一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特征在于，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：蓝鲨鱼皮胶原蛋白1‑9%，壳聚糖0.25‑2.25%，余量为凝胶基质。本发明专利技术还提供了上述凝胶制剂的制备方法。该凝胶制剂可以用于修复口腔创面。

Blue shark skin collagen composite gel preparation and preparation method and application thereof

The invention discloses a blue shark skin collagen gel preparation, which is characterized in that the gel preparation comprises the following components in weight percentage: blue shark skin collagen 1 9%, chitosan 0.25 2.25%, margin as the gel matrix. The invention also provides a preparation method of the gel preparation. The gel preparation can be used for repairing oral wound.

【技术实现步骤摘要】
一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂及其制备方法与应用
本专利技术属于医用生物材料领域，涉及一种凝胶制剂，特别是一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂及其制备方法与应用。
技术介绍
水产胶原蛋白是一种天然的生物高分子材料，具有低抗原性、止血性、可生物吸收，可以对创伤的皮肤海绵组织提供持续而缓慢的给药，促进肉芽生长、防止再出血，促进伤口愈合。壳聚糖是自然界中存在的天然碱性多糖，是甲壳素的脱乙酰基产物，甲壳素在自然界中含量仅次于纤维素，来源广泛。壳聚糖作为一种天然高分子材料，具有良好的生物相容性、可降解性、抗菌性、促愈性、无毒、对粘膜无刺激性，可以促进黏膜粘附，在生物医用材料领域具有广泛的应用。口腔溃疡是一种最常见的深达真皮的粘膜上皮局限性缺损，是口腔粘膜病中最常见的临床表现，患病率高达20%。口腔溃疡病理改变以口腔局部黏膜溃疡性损害为主，发病机制极其复杂，与遗传因素、免疫因素等很多因素有关，具有周期性及烧灼性疼痛特点，一旦形成溃疡后可继续感染，造成溃疡局部组织炎症和坏死，病程迁延，其病因未完全明确，跟免疫、遗传、精神因素、维生素类缺乏等有关，因而治疗药物较多，效果不尽理想，目前临床上无根治的特效方法。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提出了一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂。本专利技术还提供了前述凝胶制剂的一种制备方法。本专利技术还提供了前述凝胶制剂制备修复口腔创面药物中的应用。本专利技术要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的，一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特点是，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：蓝鲨鱼皮胶原蛋白1-9%；壳聚糖0.25-2.25%；余量为凝胶基质。本专利技术所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白采用以下方法进行制备：（1）取蓝鲨鱼皮，剔除皮下肌肉和脂肪组织，再至于蒸馏水中浸泡0.5-1h，将鱼皮剪成大小为3-5mm×3-5mm的鱼皮块，过滤抽干备用；（2）将步骤（1）中得到的鱼皮块置于0.25-0.5MNaOH溶液中浸泡脱脂，搅拌4-12h，置于4℃冷藏8-16h，取出后用蒸馏水冲洗干净；（3）将脱脂处理处理后的鱼皮块置于70%乙醇溶液中浸泡脱糖，搅拌4-6h，取出后用蒸馏水冲洗干净；（4）将脱糖处理过的鱼皮块粉碎，置于0.25M冰醋酸溶液中浸泡并搅拌2-6h，置于4℃冷藏12h，得鱼皮提取液；（5）取鱼皮提取液过滤，收集滤液，向滤液中加入0.25-0.5M的NaOH溶液至溶液pH达6.8-7.0，至大量白色絮状物析出，过滤取沉淀物，沉淀物用蒸馏水清洗后挤干密封，冷冻干燥，得蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物；（6）将蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物在液氮低温环境下进行超细粉碎处理，得粉状蓝鲨鱼皮胶原蛋白。本专利技术所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的分子量为100-300KDa。进一步优选地，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的分子量为130-200KDa。本专利技术所述的壳聚糖的脱乙酰度>95%。本专利技术所述的凝胶基质包括以下重量份的原料：山梨糖醇30-40；甘油8-12；纤维素胶1.3-1.6；羟苯甲酯钠0.13-0.17；羟苯丙酯钠0.09-0.11；柠檬酸0.03-0.06；水50-56。进一步优选地，所述的凝胶基质包括以下重量份的原料：山梨糖醇33-37；甘油9.5-10.5；纤维素胶1.2-1.5；羟苯甲酯钠0.14-0.15；羟苯丙酯钠0.09-0.1；柠檬酸0.05-0.06；水53-55。进一步优选地，所述的凝胶基质包括以下重量份的原料：山梨糖醇35；甘油10；纤维素胶1.5；羟苯甲酯钠0.15；羟苯丙酯钠0.1；柠檬酸0.05；水53.2。本专利技术还提供了以上技术方案所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂的制备方法，其特点是，该凝胶制剂采用如下方法制备：将粉状蓝鲨鱼皮胶原蛋白与壳聚糖混合，得混合物，向混合物中加入凝胶基质，充分混合研磨，即得蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂；其中，将凝胶基质中的各组分充分混匀后再加入蓝鲨鱼皮胶原蛋白与壳聚糖的混合物中。本专利技术所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂可用于修复口腔创面。本专利技术以蓝鲨鱼皮下脚料为原料，通过简便、高效的等电点沉淀法技术，提取出蓝鲨鱼皮胶原蛋白，有效利用了蓝鲨下脚料，变废为宝，提高了水产品加工业的附加值。本专利技术蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂在应用时直接涂抹于口腔溃疡面，本专利技术凝胶制剂中使用的蓝鲨鱼皮胶原蛋白和壳聚糖均为天然可降解的生物医用材料，通过合理的配伍，将蓝鲨鱼皮胶原蛋白和壳聚糖共同使用，同时发挥两种生物材料的功效，避免了单一治疗的弊端，具有优异的生物相容性，可用于修复口腔创面，能够显著加速缩小口腔溃疡直径，减轻充血水肿程度，加速口腔溃疡愈合，而且疗效显著，无不良反应，粘膜刺激性低，降解性好。附图说明图1为本专利技术实施例19的蓝鲨鱼皮胶原蛋白凝胶制剂对大鼠口腔溃疡疗效的光学显微镜观察结果。图中：（a）模型组；(b)高剂量组；(c)中剂量组；（d）低剂量组；（e）单一胶原蛋白组；（f）凝胶组；（g）阳性对照组。具体实施方式以下结合具体实施例及附图，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例1，一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：蓝鲨鱼皮胶原蛋白9%；壳聚糖2.25%；余量为凝胶基质。实施例2，一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：蓝鲨鱼皮胶原蛋白3%；壳聚糖0.75%；余量为凝胶基质。实施例3，一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：蓝鲨鱼皮胶原蛋白1%；壳聚糖0.25%；余量为凝胶基质。实施例4，一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：蓝鲨鱼皮胶原蛋白4%；壳聚糖1%；余量为凝胶基质。实施例5，实施例1-4任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的制备方法如下：（1）取蓝鲨鱼皮，剔除皮下肌肉和脂肪组织，再至于蒸馏水中浸泡0.5h，将鱼皮剪成大小为3mm×3mm的鱼皮块，过滤抽干备用；（2）将步骤（1）中得到的鱼皮块置于0.25MNaOH溶液中浸泡脱脂，搅拌4h，置于4℃冷藏8h，取出后用蒸馏水冲洗干净；（3）将脱脂处理处理后的鱼皮块置于70%乙醇溶液中浸泡脱糖，搅拌4h，取出后用蒸馏水冲洗干净；（4）将脱糖处理过的鱼皮块粉碎，置于0.25M冰醋酸溶液中浸泡并搅拌2h，置于4℃冷藏12h，得鱼皮提取液；（5）取鱼皮提取液过滤，收集滤液，向滤液中加入0.25M的NaOH溶液至溶液pH达6.8，至大量白色絮状物析出，过滤取沉淀物，沉淀物用蒸馏水清洗后挤干密封，冷冻干燥，得蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物；（6）将蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物在液氮低温环境下进行超细粉碎处理，得粉状蓝鲨鱼皮胶原蛋白。实施例6，实施例1-4任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的制备方法如下：（1）取蓝鲨鱼皮，剔除皮下肌肉和脂肪组织，再至于蒸馏水中浸泡1h，将鱼皮剪成大小为5mm×5mm的鱼皮块，过滤抽干备用；（2）将步骤（1）中得到的鱼皮块置于0.5MNaOH溶液中浸泡脱脂，搅拌12h，置于4℃冷藏16h，取出后用蒸馏水冲洗干净；（3）将脱脂处本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特征在于，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：蓝鲨鱼皮胶原蛋白    1‑9%；壳聚糖              0.25‑2.25%；余量为凝胶基质。

