一种一锅法制备多功能棉酚纳米制剂的方法技术

本发明专利技术公开了一种一锅法制备多功能棉酚纳米制剂的方法，所述方法为：用一定量的有机溶剂充分溶解一定比例的棉酚、脂类荧光染料和聚乙二醇衍生物；向一定量的去离子水中滴加一定量的表面活性剂；在适当转速下，将棉酚和脂类荧光染料有机溶剂混合液以一定的滴速滴入去离子水中；滴加完毕反应一定时间，待有机溶剂旋干，即得多功能棉酚纳米制剂。本发明专利技术制备工艺简单，制得棉酚纳米制剂具有粒径小，载药量高，单分散性与稳定性好，可示踪，安全性高等优点，从而可以使棉酚更好的发挥抗肿瘤作用。

Method for preparing multifunctional gossypol nano preparation by one pot method

The invention discloses a pot of preparation of nano preparation method of gossypol, the method is as follows: by gossypol, a certain amount of organic solvent dissolving a certain proportion of lipid fluorescent dyes and polyethylene glycol derivatives; surface active agent and deionized water to a certain amount of adding a certain amount of; at the appropriate speed, will gossypol and lipid fluorescent dye organic solvent mixture to drop certain speed drops into deionized water; adding after a certain reaction time, organic solvent to spin dry, is multifunctional nano preparation of gossypol. The invention has the advantages of simple preparation process, preparation of gossypol nanoparticles possess small particle size, high load capacity, good stability and monodispersity, tracer, high security, which can play the anti-tumor effect of gossypol better.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药领域中制备酚纳米制剂的方法，具体涉及制备一种可示踪的携载棉酚的纳米粒子作为荧光探针及药物传输工具的方法。
技术介绍
棉酚亦称棉子酚，是从棉籽中分离的一种酚类成分，其化学结构由Adams等于 1938年阐明，为2.2 ^联二萘_8，8' 二羟基醛_1，I' ,6.6' 1.1'六羟基-5,5' 二异丙基-3-3' 二甲基，分子量518.54，为有毒的黄色色素，存在于锦葵科植物草棉、树棉或陆地棉成熟种子、根皮中。棉酚有两种光学异构体，先从棉簇植物中分离出消旋体，然后从桐棉植物中分离出右旋体，再从海岛棉提出左旋体。具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤及抗生育作用。经过近40年的努力，对棉酚抗肿瘤的探索无论在实验室研究还是临床试用方面， 都取得令人鼓舞的进展。据报道，棉酚对起源于淋巴及粒细胞、肾上腺、乳腺、宫颈、直肠和中枢神经系统的多种肿瘤细胞株均有明显的抑制作用。其抗肿瘤机理为:一、它通过抑制拓扑异构酶II的催化激活和干预拓扑异构酶-DNA复合物形成的稳定性，影响细胞的功能。棉酚降低DNA聚合酶α和β的活性，抑制DNA合成，导致细胞在S期中止，是一种特异的DNA 合成抑制剂，在较大剂量下抑制细胞分裂，从而抑制细胞生长。二、棉酚对肿瘤细胞系PC3 的转化生长因子TGF-β I的表达有刺激作用。作用于TGF-β I基因的表达，抑制细胞DNA 合成和中止细胞于G0/G1期。三、棉酚干预蛋白激酶的功能，调控信号传导通路，调节细胞的增殖和分化，阻止肿瘤的发生和发展。研究表明，棉酚抑制鸟尿酸脱羧酶激活的PRL刺激的细胞分裂，降低3H-Tdr掺入DNA比例，从而导致DNA合成的下降和细胞分裂的抑制。四、 棉酚能抑制细胞能量代谢，通过乳酸脱氢酶(LDH)同源酶V型抑制线粒体氧化鳞酸化和电子传递，引起线粒体肿胀，嵴断裂、固缩、严重空泡化及溃破等。线粒体是细胞呼吸、能量供应和氧化、磷酸化的重要细胞器，线粒体损伤从而导致细胞死亡。随着对棉酚抗肿瘤机制进一步全面的认识和实验室研究及临床试用的深入，棉酚可能成为一种颇有前途的抗肿瘤药物。为了使任何治疗性药物分子通过胃肠道输送，进入血液并最终到达体内器官和细胞，所述药物分子必须在肠液的水相中是可溶的。然而，棉酚在水中几乎是不溶的，只溶于一些常用的有机溶剂，如丙酮、乙醇、氯仿和二甲亚砜等。因此，在临床上提高棉酚的水溶性和生物利用度显得十分必要。目前，大部分关于棉酚的专利是涉及其提取与制备方面的，而只有少部分涉及棉酚纳米制剂的制备方法，如:中国专利技术专利“一种醋酸棉酚静脉注射脂肪乳剂的制备方法”， 申请号=201010164025.7公开了一种以醋酸棉酚为活性成分，油酸乙酯或中链脂肪酸甘油三酸酯为油相，大豆卵磷脂为表面活性剂，无水乙醇或PEG400为助表面活性剂，制备醋酸棉酚静脉注射脂肪乳剂的方法；中国专利技术专利“棉酚或其类似物的液体制剂及其制备方法和用途”，申请号=200710042230.4公开了一种含有棉酚或其类似物的液体制剂，还公开了所述液体制剂的制备方法和用途；中国专利技术专利“从棉籽脱酚液中制备高纯度棉酚的方法”，申请号=200810236858.2公开了一种采用脱酚液从棉籽脱酚液中提取高纯度棉酚的方法；中国专利技术专利“水溶性棉酚制剂及其制备方法”，申请号:95111745.9公开了一种水溶性棉酚的口服液、针剂、散剂、片剂、胶囊等制剂的制备方法。而关于本专利技术可示踪的载棉酚的纳米制剂的制备工艺还没有类似报道，尤其是棉酚纳米制剂在胃癌治疗方面的专利也还未有相关报道。
