杂交瘤细胞株1H2、其产生的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体及其应用制造技术

本发明专利技术提供了杂交瘤细胞株1H2、其产生的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体及其在免疫层析时中应用。杂交瘤细胞株1H2，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC?NO.C201329。杂交瘤细胞株1H2可以用于制备高效价抗赭曲霉毒素A单克隆抗体，采用鼠腹水抗体酶联免疫吸附分析(ELISA)法测得的效价可达7.2×105。该抗赭曲霉毒素A单克隆抗体灵敏度高，对赭曲霉毒素A的50％抑制浓度IC50为52pg/mL，与赭曲霉毒素B，黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2，呕吐毒素，玉米赤霉烯酮，伏马毒素的交叉反应率均小于0.1％，可用于赭曲霉毒素A含量的快速测定。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及杂交瘤细胞株1H2、其产生的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体及其应用。
技术介绍
赭曲霉毒素包括7种结构类似的化合物，是由多种生长在粮食(小麦、玉米、大麦、燕麦、黑麦、大米和黍类等)、花生、蔬菜(豆类)等农作物上的曲霉和青霉产生的。其中赭曲霉毒素A(OTA)的毒性最大，在霉变谷物、饲料等中最常见。OTA主要经胃肠道吸收，在人体血液中半衰期长达840h，有很强的肝毒性和肾毒性，是引起巴尔干肾炎的主要原因，除此，其还具有致畸和致癌作用，与上尿路肿瘤发生率的增加密切相关。鉴于OTA的肾脏毒性、肝脏毒性、免疫毒性和致畸性，其被世界卫生组织定为2B类可疑人类致癌物。且OTA有很高的化学稳定性和热稳定性，因此OTA污染问题引起了世界各国的广泛关注。为此，很多组织都对食品及饲料中的OTA含量进行了严格限定，如欧盟规定谷类等食品中OTA最高浓度为5y g/kg，国际粮农组织/世界卫生组织联合食品添加剂委员会暂定人每日对OTA最大耐受量为0.17ng/(kg.d)。而我国又属于小农户分散型的种植模式，因此鉴于OTA的广泛发生性，加强对食品及农产品中OTA的检测尤其是快速检测，对保障我国食品安全本文档来自技高网...

【技术保护点】
杂交瘤细胞株1H2，其特征在于：它保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC?NO.C201329。

【技术特征摘要】
1.杂交瘤细胞株1H2，其特征在于:它保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC N0.C201329。2.抗赭曲霉毒素A单克隆抗体，其特征在于:它由保藏编号为CCTCCN0.C201329的杂交瘤细胞株1H2分泌产生。3.权利要求2所述的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体在赭曲霉毒素A含量测定中的应用。4.根据权利要求2所述的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的制备方法，其特征在于:将权利要求I所述的杂交瘤细胞株1H2注射预先用福氏不完全佐剂处理过的BALB/c小鼠，收集该小鼠的腹水，纯化即得抗赭曲霉毒素A单克隆抗体。5.根据权利要求4所述的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的制备方法，其特征在于:所述的纯化方法为辛酸-硫酸铵法，具体步骤为:用双层滤纸过滤小鼠腹水，4°C，12000r/min离心15min以上，吸取上清，将所得腹水上清与4倍体积的醋酸盐缓冲液混合，搅拌下缓慢加入正辛酸，每毫升腹水所需的正辛酸体积为30 35 μ L，室温混合30 60min，4°C静置2h以上，然后4°C，12000r/min离心30min以上，弃沉淀，将得到的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李培武，李鑫，张奇，何婷，丁小霞，张文，李冉，
申请(专利权)人：中国农业科学院油料作物研究所，
类型：发明
国别省市：