疏水性经修饰肽及其在肝特异性靶向中的用途制造技术

本发明专利技术涉及疏水性经修饰肽，其用于在体外以及在体内将化合物特异性地递送至肝优选地至肝细胞。本发明专利技术涉及包含所述疏水性经修饰肽和待特异性地递送至肝的化合物的药物组合物。本发明专利技术还涉及本发明专利技术的疏水性经修饰肽用于预防和/或治疗肝疾病或病症的用途和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】疏水性经修饰肽及其在肝特异性靶向中的用途本专利技术涉及衍生自乙肝病毒(HBV)的preS-结构域的疏水性经修饰肽，其为用于在体外和在体内将化合物特异性地递送至肝(优选地至肝细胞)的通用载体。任何种类的化合物(特别是药物)可特异性地靶向至肝，并且因此在肝中富集。此肝脏靶向可进一步用于靶向预防和/或治疗肝疾病或病症，例如肝炎、疟疾、肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)，以及用于预防HAV、HBV、HCV和/或HDV感染。本专利技术涉及包含所述疏水性经修饰肽和所述待特异性地递送至肝的化合物的药物组合物。本专利技术还涉及本专利技术的疏水性经修饰肽在预防和/或治疗肝疾病或病症中的用途；用于预防和/或治疗肝疾病或病症的方法；以及该疏水性经修饰肽在制备用于预防和/或治疗肝疾病或病症的药物中的用途。
技术介绍
肝是存在于脊椎动物和另一些动物中的器官，它在代谢中扮演着重要角色，并且在机体中具有许多功能，包括糖原贮积、红细胞分解、血浆蛋白合成和解毒。肝也是人体内最大的腺体。它位于腹胸部中的隔膜的下方。肝产生胆汁，一种通过脂质的乳化作用来辅助消化的碱性化合物。肝还进行和调节需要特定组织的多种多样的高容量生化反应。肝细胞占肝脏细胞质量的70％至80％。肝细胞参与蛋白质合成、蛋白质贮积和碳水化合物转化、胆固醇、胆盐和磷脂的合成、以及外源性物质和内源性物质的解毒、修饰和排泄。肝细胞还启动胆汁的形成和分泌。存在多种多样的已知肝疾病，例如：-肝炎：肝的炎症，主要由多种病毒引起，还由某些毒物、自身免疫性病症或遗传性病症引起；-肝硬化：肝中形成纤维化组织，代替死亡的肝细胞。肝细胞的死亡可例如由病毒性肝炎、酒精中毒或与其它肝毒性化学品接触引起；-血色素沉着病：引起铁在机体中累积的遗传性疾病，最终导致肝损伤；-肝的癌症：原发性肝细胞癌(HCC)或胆管癌和转移性癌，通常源自胃肠道的其它部分；-威尔逊氏病(Wilson′sdisease)：引起机体保留铜的遗传性疾病；-原发性硬化性胆管炎：胆管的炎性疾病，在本质上是自身免疫性的；-原发性buildup胆汁性肝硬化：小胆管的自身免疫性疾病；-巴德-基亚里综合征(Budd-Chiarisyndrome)：肝静脉的阻塞；-吉尔伯综合征(Gilbert′ssyndrome)：胆红素代谢的遗传性病症，见于约5％的人群中；-糖原贮积疾病II型：糖原的累积(bulid-up)引起机体周身的进行性肌无力(肌病)并且影响多种机体组织，特别是心脏、骨骼肌、肝和神经系统。还存在许多小儿科肝疾病，例如胆管闭锁、α-1-抗胰蛋白酶缺乏症、阿拉日耶综合征(alagillesyndrome)、和进行性家族性肝内胆汁淤积症；以及代谢疾病。此外，若干病原体和寄生虫(尤其是热带疾病)在它们的生活周期过程中具有肝阶段。例如，疟疾是最常见的感染性疾病之一并且是很大的公共卫生问题。疟疾是由疟原虫属(Plasmodium)的原生动物寄生虫引起的。