前列腺癌标志物SPINK1及其应用制造技术

本发明专利技术提供用于癌症研究、癌症诊断和癌症治疗的组合物和方法，包括（但不限于）癌症标志物。特别地，本发明专利技术提供前列腺癌的S?PINK1标志物和其他标志物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术提供用于癌症研究、癌症诊断和癌症治疗的组合物和方法，包括(但不限于)提供癌症标志物。尤其，本专利技术提供前列腺癌的SPINKl标志物和其他标志物。
技术介绍
前列腺癌是美国男性最常见的非皮肤性癌症，并且是患癌症死亡的第二大原因。在过去15年，已记入美国和英国的癌症登记库的前列腺癌的数目显著增长。该变化主要表明被确诊癌症的数目增长而非患癌人数的实际增长。在2006年，大概出现234，460名新增病例以及27，350个死亡病例。经判定，这些新增病例中大约91%的患者被确诊为处于局部化或局部扩散期(local or regional stages)。前列腺癌(PCa)的经典诊断方式是直肠指诊检测和/或前列腺特异性抗原(PSA)筛选。血清PSA水平的增高可能标志着PCa的存在。因为PSA只能由前列腺细胞分泌，所以PSA被用作前列腺癌的标志物。健康的前列腺产生的PSA量稳定，一般在4ng/mL以下(或PSA读数少于等于4)，而癌细胞产生的PSA量随着癌症严重程度的增加而增加。水平在4-10之间可引起医生怀疑病人有前列腺癌，而高于50的量可能意味着肿瘤已经扩散到身体其他部位。 当PSA或直肠指诊检测显示极为可能存在癌症时，将用直肠超声(TRUS)法来定位前列腺并显示任何可疑区域。使用前列腺各个部位的活组织检查来确定前列腺癌是否存在。治疗的选择取决于癌症分期。预期寿命为10年或10年以内、Gleason评分较低、肿瘤还未扩散到前列腺以外的患者常常采取观察等待法(不治疗)。对更具侵袭性的癌症治疗的选择包括:手术治疗法，如根治性前列腺切除术(RP)，其中前列腺完全切除(使用或不使用神经保留术)；和放射治疗法，其通过外粒子束从体外将剂量导向前列腺或者通过在前列腺中植入低剂量的放射性粒子杀死局部的癌细胞。也单独或联合手术治疗法或放射治疗法使用激素疗法。激素疗法应用黄体生成素释放激素(LH-RH)类似物来阻断垂体生成促进睾丸激素生成的激素。病人的余生都必须注射LH-RH类似物。虽然手术或激素治疗通常对局部PCa有效，但晚期疾病仍然基本上无法治愈。雄激素切除法是晚期PCa最常用的治疗方式，这导致大量的雄激素依赖性恶性细胞发生凋亡，肿瘤暂时消退。然而在大多数情况下，肿瘤发生猛烈地复发并能产生不依赖雄激素信号的增殖。PSA筛选法的出现使得可以更早地检测出PCa，明显降低了 PCa相关的死亡率。PSA筛选法目前是前列腺癌唯一最好的检测方法，广泛应用于前列腺癌的诊断，但是它无法帮助确认检测出的癌症是否将引起具有临床意义的疾病。尽管PSA对已经确诊前列腺癌的随诊患者是很好的标志物，然而一些前列腺癌患者的PSA水平可能是正常的。PAS水平中度升高(4-10ng/mL)对前列腺癌具有低特异性，且PSA水平的升高并非前列腺癌所特有。高血清PSA水平也可能与前列腺炎、前列腺梗塞、PIN、前列腺活组织检查、经尿道前列腺切除术和尿道导管插入有关。由于PSA筛选法的局限性，人们通过使用一些衍生指标(如PSA密度、年龄相关的PSA水平、TZ - PSA密度、PSA速率、游离PSA水平、复合PSA(cPSA)测定值和游离PSA与总PSA的比率)来努力提高其诊断特异性。游离PSA与总PSA的比率计量结合PSA和游离PSA在总PSA中所占百分比，其是癌症和良性肿瘤病理学又一有用的鉴定指标，特别是PSA水平中度升高(4-10ng/mL)的患者的鉴定。这个比率对确认PSA中度升高的患者在初始系统活组织检查的结果为阴性的情况下重复作活组织检查是否适合也很有用。游离PSA的百分比越低，癌症的可能性越高。因此，研究开发血清和组织中其他生物标志物来补充PSA筛选法是必要的。
技术实现思路
