一种低成本纯化艾塞那肽的方法技术

技术编号:9735801 阅读:168 留言:0更新日期:2014-03-06 02:17
本发明专利技术公开了一种低成本纯化艾塞那肽的方法,采用高效液相色谱法,先用强阳离子交换柱对大批量的艾塞那肽粗品进行粗纯,除去艾塞那肽粗品中的大部分杂质,从质和量两方面为精纯提供了方便,再用反相聚合物柱进行脱盐,然后用C18反相硅胶柱进行精纯,降低了生产成本,不仅能得到纯度大于98%的艾塞那肽,而且能达到纯化艾塞那肽成本低、收率高、产业化的要求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于多肽纯化领域,具体涉及一种艾塞那肽的纯化方法。
技术介绍
1995年,美国专利(US5424286)公开了一种从南美大毒蜥(Gilka monster,Heloderma Horridum)的唾液中分离出来的一种含有39个氨基酸的多妝Exendin_4 (H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu -Ala-Val-Arg-Leu-Phe-1Ie-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-NH2),其结构与人的胰高血糖素(Glucagon)有48%的同源性,与人的GLP-1 (胰高血糖素样肽-1)有53%的同源性。研究表明,作为GLP-1的类似物,Exendin-4能够与GLP-1受体作用,通过刺激胰岛^细胞再生,促进胰岛素分泌,抑制胰高血糖素的释放,减慢胃排空速率,抑制食物摄入。其促进胰岛素分泌作用是根据血糖水平进行的,故可降低低血糖的发生率,且对其他促胰岛素分泌剂不敏感的II型本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种低成本纯化艾塞那肽的方法,其特征在于它由下述步骤组成:(1)溶样将艾塞那肽粗品溶解于质量分数为20%的醋酸水溶液中,用质量分数为15%的氢氧化钠水溶液调节pH值至3.5~4.4,超声分散,用滤膜过滤,收集滤液;(2)粗纯用离子交换高效液相色谱法对滤液进行粗纯,填料为SP高流速琼脂糖微球的强阳离子交换柱,流动相A为0.02mol/L?pH值为3.5~4.4的醋酸?醋酸钠水溶液,流动相B为含有1mol/L氯化钠的0.02mol/L?pH值为3.5~4.4的醋酸?醋酸钠水溶液,进行梯度洗脱纯化,收集粗纯后的艾塞那肽溶液,减压浓缩;(3)脱盐将步骤(2)得到的浓缩液用反相高效液相色谱法进行脱盐,填...

【技术特征摘要】
1.一种低成本纯化艾塞那肽的方法,其特征在于它由下述步骤组成: (1)溶样 将艾塞那肽粗品溶解于质量分数为20%的醋酸水溶液中,用质量分数为15%的氢氧化钠水溶液调节PH值至3.5~4.4,超声分散,用滤膜过滤,收集滤液; (2)粗纯 用离子交换高效液相色谱法对滤液进行粗纯,填料为SP高流速琼脂糖微球的强阳离子交换柱,流动相A为0.02mol/L pH值为3.5~4.4的醋酸-醋酸钠水溶液,流动相B为含有lmol/L氯化钠的0.02mol/L pH值为3.5~4.4的醋酸-醋酸钠水溶液,进行梯度洗脱纯化,收集粗纯后的艾塞那肽溶液,减压浓缩; (3)脱盐 将步骤(2)得到的浓缩液用反相高效液相色谱法进行脱盐,填料为F型SBC MCI GEI反相色谱填料的反相聚合物柱,流动相A为超纯水,流动相B为色谱级甲醇,进行梯度洗脱纯化,收集脱盐后的艾塞那肽溶液,减压浓缩; (4)精纯 将步骤(3)得到的浓缩液用反相高效液相色谱法进行精纯,填料为C18反相硅胶柱,流动相A是质量分数为0.1%的醋酸水溶液,流动相B是质量分数为0.1%的醋酸乙腈溶液,进行梯度洗脱纯化,收集精纯后的艾塞那肽溶液,减压浓缩,冷冻干燥,得到艾塞那肽...

【专利技术属性】
技术研发人员:冯凌云韩彬张腾韩广杨晓琳赵金礼
申请(专利权)人:陕西东大生化科技有限责任公司
类型:发明
国别省市:

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