植物微小核糖核酸的提取、制备及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种植物微小核糖核酸的提取、制备及其应用。具体地，本发明专利技术公开了一种分离的植物功能性microRNA或含所述植物功能性microRNA的提取物及其用途，所述的植物功能性microRNA是来源于某一植物的内源性microRNA且存在于所述植物的水溶性和/或脂溶性的提取物中，而且所述植物功能性microRNA具有调控非植物靶基因的功能。

【技术实现步骤摘要】
植物微小核糖核酸的提取、制备及其应用
本专利技术属于生物领域。具体地，本专利技术涉及提取植物HIiCT0RNA的方法及其应用。
技术介绍
微小核糖核酸(microRNA、miRNA或miR)是一类长约19至23个核苷酸的非编码单链小核糖核酸分子。它们广泛存在于动植物细胞中，在进化上高度保守。MicroRNA通过识别靶信使RNA(mRNA)的3’端非翻译序列，与之不完全互补，从而抑制相应蛋白质的翻译。作为mRNA强有力的调节因子，microRNA与生理活动密切相关，涉及生物个体发育、组织分化、细胞调亡及能量代谢等生命活动；同时，microRNA也与许多疾病的发生和发展存在紧密联系。目前，对植物microRNA研究都集中在microRNA对植物本身的调控作用，包括对植物生长发育、信号转导和逆境胁迫活动的作用。对研究成果的应用则集中于对植物物种的改良，如调节农作物在其食用部分对营养元素的表达。专利PCT/CN2010/000677公开了源自水稻的MIR164对植株根系的调控作用，提出构建包括MIR164序列的核酸片段，并将其转入水稻植株，从而获得根系比普通水稻强大的转基因水稻。专利PCT/IB2010/055600公开了上调包括MIR156的若干microRNAs可提高植物对环境胁迫因素的耐受能力，进而提高植物的生物质、活力和产量。目前，现有的研究仅限于植物HiiCT0RNA对植物本身生理活动的调控作用，但植物microRNA对动物的生理活动的调控作用以及对植物microRNA的提取还有待研究。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供一种具有调控非植物靶基因的功能的植物microRNA或含有所述microRNA的植物提提取物及其制法和用途。本专利技术的另一目的是提供一种鉴定植物功能性microRNA的方法。在本专利技术第一方面中，提供了一种分离的植物功能性microRNA或含所述植物功能性microRNA的提取物，所述的植物功能性microRNA是来源于某一植物的内源性microRNA且存在于所述植物的水溶性和/或脂溶性的提取物中，而且所述植物功能性microRNA具有调控非植物靶基因的功能。在另一优选例中，所述的调控包括抑制(下调)靶基因的表达、促进(上调)靶基因的表达。在另一优选例中，所述的非植物靶基因包括细菌基因、病毒基因、衣原体基因、酵母基因、动物基因。在另一优选例中，所述的植物包括:药用植物、果蔬植物、观赏植物；更佳地包括:金银花、菘蓝、草大青、马蓝、胡杨、豇豆、棉花、大白菜或马铃薯。优选地，所述植物为金银花、菘蓝、草大青、马蓝或胡杨；更优选地，所述植物为金银花。在另一优选例中，所述的植物功能性microRNA是所述植物的水溶性和/或脂溶性的提取物中富含的microRNA种类(如丰度列前20位，更佳地前10位的microRNA种类)。在另一优选例中，所述的植物功能性microRNA包括选自下组的一种或多种:MIR156h、MIR166f、MIR396a、MIR166a、MIR168a、MIR1440, MIR2910、MIR2911、MIR2915、MIR2916、MIR818d、MIR159e、MIR159c、MIRl56 j\ MIR1432、MIR166k、MIR167b、MIR396c、MIR156e、MIR169k、MIR167c、MIR160d、MIR399a、MIR156d、MIR160e、MIR169n、MIR1661、MIR159f、MIR166c、MIR159b、MIR166j、MIR1671、MIR169c、MIR164c、MIR167j、MIR167g、MIR160c、MIR399e、MIR399b、MIR529b、MIR164e、MIR166d、MIR166h、MIR164b、MIR156f、MIR164a、MIR1691、MIR166m、MIR164f、MIR156k、MIR166g、MIR166b、MIR160b、MIR166e、MIR159d、MIR818e、MIR172a、MIR156b、MIR399g、MIR169b、MIR399f、MIR167a、MIR394、MIR156a、MIR1661、MIR167f、MIR319a、MIR156g、MIR166n、MIR399c、MIR160a、MIR159a.1、MIR156c、MIR319b、MIR169o、MIR167h、MIR1561、MIR167d、MIR169a、MIR172d、MIR818b、MIR164d、MIR167e、MIR396b、MIR2914(表 I)。在另一优选例中，所述的植物提取物包括植物的水溶性和/或脂溶性的提取物。在另一优选例中，所述的植物提取物包括植物的枝、叶、根、花、果和/或茎的提取物。在本专利技术第二方面中，提供了一种如本专利技术第一方面所述的分离的植物功能性mi croRNA或含所述植物功能性mi croRNA的提取物的用途,它(a)用于制备调控非植物革巴基因的组合物；或(b)用于制备治疗非植物靶基因相关疾病的药物。在另一优选例中 ，所述非植物靶基因包括细菌基因、病毒基因、衣原体基因、酵母基因、动物基因。在另一优选例中，所述的非植物靶基因是病原体(包括细菌、病毒、衣原体等)的基因。在另一优选例中，所述非植物靶基因相关疾病包括:肿瘤(如肝癌、肺癌);急慢性传染病(如病毒性流感、病毒性肝炎、艾滋病、SARS等的病毒性疾病，如结核、细菌性肺炎等的细菌性疾病，以及病原微生物导致的急慢性传染病)；其它急慢性疾病(如呼吸系统疾病、免疫系统疾病、血液与造血系统疾病、如心脑血管疾病的循环系统疾病、内分泌系统代谢性疾病、消化系统疾病、神经系统疾病、泌尿系统疾病、生殖系统疾病和运动系统疾病)。[0021 ] 在另一优选例中，所述的植物功能性microRNA包括MIR2911。更佳地，所述的药物用于治疗病毒性感冒。在本专利技术第三方面中，提供了一种组合物，其包含(a)药学上可接受的载体或食品学上可接受的载体以及(b)本专利技术第一方面所述的植物功能性microRNA和/或含所述植物功能性microRNA的植物提取物。在另一优选例中，所述的组合物由或基本上由组分(a)和(b)构成。在另一优选例中，组分(b)的含量为组合物总重量0.01_99wt%，较佳地0.l-90wt% (按 microRNA 计)。在另一优选例中，所述组合物包括药物组合物、食品组合物或保健品组合物。在另一优选例中，所述组合物的制备方法包括步骤:将所述的植物功能性microRNA或含所述功能性microRNA的植物提取物与药学上或食品学上可接受的载体混合，从而形成所述的组合物。在另一优选例中，所述的植物功能性microRNA来自以下植物:药用植物、果蔬植物、观赏植物，并且调控选自下组的非植物靶基因:细菌基因、病毒基因、衣原体基因、酵母基因、动物基因。在另一优选例中,所述的植物功能性microRNA来自金银花、蒋蓝、草大青、马蓝或胡杨。更佳地，植物功能性microRNA包括MIR2911。在本专利技术第四方面中，提供了一种体外非治疗性调控非植物靶基因表达的方法，其中，非植物靶基因包括细菌基因、病毒基因、衣原体基因、酵母基因、动物基因，所述方法包括步骤本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的植物功能性microRNA或含所述植物功能性microRNA的提取物，其特征在于，所述的植物功能性microRNA是来源于某一植物的内源性microRNA且存在于所述植物的水溶性和/或脂溶性的提取物中，而且所述植物功能性microRNA具有调控非植物靶基因的功能。