技术实现思路
鉴于现有技术的不足，本专利技术旨在提供一锅法制备多功能棉酚纳米制剂的方法，该方法制备出的棉酚纳米制剂具有载药量高，稳定性好，治疗胃癌效果显著的特点。作为荧光探针及药物传输工具在生物医学领域具有广阔的应用前景。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下:，该制备方法包括下列步骤:(I)选取摩尔比率为1:2 1:26的脂类荧光染料与3_氨丙基三乙氧基硅烷在2ml 12ml的有机溶剂中避光反应12小时，得到脂类荧光染料_3_氨丙基三乙氧基硅烷；(2)称取4 26mg的棉酚，20ul 300ul的脂类荧光染料_3_氨丙基三乙氧基硅烷，以及8 50mg的聚乙二醇衍生物，混合溶于I 6ml有机溶剂中，并在100HZ下超声作用3 11分钟，获得混合液；(3)称量5 60ml去离子水，并加入表面活性剂，设定温度为0°C 75°C，转速为10 800r/min，磁力搅拌条件下以每分钟3 60滴的滴速向去离子水中滴加混合液；滴加完毕后，保持转速，继续搅拌30 210min，最后旋蒸并除去甲醇，即得到棉酚纳米制剂。作为一种优选的方案，所述脂类荧光染料为Cy5NHS ester, Cy3NHS ester,Cy5.5NHS ester> Cy3 或 Cy5 中的任意一种。`作为一种优选的方案，所述聚乙二醇衍生物为HOOC-PEG-COOH、MPEG-C00H,0HC-PEG-C00H,NH2-PEg-COOH,H0-PEG-C00H, SH-PEG-C00H 或 H00C-PEG-PLA 中的任意一种；需要说明的是，所述加入的表面活性剂的质量体积比为1:5000。作为一种优选的方案，所述的表面活性剂为Span-80、TWEEN20、MERPOL-HCS、ALHAN0L-XC、Bri j35、Triton X-100、Sodium Cholate、Cetrimide 或 Cremophor EL 中的任意一种。作为一种优选的方案，所述有机溶剂为甲醇、氯仿、丙酮、乙醚、乙醇或二甲基亚砜中的任意一种。本专利技术有益效果在于:1、本专利技术所涉及到的合成方法，简单易操作，制剂粒径小且粒径范围分布窄；2、本专利技术所合成的制剂稳定性和单分散性良好，载药量高达98%，生物利用度高；3、本专利技术所合成的制剂在做为荧光探针及药物传输工具方面具有巨大的开发潜倉泛;4、本专利技术所合成的多功能棉酚纳米制剂具有重要的应用价值，尤其是在肿瘤治疗方面，表现出良好的应用前景和经济价值。附图说明图1为本法明制备方法的过程原理图2为本专利技术实例I所制得的多功能棉酚纳米制剂的粒径分布图与透射电镜图3为本专利技术实例3所制得的多功能棉酚纳米制剂的紫外光谱和荧光光谱图4为本专利技术实例7所制得的多功能棉酚纳米制剂在体外的药物释放曲线和稳定性检测曲线图5为本专利技术实例8所制得的多功能棉酚纳米制剂对胃癌细胞的抑制情况图6为本专利技术实例10所制得的多功能棉酚纳米制剂对胃肠道及肿瘤组织的损伤图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。如图1所示，为本法明，该制备方法包括下列步骤:(I)选取摩尔比率为1:2 1:26的脂类荧光染料与3_氨丙基三乙氧基硅烷在 2ml 12ml的有机溶剂中避光反应12小时，得到脂类荧光染料_3_氨丙基三乙氧基硅烷；(2)称取4 26mg的棉酚，20ul 300ul的脂类荧光染料_3_氨丙基三乙氧基硅烷，以及8 50mg的聚乙二醇衍生物，混合溶于I 6ml有机溶剂中，并在100HZ下超声作用3 11分钟，获得混合液；(3)称量5 60ml本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种一锅法制备多功能棉酚纳米制剂的方法，其特征在于，该制备方法包括下列步骤：?（1）选取摩尔比率为1:2～1:26的脂类荧光染料与3?氨丙基三乙氧基硅烷在2ml～12ml的有机溶剂中避光反应12小时，得到脂类荧光染料?3?氨丙基三乙氧基硅烷;?（2）称取4～26mg的棉酚，20ul～300ul的脂类荧光染料?3?氨丙基三乙氧基硅烷，以及8～50mg的聚乙二醇衍生物，混合溶于1～6ml有机溶剂中,并在100HZ下超声作用3～11分钟，获得混合液；?（3）称量5～60ml去离子水，并加入表面活性剂，设定温度为0℃～75℃，转速为10～800r/min，磁力搅拌条件下以每分钟3～60滴的滴速向去离子水中滴加混合液；滴加完毕后，保持转速，继续搅拌30～210min，最后旋蒸并除去甲醇，即得到棉酚纳米制剂。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：詹勇华，孙玉林，韩青林，梁继民，田捷，
申请(专利权)人：西安电子科技大学，
类型：发明
国别省市：