【技术特征摘要】
1.一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特征在于，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：蓝鲨鱼皮胶原蛋白1-9%；壳聚糖0.25-2.25%；余量为凝胶基质。2.根据权利要求1所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特征在于，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的制备方法如下：（1）取蓝鲨鱼皮，剔除皮下肌肉和脂肪组织，再至于蒸馏水中浸泡0.5-1h，将鱼皮剪成大小为3-5mm×3-5mm的鱼皮块，过滤抽干备用；（2）将步骤（1）中得到的鱼皮块置于0.25-0.5MNaOH溶液中浸泡脱脂，搅拌4-12h，置于4℃冷藏8-16h，取出后用蒸馏水冲洗干净；（3）将脱脂处理处理后的鱼皮块置于70%乙醇溶液中浸泡脱糖，搅拌4-6h，取出后用蒸馏水冲洗干净；（4）将脱糖处理过的鱼皮块粉碎，置于0.25M冰醋酸溶液中浸泡并搅拌2-6h，置于4℃冷藏12h，得鱼皮提取液；（5）取鱼皮提取液过滤，收集滤液，向滤液中加入0.25-0.5M的NaOH溶液至溶液pH达6.8-7.0，至大量白色絮状物析出，过滤取沉淀物，沉淀物用蒸馏水清洗后挤干密封，冷冻干燥，得蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物；（6）将蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物在液氮低温环境下进行超细粉碎处理，得粉状蓝鲨鱼皮胶原蛋白。3.根据权利要求1或2所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特征在于，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的分子量为100-30...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋升，徐晓刚，李铁军，吴文惠，杨桥，王淑军，吕明生，缪辉南，
申请(专利权)人：上海麦琳生物医学工程科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31