【技术特征摘要】
1.一种分离的植物功能性microRNA或含所述植物功能性microRNA的提取物,其特征在于，所述的植物功能性microRNA是来源于某一植物的内源性microRNA且存在于所述植物的水溶性和/或脂溶性的提取物中，而且所述植物功能性microRNA具有调控非植物靶基因的功能。2.如权利要求1所述的植物功能性microRNA或含所述植物功能性microRNA的提取物，其特征在于，所述的非植物靶基因包括细菌基因、病毒基因、衣原体基因、酵母基因、动物基因。3.如权利要求1所述的植物功能性microRNA或含所述植物功能性microRNA的提取物，其特征在于，所述的植物包括:药用植物、果蔬植物、观赏植物。4.如权利要求1所述的植物功能性microRNA或含所述植物功能性mi croRNA的提取物，其特征在于，所述的植物功能性microRNA包括选自下组的一种或多种:MIR156h、MIR166f、MIR396a、MIR166a、MIR168a、MIR1440、MIR2910、MIR2911、MIR2915、MIR2916、MIR818d、MIR159e、MIR159c、MIR156j、MIR1432、MIR166k、MIR167b、MIR396c、MIR156e、MIR169k、MIR167c、MIR160d、MIR399a、MIR156d、MIR160e、MIR169n、MIR1661、MIR159f、MIR166c、MIR159b、MIR166j、MIR1671、MIR169c、MIR164c、MIR167j、MIR167g、MIR160c、MIR399e、MIR399b、MIR529b、MIR164e、MIR166d、MIR166h、MIR164b、MIR156f、MIR164a、MIR1691、MIR166m、MIR164f、MIR156k、MIR166g、MIR 166b、MIR160b、MIR166e、MIR159d、MIR818e、MIR172a、MIR156b、MIR399g、MIR169b、MIR399f、MIR167a、MIR394、MIR156a、MIR1661、MIR167f、MIR319a、MIR156g、MIR166n、MIR...

【专利技术属性】
技术研发人员：张辰宇，张峻峰，曾科，董磊，
申请(专利权)人：北京命码生科科技有限公司，
类型：发明
国别省市：