24‑乙酰泽泻醇F的新用途制造技术

本发明专利技术提供了24‑乙酰泽泻醇F(ALI)的新用途，所述24‑乙酰泽泻醇F能增加阿霉素(DOX)在细胞内的累积量，促进阿霉素入核，进而显著促进MCF‑7/ADR细胞(人乳腺癌‑耐阿霉素细胞)的早期凋亡，在制备抗肿瘤药物方面具有重要的药物开发价值，由24‑乙酰泽泻醇F和阿霉素制备的组合物，因24‑乙酰泽泻醇F的作用，可有效增加抗癌药阿霉素的敏感性，在提高化疗疗效的同时减小现有化疗药物的副作用。

【技术实现步骤摘要】
24-乙酰泽泻醇F的新用途
本专利技术涉及原萜烷型四环三萜类化合物的新用途，尤其是24-乙酰泽泻醇F的新用途。
技术介绍
化疗是肿瘤治疗的一种主要手段，但经常不可避免地出现肿瘤细胞耐药的现象，这是肿瘤化疗的主要障碍，也是化疗效果不佳甚至失败的主要原因。临床上许多化疗药物初次治疗肿瘤，通常可取得较好的效果，但用药一段时间后会复发，且复发后的治疗效果较差，其原因主要是肿瘤细胞对化疗药物产生了耐药性。据估计，癌症死亡病例中有90％以上存在着耐药现象。因此对肿瘤耐药性的研究与治疗方法的研究具有同等的重要性。导致肿瘤细胞耐药的因素有多种。其中肿瘤细胞表达的ATP结合盒转运蛋白[ATPbindingcassette(ABC)transporters]，如P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)，多药耐药相关蛋白1(multidrugresistantassociatedprotein1，MRP1)和乳腺癌耐药蛋白(breastcancerresistanceproteinBCRP，也被称为MXR或ABCG2)，是目前公认的导致肿瘤多药耐药的几个主要蛋白质。这些蛋白质均为跨膜蛋白质，具有“药泵”的作用，可将进入肿瘤细胞内的药物排出细胞外，使细胞内的药物浓度降低，从而避免肿瘤细胞受到抗肿瘤药的攻击。(GottesmanMM，FojoT&BatesSE.NatureReview/cancer.2:48-58,2002)。目前临床上使用的抗癌药如阿霉素、丝裂霉素、表阿霉素、柔红霉素、长春新碱、高三尖杉酯、米托蒽醌等，均是P-gp、或MRP1或BCRP的底物，所以都逃脱不了肿瘤耐药的命运。当肿瘤细胞耐药后，细胞内的P-gp、或MRP1或BCRP将会高度表达，进而产生多药耐药性(multiresistance,MDR)，即肿瘤细胞不仅仅对单一抗癌药产生耐药，而且会对多种抗癌药产生耐药，这无形中又增加了肿瘤治疗的难度。乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤，是目前威胁女性健康的常见肿瘤。临床治疗乳腺癌所面临的主要问题就是乳腺癌的多药耐药性(MDR)。要使高表达P-gp、或MRP1或BCRP的乳腺癌细胞重新获得对抗癌药的敏感性，一种治疗手段是采用联合用药的方法，通过MDR逆转剂和抗癌药的联合使用，抑制细胞外排蛋白的作用，进而增强化疗药物对乳腺癌细胞的敏感性，促进肿瘤细胞的凋亡。因此找到高效，安全的MDR逆转剂具有重要的临床意义。泽泻有明显的利尿、抑制肾结石形成、降血压、降血脂及抗动脉粥样硬化、抗脂肪肝、抗肾炎活性和调节免疫等作用。其中所含的三萜类化合物(泽泻醇)为其降血脂的活性部位，故质量评价一般均采用三萜类化合物作为其指标性成分(易醒,黄丹菲,肖小年,等.泽泻的研究现状与展望.时珍国医国药,2007,18(2):331-333)。24-乙酰泽泻醇F是从泽泻中提取出来的一个原萜烷型四环三萜类化合物，其药理活性尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于提供24-乙酰泽泻醇F的新用途，所述24-乙酰泽泻醇F能增加阿霉素在MCF-7/ADR细胞(人乳腺癌-耐阿霉素细胞)内的累积量，促进阿霉素入核，进而显著促进MCF-7/ADR细胞的早期凋亡。为解决上述技术问题，本专利技术的技术方案是：24-乙酰泽泻醇F在制备抗肿瘤药物方面的应用。优选的，24-乙酰泽泻醇F的应用，所述肿瘤为人乳腺癌。上述24-乙酰泽泻醇F的结构式如下(Ⅰ)所示，实现上述用途的药物组合物，由24-乙酰泽泻醇F和阿霉素组成，所述24-乙酰泽泻醇F和阿霉素的摩尔浓度比为0.5-2:1。优选的，上述药物组合物，所述24-乙酰泽泻醇F和阿霉素的摩尔浓度比为1:1。