该疾病最严重的形式是由恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)和间日疟原虫(Plasmodiumvivax)引起的，但其它相关物种(卵形疟原虫(Plasmodiumovale)、三日疟原虫(Plasmodiummalariae)以及有时诺氏疟原虫(Plasmodiumknowlesi))也可感染人。该组的人-病原性疟原虫属物种通常被称为疟疾寄生虫。疟疾寄生虫由雌性按蚊(Anophelesmosquitoes)传播。人的疟疾通过两期产生：红细胞外期(肝期或“肝阶段”)和红细胞内期。当受感染蚊子刺穿人的皮肤取血为食时，蚊子唾液中的子孢子进入血流并迁移到肝。在被引入人宿主中约30分钟内，这些子孢子感染肝细胞，无性地并且无症状地扩增6至15天的时间。一旦这些有机体在肝中分化产生数千个裂殖子，裂殖子在其宿主细胞破裂之后逸入血液中并感染红细胞，则生活周期的红细胞内阶段开始。寄生虫通过将其自身包裹在受感染宿主肝细胞的细胞膜中离开肝而不被发现。寄生虫相对地受到保护免受机体免疫系统攻击是因为，就大部分其人生活周期而言，寄生虫驻留在肝和血液细胞内并且对免疫监督来说是相对不可见的(invisible)。越来越关注开发特别地解决疟疾寄生虫的肝特异性阶段的药物(例如，伯氨喹(primaquine)、旋转酶抑制剂例如左氧氟沙星(levofloxacin)、多柔比星(doxorubicin))以避免血液阶段的发生。另一实例是血吸虫病或裂体吸虫病(bilharziosis)，其为由若干物种的扁形虫引起的寄生性疾病。虽然血吸虫病具有低死亡率，但其可使人非常衰弱(debilitating)。血吸虫病通常是由寄生性扁形虫(血吸虫)感染血液引起的慢性疾病。其引起衰弱并且引起肝和肠损伤。血吸虫病最常见于亚洲、非洲和南美洲，尤其是水被淡水螺(其包含寄生虫)污染的地区。乙肝病毒(HBV)是乙肝的原因，它是哺乳动物和鸟类的小的包膜DNA病毒家族的原型(1)。HBV包膜包绕(enclose)3种蛋白质，称为L-(大)、M-(中)和S-(小)(参见图1)。它们共有具有四个跨膜区的C端S结构域。M-蛋白和L-蛋白携带额外的55个和(基因型依赖性的)107或118个氨基酸(aa)的N端延伸(preS2-和preS1)。在病毒体中，L、M和S的化学计量比为约1∶1∶4，但更大量地分泌的非感染性亚病毒颗粒(SVP)几乎只包含S-蛋白和仅痕量的L-蛋白(2)。在合成过程中，L的preS1结构域被十四酰化，并且在HBV生活周期的一些点转运通过ER-衍生的膜。该修饰对于感染性而言是必要的(3，4)。HBV的一个显著特征是其肝趋向性，即，肝是特异性地支持HBV生长的组织。理想地，药物靶向应满足以下标准：1)药物只向所需作用位点转移；2)对其余有机体的影响最小；3)使用药理学无活性载体。为了携带药物(即，治疗活性剂)至特定组织，研究了不同的策略。例如，使用前药，通过组织特异性酶在靶组织中从前药释放药理活性部分。另一个可能性是使有效的非组织特异性药物与组织特异性的但药理学惰性的载体系统(例如受体-亲和肽或胶体颗粒)相偶联。多种药物载体已被用于增强药物的肝靶向。一种直接的方法基于肝中网状内皮系统的活性吞噬作用来递送特定载体(例如，脂质体和微球体)中的药物。例如，已示出，i.v.(静脉内)注射之后，合并有药物的颗粒状载体主要被肝中的网状内皮系统捕获，导致药物靶向肝(5)。在另一方面，具有带正电的水溶性聚合物的药物的肝靶向基于多数水溶性物质从肝的血管系统自由溢出以及基于肝细胞表面的负电荷(6)。因此，基于肝的这样的解剖学特征和生物化学特征，已使用聚合物作为载体来使药物靶向肝。已通过使用肝细胞的脱唾液酸糖蛋白受体来尝试更特异性的肝脏药物靶向。