由全保护核苷磷酰胺中间体通过酸催化合成核苷三磷酸和核苷二磷酸的方法技术

技术编号:8902890 阅读:291 留言:0更新日期:2013-07-10 23:33
一种由全保护核苷磷酰胺中间体通过酸催化合成核苷三磷酸和核苷二磷酸的方法,以苄氧羰基保护核苷为原料,与苄氧基二异丙基氨基亚磷酰氯在碱性条件下生成亚磷酰胺中间体粗品;再经弱酸催化水解得到核苷-氢亚磷酸二酯中间体粗品;核苷-氢亚磷酸二酯中间体粗品,与烷基胺进行氧化偶联,柱层析得到全保护核苷磷酰胺前体;再在N,N-二甲基甲酰胺溶液中经催化、氢化脱除全部保护基,之后过滤除去钯碳;与焦磷酸或单磷酸烷基铵盐在弱酸性催化剂存在的条件下反应得到核苷二磷酸和核苷三磷酸产物。本发明专利技术大幅度地提高了焦磷酸和单磷酸试剂与核苷磷酰胺中间体的反应速度和产率,为核苷5′-三磷酸和核苷5′-二磷酸的化学合成建立了一种高效和通用的新方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于天然产物类生化试剂的化学制备
,涉及一种。
技术介绍
核苷三磷酸是基因复制、转录、转译的物质基础,在分子生物学和医药研究中,脱氧核苷三磷酸有着广泛的应用。聚合酶连锁反应(Polymerase chain reaction, PCR)技术在体外利用DNA聚合酶扩增特定的DNA片断,被用于基因图谱的建立、亲子鉴定、基因克隆和疾病检测等。四种天然脱氧核苷三磷酸正是这项技术不可或缺的反应底物。目前,四种天然脱氧核苷三磷酸主要用于生产PCR实验试剂盒。而且随着PCR技术应用的拓展,其需求还在迅速递增。有关核苷三磷酸化学合成的研究最早可以追溯到上世纪中叶。目前,核苷三磷酸类化合物的化学合成已经建立了如“磷酰胺法”、“一锅三步法”、“水杨酸亚磷酰氯法”等多种可行的合成路线。虽然已知的各种方法有其各自适合的核苷底物类型,但是普遍合成产率不高,目前为止还没有任何一种方法可以适用于全部核苷三磷酸的高效合成,从而真正彻底解决核苷三磷酸化学合成的难题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种通用性强、高效的。本专利技术的 ,包括以下步骤: 全保护核苷磷酰胺中间体的合成方法: 1、以苄本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种由全保护核苷磷酰胺中间体通过酸催化合成核苷三磷酸和核苷二磷酸的方法,其特征在于:它包括以下步骤:?全保护核苷磷酰胺中间体的合成方法:(a)、以苄氧羰基保护核苷为原料,与苄氧基二异丙基氨基亚磷酰氯在碱性条件下生成亚磷酰胺中间体粗品;(b)、亚磷酰胺中间体粗品再经弱酸催化水解得到核苷?氢亚磷酸二酯中间体粗品;(c)、核苷?氢亚磷酸二酯中间体粗品,最后与烷基胺进行氧化偶联,柱层析得到全保护核苷磷酰胺前体;核苷二磷酸和核苷三磷酸的酸催化合成方法:(d)、全保护核苷磷酰胺在N,N?二甲基甲酰胺溶液中经催化、氢化脱除全部保护基,之后过滤除去钯碳;(e)、再与焦磷酸或单磷酸烷基铵盐在弱酸性催化剂存在的条...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:孙麒龚珊珊孙剑蒲守智刘国栋多树旺肖强
申请(专利权)人:江西科技师范大学
类型:发明
国别省市:

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