性受其聚合度和乙酰度的影响。已有报道部分乙酰化的壳寡糖比全脱乙酰化和全乙酰化的壳寡糖能够更好的诱导植物产生抗性反应。另外，壳寡糖的乙酰度决定了其单糖序列排布，影响其与蛋白相互作用的特异性。部分乙酰化单一聚合度壳寡糖制备本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种不同乙酰度的N?乙酰化壳六糖的分离纯化方法，其特征在于：将全脱乙酰化壳六糖进行乙酰化后得到N?乙酰化壳六糖混合物，所得N?乙酰化壳六糖混合物溶解后用离子交换色谱柱以含0?2M浓度的NaCl的缓冲溶液，在pH3?6，2?5mLmin?1流速下进行分离纯化，以糖含量收集含有寡糖的不同组分的洗脱液，将不同组分的洗脱液分别经活性碳萃取脱盐后浓缩，即得到N?乙酰化壳六糖、N，N’?二乙酰化壳六糖、N，N’，N”?三乙酰化壳六糖、N，N’，N”，N”’?四乙酰化壳六糖、N，N’，N”，N”’，N””?五乙酰化壳六糖、N，N’，N”，N”’，N””，N””’?六乙酰化壳六糖。

【技术特征摘要】
1.一种不同乙酰度的N-乙酰化壳六糖的分离纯化方法，其特征在于:将全脱乙酰化壳六糖进行乙酰化后得到N-乙酰化壳六糖混合物，所得N-乙酰化壳六糖混合物溶解后用离子交换色谱柱以含0-2M浓度的NaCl的缓冲溶液，在pH3_6，2-5mLmin^流速下进行分离纯化，以糖含量收集含有寡糖的不同组分的洗脱液，将不同组分的洗脱液分别经活性碳萃取脱盐后浓缩，即得到N-乙酰化壳六糖、N, N’ - 二乙酰化壳六糖、N, N’，N” -三乙酰化壳六糖、N，N’，N”，N”，-四乙酰化壳六糖、N，N，，N”，N”，，N”” -五乙酰化壳六糖、N，N，，N”，N”，，N””，N””’ -六乙酰化壳六糖。2.按权利要求1所述的不同乙酰度的N-乙酰化壳六糖的分离纯化方法，其特征在于:所述离子交换色谱柱为 CM Sephadex C-25 或 CM Sepharose Fast Flow。3.按权利要求1所述的不同乙酰度的N-乙酰化壳六糖的分离纯化方法，其特征在于:所述N-乙酰化壳六糖、N, N’ -二乙酰化壳六糖、N, ...

【专利技术属性】
技术研发人员：李鹏程，李克成，邢荣娥，刘松，于华华，秦玉坤，
申请(专利权)人：中国科学院海洋研究所，
类型：发明
国别省市：