脱唾液酸糖蛋白受体(半乳糖受体)以高密度存在于肝细胞上。另外，一旦配体与半乳糖受体结合，则配体-受体复合物内化，使得细胞摄取半乳糖基化配体(7)。还通过例如两性聚合物和病毒载体使用纳米颗粒进行了其它递送方法(8)。还通过使用生物纳米胶囊(bio-nanocapsule，BNC)进行了药物和遗传物质的递送。BNC被描述为“由通过生物技术所产生的蛋白质组成的纳米级胶囊”，并且BNC可被用作器官特异性药物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.02.10 US 61/441,4921.式[X-P-Y-Ro]Ap的疏水性经修饰肽，其中：P是具有氨基酸序列NPLGFFP的肽；X是(K)1-3NLSTS，其中K表示赖氨酸，所述赖氨酸中的一个或更多个携带一个或更多个通过酰化实现的疏水性修饰，所述酰化选自使用肉豆蔻酰基(C14)、棕榈酰基(C16)或硬脂酰基(C18)的酰化；Y是DHQLDP或DHQLPD；R是所述疏水性经修饰肽的C端修饰，o为0或至少为1，A是锚定基团，p为0或至少为1，其中一种或更多种化合物与X的一个或更多个赖氨酸相偶联或连接。2.根据权利要求1所述的疏水性经修饰肽，其中所述C端修饰选自以下的保护免受降解的部分：酰胺、D-氨基酸、经修饰氨基酸、环氨基酸、白蛋白、天然聚合物和合成聚合物。3.根据权利要求1所述的疏水性经修饰肽，其中所述C端修饰为以下保护免受降解的部分：聚糖。4.根据权利要求1所述的疏水性经修饰肽，其中所述锚定基团选自：酯、醚、二硫化物、酰胺、硫醇、硫酯。5.根据权利要求2所述的疏水性经修饰肽，其中所述合成聚合物为PEG。6.根据权利要求1所述的疏水性经修饰肽，其中所述一种或更多种化合物通过接头或间隔子与所述赖氨酸相连接。7.根据权利要求6所述的疏水性经修饰肽，其中通过肝蛋白将所述接头或间隔子从所述疏水性经修饰肽上切下。8.根据权利要求7所述的疏水性经修饰肽，其中通过选自以下的酶切割所述接头或间隔子：细胞色素；内吞途径的蛋白酶和裂合酶；基质金属蛋白酶MMP1、MMP2、MMP7、MMP9和MMP12。9.根据权利要求8所述的疏水性经修饰肽，其中所述细胞色素为细胞色素P450。10.根据权利要求8所述的疏水性经修饰肽，其中所述接头或间隔子包含肽序列GCHAK(SEQIDNO：19)或RPLALWRS(SEQIDNO：20)。11.根据权利要求1所述的疏水性经修饰肽，其中通过使用活化酯将所述化合物与所述赖氨酸相偶联。12.根据权利要求1所述的疏水性经修饰肽，其中通过使用选自以下的一种或更多种方法将所述化合物与所述赖氨酸相偶联：-通过胺与选自NHS-酯或碳二亚胺之活化羧酸的反应形成酰胺；-使用两个巯基或特异性地与吡啶基二硫化物反应的一个巯基的二硫键连接；-使用马来酰亚胺或卤乙酰和巯基组分形成硫醚；-使用酰亚胺酯和胺形成脒；-使用羰基和酰肼的酰肼连接；-在还原条件下使用羰基和胺的胺连接；-使用腈和叠氮化物形成三唑；-使用异硫氰酸酯和胺形成硫脲；-通过醇与选自酰氯或碳二亚胺之活化羧酸的反应形成酯；-通过醇与烷基卤化物反应形成醚。13.根据权利要求12所述的疏水性经修饰肽，其中在使用羰基和酰肼的酰肼连接的方法中，所述羰基为醛。14.根据权利要求1所述的疏水性经修饰肽，其中所述疏水性修饰是通过使用肉豆蔻酰基(C14)酰化。15.根据权利要求1所述的疏水性经修饰肽，其中所述疏水性修饰是通过使用硬脂酰基(C18)酰化。16.根据权利要求1所述的疏水性经修饰肽，其中所述一种或更多种化合物是一种或更多种药物或者两种或更多种药物的组合。