本专利技术提供了一种鉴定患者体内的前列腺癌的方法，包括:提供取自患者的包含前列腺细胞的样品；在包含前列腺细胞的样品内检测相较于SPINKl的正常表达的SPINKl的过度表达；以及在包含前列腺细胞的样品内检测ERG和/或ETVl的正常表达，其中，在包含前列腺细胞的样品内检测与ERG和/或ETVl的正常表达相比互斥的SPINKl的过度表达，从而鉴定患者体内的前列腺癌。在一些实施方案中，检测步骤包括检测SPINKl RNA的过度表达。在其他实施方案中，检测步骤包括检测SPINKl蛋白的过度表达。在一些实施方案中，包含前列腺细胞的样品是前列腺组织、血液、尿液、精液、前列腺分泌物或者分离的前列腺细胞。在一些实施方案中，在包含前列腺细胞的样品内检测SPINKl的过度表达来鉴定患者体内的侵入性前 列腺癌。在一些实施方案中，包含前列腺细胞的样品取自进行根治性前列腺切除术后的患者，并且SPINKl的过度表达鉴定前列腺癌在进行根治性前列腺切除术后的患者体内复发。本专利技术进一步提供了一种鉴定患者体内的前列腺癌的方法，包括:提供取自患者的包含前列腺细胞的样品；以及在包含前列腺细胞的样品内检测:(a)、相较于SPINKl的正常表达的SPINKl的过度表达和相较于PCA3的正常表达的PCA3的过度表达；(b)、相较于SPINKl的正常表达的SPINKl的过度表达和相较于G0LPH2的正常表达的G0LPH2的过度表达；(c)、相较于SPINKl的正常表达的SPINKl的过度表达和TMPRSS2:ERG的存在；⑷相较于SPINKl的正常表达的SPINKl的过度表达、相较于PCA3的正常表达的PCA3的过度表达和相较于G0LPH2的正常表达的G0LPH2的过度表达；(e)、相较于SPINKl的正常表达的SPINKl的过度表达、相较于PCA3的正常表达的PCA3的过度表达和TMPRSS2:ERG的存在；(f)、相较于SPINKl的正常表达的SPINKl的过度表达、相较于G0LPH2的正常表达的G0LPH2的过度表达和TMPRSS2:ERG的存在；或(g)、相较于SPINKl的正常表达的SPINKl的过度表达、相较于PCA3的正常表达的PCA3的过度表达、相较于G0LPH2的正常表达的G0LPH2的过度表达和TMPRSS2:ERG的存在，其中，在包含前列腺细胞的样品内检测SPINKl的过度表达来鉴定患者体内的前列腺癌。在一些实施方案中，检测步骤包括检测SPINKl RNA的过度表达。在其他实施方案中，检测步骤括检测SPINKl蛋白的过度表达。在一些实施方案中，包含前列腺细胞的样品是前列腺组织、血液、尿液、精液、前列腺分泌物或者分离的前列腺细胞。另外，本专利技术提供一种组合物，包括以下中的至少一项:(a)包含与SPINKl RNA或cDNA特异地杂交的序列的第一寡核苷酸探针、包含与ERG RNA或cDNA特异地杂交的序列的第二寡核苷酸探针、和包含与ETVl RNA或cDNA特异地杂交的序列的第三寡核苷酸探针；(b)第一对扩增性寡核苷酸，其中在第一对扩增性寡核苷酸中每个扩增性寡核苷酸均包含与SPINKl RNA或cDNA特异地杂交的序列，第二对扩增性寡核苷酸，其中在第二扩增性寡核苷酸对中每个扩增寡核苷酸均包含与ERG RNA或cDNA特异地杂交的序列，和第三对扩增性寡核苷酸，其中每个扩增性寡核苷酸均包含与ETVl RNA或cDNA特异地杂交的序列；或(c)与SPINKl蛋白特异地结合的第一抗体、与ERG蛋白特异地结合的第二本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种试剂组合在生产用于鉴定或表征受试者体内的前列腺癌的组合物中的应用，该试剂组合包括：(1)特异性地检测SPINK1的存在的标记的试剂；(2)特异性地检测PCA3的存在的标记的试剂；(3)特异性地检测GOLPH2的存在的标记的试剂；以及(4)特异性地检测TMPRSS2:ERG的存在的标记的试剂，其中，该组合物用于在取自所述受试者的生物样品中检测相较于正常样品中的SPINK1的正常表达水平的SPINK1的过度表达；并且检测(a)相较于PCA3的正常表达的PCA3的过度表达；(b)相较于GOLPH2的正常表达的GOLPH2的过度表达；(c)TMPRSS2:ERG的存在；(d)相较于PCA3的正常表达的PCA3的过度表达和相较于GOLPH2的正常表达的GOLPH2的过度表达；(e)相较于PCA3的正常表达的PCA3的过度表达以及TMPRSS2:ERG的存在；(f)相较于GOLPH2的正常表达的GOLPH2的过度表达以及TMPRSS2:ERG的存在；或者(g)相较于PCA3的正常表达的PCA3的过度表达，相较于GOLPH2的正常表达的GOLPH2的过度表达以及TMPRSS2:ERG的存在，从而鉴定或者表征所述受试者体内的前列腺癌。...

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：阿鲁·M·钦耐扬，斯科特·A·汤姆林斯，丹尼尔·R·罗兹，罗希特·梅拉，
申请(专利权)人：密歇根大学董事会，
类型：发明
国别省市：