本发明专利技术公开了一株可以在含有多环芳烃的培养基中生长，合成鼠李糖脂，并且可以形成生物被膜的菌株及其应用。该菌株为铜绿假单胞菌(Pseudomonas?aeruginosa)，其保藏编号为CGMCC?NO.7267。本发明专利技术的菌株具有很强的产高效抑菌鼠李糖脂的功能。所产鼠李糖脂能够用于多环芳烃污染环境的修复，原油的开采等，在医药、环境保护以及能源开采等方面具有重要应用价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一株适用于油藏环境的假单胞菌菌株及其应用。
技术介绍
微生物提高原油米收率技术(Microbial Enhanced Oil Recovery, MEOR)是指利用各种微生物(主要是细菌)及其代谢产物与油藏岩石、流体等发生生物化学作用，以提高原油采收率的技术。MEOR是继聚合物驱、热力驱、化学驱等方法之后新兴的提高原油采收率的方法，该技术具有成本低、对油藏适应性强、不伤害地层和不污染环境等优点，被认为是二十一世纪最有发展前景的提高采油收率技术。至今，在世界上已有三十多个国家开展了相关的研究，在一些现场实验，也取得了显著的效果。微生物提高原油采收率的机理十分复杂，微生物来源的表面活性剂以及基于微生物生物量的微生物调剖是最主要的作用机理。鼠李糖脂是其中最常用的表面活性剂之一，它是一类阴离子型的糖脂。因其良好的生物相容性和高效的乳化、增溶以及降低表面张力等能力而被广泛应用于石油工业等领域。微生物生物量可以选择性或非选择性的封堵一些油层，改变岩石表面润湿性，降低原油粘度，因此，对于原油采收率的提高也非常重要。生物被膜(biofilm)，也称生物膜，是一种或多种微生物为适应自然环境而形成的膜性聚合体。它由胞外基质包裹微生物细胞形成，能够增强其中微生物对环境的抗逆性，使其更好的在各种环境中定殖。因此，油藏环境中生物被膜的形成也将有助于菌体生物量的积累，从而增强其生物调剖效果。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一株适用于油藏环境的铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)及其应用。本专利技术所提供的铜绿假单胞菌为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)MP68，其保藏编号为CGMCC N0.7267。本专利技术所提供的铜绿假单胞菌MP68CGMCC N0.7267的应用为如下任一所述:(I)铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267在制备具有耐多环芳烃性能的微生物产品中的应用；(2)铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267 在制备能在含有多环芳烃的环境中生长的微生物产品中的应用；(3)铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267在油藏环境中提高原油采收率中的应用；(4)铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267 在修复多环芳烃污染中的应用；(5)铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267 在制备表面活性剂和/或乳化剂中的应用；(6)铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267 在制备抑制细菌增殖的产品中的应用；其中，所述细菌为枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌或结核分支杆菌中的任意一种或其组合。上述任一所述应用中，所述含有多环芳烃的环境为含有多环芳烃的铜绿假单胞菌培养基或含有多环芳烃的油藏。上述任一所述应用中，所述多环芳烃具体为荧蒽、苯并菲或芘。铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267 发酵后得到的发酵产物也属于本专利技术的保护范围。所述发酵产物的制备方法可为:将铜绿假单胞菌IMP68接种于低磷酸培养基中，37°C培养，搅拌，发酵2天，离心去除菌体后即得发酵产物；所述低磷酸培养基具体为PPGAS培养基。PPGAS培养基的溶剂为水，溶质及其在培养基中的浓度如下:氯化铵0.02M，氯化钾0.02M, Tris-HCl0.12M，硫酸镁0.0016M，蛋白胨I % (质量百分含量)，甘油lg/100ml，余量为水。 上述发酵产物的如下任一应用也属于本专利技术的保护范围:(I)上述发酵产物在作为表面活性剂和/或乳化剂中的应用；(2)上述发酵产物在制备抑制细菌增殖的产品中的应用；其中，所述细菌为枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌或结核分支杆菌中的任意一种或其组口 ο上述发酵产物中的提取物也属于本专利技术的保护范围。所述提取物的制备方法为:将上述任一所述发酵产物去除菌体，保留发酵液上清，调节发酵液上清的PH值至2，然后4°C放置过夜，离心，取沉淀，再用氯仿甲醇混合液抽提，取有机相，即得；所述氯仿甲醇的体积比为2: I。所述提取物含有鼠李糖脂。上述提取物的如下任一应用也属于本专利技术的保护范围:(I)上述任一所述提取物在作为表面活性剂和/或乳化剂中的应用；(2)上述任一所述提取物在制备抑制细菌增殖的产品中的应用；其中，所述细菌为枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌或结核分支杆菌中的任意一种或其组合。本专利技术的铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267 可以在含有多环芳烃的培养基中生长，并且合成大量的鼠李糖脂，合成的鼠李糖脂具有很强的表面活性剂性能和乳化能力，并且可以抑制其他细菌的生长；同时，该菌也可以在含有多环芳烃的培养基中生长形成生物被膜。因此，该菌具有应用于多环芳烃污染环境的修复和油藏环境中提高原油采收率的潜能。附图说明图1 为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267 提取物中鼠李糖脂的薄层层析图，其中迁移率(Rf)为0.6的是双鼠李糖脂，迁移率为0.9的是单鼠李糖脂。图2 为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267 在含有荧蒽培养基中的生长、表面活性剂的产生以及生物被膜的形成能力实验数据统计结果图，其中A为菌株在三种培养基中的生长曲线；B为菌株在三种培养基中鼠李糖脂的产量；C为菌株在三种培养基中生物被膜的形成情况。图3 为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267 在含有苯并菲培养基中的生长、表面活性剂的产生以及生物被膜的形成能力实验数据统计结果图，其中A为菌株在三种培养基中的生长曲线；B为菌株在三种培养基中鼠李糖脂的产量;C为菌株在三种培养基中生物被膜的形成情况。图4 为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267 在含有芘培养基中的生长、表面活性剂的产生以及生物被膜的形成能力实验数据统计结果图，其中A为菌株在三种培养基中的生长曲线；B为菌株在三种培养基中鼠李糖脂的产量；C为菌株在三种培养基中生物被膜的形成情况。具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下面结合具体实施例对本专利技术作进一步说明，但本专利技术并不限于以下实施例。实施例1、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267 菌株的分离和鉴定 取新疆克拉玛依油田8区8805井附近的原油污染土壤样品，使用LB培养基进行分离培养得到菌株IMP68。检测菌株MP68的16s rDNA的序列，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株铜绿假单胞菌(Pseudomonas?aeruginosa)IMP68CGMCC?NO.7267。
【技术特征摘要】
1.一株铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267。2.权利要求1所述的铜绿假单胞菌MP68CGMCCN0.7267的如下任一应用: (1)铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267在制备具有耐多环芳烃性能的微生物产品中的应用； (2)铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267 在制备能在含有多环芳烃的环境中生长的微生物产品中的应用； (3)铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267在油藏环境中提高原油采收率中的应用； (4)铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267 在修复多环芳经污染中的应用； (5)铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267 在制备表面活性剂和/或乳化剂中的应用； (6)铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa) IMP68CGMCC N0.7267在制备抑制细菌增殖的产品中的应用；其中，所述细菌为枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌或结核分支杆菌中的任意一种或其组合。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于:所述含有多环...
【专利技术属性】
技术研发人员：马旅雁，王世伟，王迪，杨新平，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：
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