上述药物组合物的制备方法，具体步骤如下：(1)分别称取24-乙酰泽泻醇F和阿霉素，备用；(2)加DMSO(二甲基亚砜)溶剂使24-乙酰泽泻醇F溶解，得24-乙酰泽泻醇F母液；(3)加超纯水溶解阿霉素，得阿霉素母液；(4)取RPMI1640基培，逐级稀释24-乙酰泽泻醇F母液，得摩尔浓度为5、10、20μM的24-乙酰泽泻醇F溶液；(5)取RPMI1640基培，逐级稀释阿霉素母液，得摩尔浓度为10μM的阿霉素溶液；(6)按组方摩尔浓度比取24-乙酰泽泻醇F溶液和阿霉素溶液，混匀，即得。本专利技术的有益效果是：本专利技术所述24-乙酰泽泻醇F，是从泽泻中提取出来的原萜烷型四环三萜类化合物，能增加阿霉素在细胞内的累积量，促进阿霉素入核，进而显著促进MCF-7/ADR细胞(人乳腺癌-耐阿霉素细胞)的早期凋亡，在制备抗肿瘤药物方面具有重要的药物开发价值，由24-乙酰泽泻醇F(ALI)和阿霉素(DOX)制备的组合物，由于24-乙酰泽泻醇F的作用，可有效增加阿霉素的敏感性，在提高化疗疗效的同时减小现有化疗药物的副作用。附图说明图1是阿霉素、阿霉素联合24-乙酰泽泻醇F在MCF-7、MCF-7/ADR细胞上的IC50值(半抑制浓度)比较图；图2是阿霉素在MCF-7或MCF-7/ADR细胞中的高内涵照片(红色荧光为阿霉素，蓝色荧光为Hoechst33342)。图3是24-乙酰泽泻醇F对MCF-7/ADR细胞内阿霉素蓄积的影响图；图4是24-乙酰泽泻醇F对MCF-7细胞内阿霉素蓄积的影响图；图5是24-乙酰泽泻醇F对阿霉素进入MCF-7/ADR细胞核的影响图；图6是24-乙酰泽泻醇F对阿霉素进入MCF-7细胞核的影响图；图7是阿霉素分布在MCF-7/ADR细胞核与细胞浆的核胞比值图；图8是阿霉素分布在MCF-7细胞核与细胞浆的核胞比值图；图9是24-乙酰泽泻醇F对阿霉素诱导的MCF-7/ADR细胞早期凋亡作用的影响图。具体实施方式为了使本领域的技术人员更好的理解本专利技术的技术方案，下面结合具体实施方式对本专利技术所述技术方案作进一步的详细说明。本专利技术实施例中所述24-乙酰泽泻醇F的结构式如下(Ⅰ)所示，可以于标准品供货公司购买(如：天津一方科技有限公司)或自行制备(如：根据彭国平,楼凤昌.四川产泽泻中三萜成分的研究.天然产物研究与开发,2001,13(04):1-4，取泽泻粗粉13kg用75％的乙醇渗漉，回收乙醇至10％，得油状提取物，上硅胶柱以石油醚-乙酸乙酯(10:2,10:5,2:10)分为三部分，第一部分上硅胶柱以正己烷-乙酸乙酯(100:5)开始梯度洗脱，500ml为一个流份，每100流份递增5％乙酸乙酯，收集第276-312流份，挥干溶剂，得结晶175mg，即为24-乙酰泽泻醇F)。实施例1一种抗肿瘤药物组合物，由24-乙酰泽泻醇F和阿霉素组成，所述24-乙酰泽泻醇F和阿霉素的摩尔浓度比为1:1。上述药物组合物的制备方法，具体步骤如下：(1)分别称取24-乙酰泽泻醇F和阿霉素，备用；(2)加DMSO(二甲基亚砜)溶剂使24-乙酰泽泻醇F溶解，得24-乙酰泽泻醇F母液；(3)加超纯水溶解阿霉素，得阿霉素母液；(4)取RPMI1640基培，逐级稀释24-乙酰泽泻醇F母液，得摩尔浓度为5、10、20μM的24-乙酰泽泻醇F溶液；(5)取RPMI1640基培，逐级稀释阿霉素母液，得摩尔浓度为10μM的阿霉素溶液；(6)按组方摩尔浓度比取24-乙酰泽泻醇F溶液和阿霉素溶液，混匀，即得。实施例2一种抗肿瘤药物组合物，本文档来自技高网...

【技术保护点】
24‑乙酰泽泻醇F在制备抗肿瘤药物方面的应用。

【技术特征摘要】
1.24-乙酰泽泻醇F在制备抗人乳腺癌药物增效剂方面的用途，其特征在于：所述药物为阿霉素，24-乙酰泽泻醇F可逆转人乳腺癌细胞对阿霉素的耐药。2.实现权利要求1所述用途的药物组合物，其特征在于：由24-乙酰泽泻醇F和阿霉素组成，所述24-乙酰泽泻醇F和阿霉素的摩尔浓度比为0.5-2:1。3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于：所述24-乙酰泽泻醇F和阿霉素的摩尔浓度比为1:1。4.权利要求2所述药物组合物的制备方法，其特征在于：具体...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘桂湘，王晓明，朱彦，曾青青，刘二伟，李婷婷，
申请(专利权)人：天津中医药大学，
类型：发明
国别省市：天津;12