17.根据权利要求16所述的疏水性经修饰肽，其中所述药物选自以下：放射性分子或同位素选自18F、51Cr、67Ga、68Ga、111In、99mTc；烷化剂选自顺铂、奥沙利铂；抗代谢物硫唑嘌呤；抗肿瘤剂选自博来霉素、放线菌素；蒽环类选自多柔比星、表柔比星；抗叶酸剂氨甲蝶呤；抗病毒剂选自利巴韦林、替诺福韦；细胞骨架破坏药选自长春碱、紫杉醇；细胞因子选自干扰素-α、干扰素β；趋化因子选自CCL1、CXC1；siRNA选自CALAA-01、SIRNA-034；miRNAmiR-26a；寡核苷酸和核酸选自质粒、短dsDNA、短ssDNA；核受体激动剂和拮抗剂，其为米非司酮；埃博霉素选自帕土匹隆、伊沙匹隆；激素选自孕激素、氟甲睾酮；激素拮抗剂选自托瑞米芬、氟维司群；免疫抑制剂选自雷帕霉素、环孢素A；免疫调节剂来那度胺；免疫刺激剂选自SDC101、ITMN-191；免疫刺激序列TLR激动剂；激酶抑制剂选自索拉非尼、伊马替尼、厄洛替尼；蛋白酶抑制剂选自波西普韦、特拉普韦；聚合酶抑制剂选自MK-0608、R7128；拓扑异构酶抑制剂选自伊立替康、拓扑替康；核苷类似物选自替比夫定、恩替卡韦；前体类似物氟尿嘧啶；肽和肽抗生素防御素1；抗生素选自阿奇霉素、克林霉素、利福平；氟喹诺酮类的旋转酶抑制剂左氧氟沙星；基于铂的制剂选自卡铂、顺铂；类视黄醇选自他扎罗汀、贝沙罗汀；长春花生物碱选自长春西汀、长春瑞滨；细胞毒性剂和细胞生长抑制剂，其为核糖体失活蛋白质；维生素B6；α-链毒素白喉毒素；蛇毒毒素及其组分，其为眼镜蛇毒素；真菌衍生物质曲霉素；细菌外毒素假单胞菌外毒素；细菌性肠毒素霍乱毒素；细菌内毒素脂多糖；抗体选自贝伐单抗、西妥昔单抗；和/或阳离子两亲性药物(CAD)选自丙氯拉嗪、氟奋乃静、三氟吩嗪。18.根据权利要求17所述的疏水性经修饰肽，其中所述核糖体失活蛋白质选自α-八叠球菌毒素、局限曲菌素。19.根据权利要求16所述的疏水性经修饰肽，其中所述药物选自：氨苯砜、博来霉素、放线菌素D、丝裂霉素、柔红霉素、多柔比星、环孢素A、替诺福韦、拉米夫定、阿德福韦、恩替卡韦、利巴韦林、特拉匹韦、表柔比星、伊达比星、米托蒽醌、胺苯吖啶、去氧氟尿苷、顺铂、卡铂、奥沙利铂、赛特铂、喜树碱、拓扑替康、伊立替康、安吖啶、依托泊苷、替尼泊苷、环磷酰胺、异环磷酰胺、氯乙环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、雌二醇氮芥、白消安、氮芥、苏消安、卡莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、链脲霉素、丙卡巴肼、达卡巴嗪、替莫唑胺、噻替哌、长春瑞滨、长春新碱、长春碱、长春地辛、紫杉醇、多西紫杉醇、甲氨蝶呤、培美曲塞、雷替曲塞、氟尿嘧啶、卡培他滨、胞嘧啶-阿糖胞苷、吉西他滨、硫鸟嘌呤、喷司他丁、硫唑嘌呤、巯嘌呤、氟达拉滨、克拉屈滨、羟基脲、米托坦、阿扎胞苷、阿糖胞苷、吉西他滨、奈拉滨、硼替佐米、阿那格雷、伊马替尼、厄洛替尼、舒尼替尼、索拉非尼、达沙替尼、拉帕替尼或尼洛替尼、MK886、苯噻啶、托瑞米芬、SDC-101、ITMN-191、RG7227、硝唑尼特、VX-950、VX-222、BMS-790052、BMS-650032、GS9190、GS9256、BI201335、BI207127、IDX184、R7128、波西普韦、MK-7009、SIRNA-0...

【专利技术属性】
技术研发人员：沃尔特·迈尔，斯特凡·乌尔班，斯特凡·梅勒，乌韦·哈伯科恩，
申请(专利权)人：海德堡鲁普雷希特卡尔斯大学，
类型：
国别省市：