生物样本的预处理方法、RNA的检测方法及预处理试剂盒技术

提供能够迅速且简便地检测RNA的预处理方法。通过在包含人类鼻粘膜的生物样本中添加例如铁离子及碳酸根离子，来抑制存在于人类鼻粘膜的乳铁蛋白的RNA分解活性。如果使用经预处理的生物样本，则可以使用反转录酶扩增RNA病毒的基因。铁离子及碳酸根离子也可以抑制人类鼻粘膜中的溶菌酶C的反转录酶抑制。另外优选通过在包含人类鼻粘膜的生物样本中添加SDS，来除去RNA病毒的被膜。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】生物样本的预处理方法、RNA的检测方法及预处理试剂盒
本专利技术涉及包含RNA的生物样本的预处理方法、RNA的检测方法及预处理试剂盒。
技术介绍
作为检测血液等生物样本中的病毒的方法，有将病毒的基因进行扩增从而检测的方法。但是，生物样本中大多含有基因扩增的抑制物质，因此在基因扩增之前，实施对生物样本进行预处理而将抑制物质除去或钝化的操作。预处理方法例如有：通过表面活性剂、促溶剂、加热等对生物样本进行处理后，进一步通过固相载体或离子交换树脂进行纯化的方法(专利文献1～3)。然而，这些方法需要特殊的装置，并且需要多个操作步骤，因此繁杂。特别是在以RNA为基因的病毒的检测中，为了通过反转录酶使RNA基因成为DNA后进行扩增操作，需要将RNA分解酶(RNase)及反转录酶钝化物质也除去或钝化，因此在现有的预处理方法中，进一步需要繁杂的操作。例如作为包含RNA病毒的生物样本的预处理方法，已知添加多胺或硫酸化多糖(专利文献4)。然而，添加多胺或硫酸化多糖会使预处理更加繁杂化，并且多胺及硫酸化多糖可能和RNA基因及通过反转录酶而生成的DNA结合，反而也可能抑制基因扩增。另外，流感病毒为RNA病毒的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.06.29 JP 2011-1450401.生物样本的预处理方法，其是包含RNA的生物样本的预处理方法，其特征在于：所述生物样本包含乳铁蛋白(Lactferrin)，通过在所述生物样本中添加乳铁蛋白的RNA分解活性抑制剂，对所述生物样本实施乳铁蛋白的RNA分解活性抑制处理，所述乳铁蛋白的RNA分解活性抑制剂是为至少一种选自以下的金属的离子：铜、镍、铁、金、钪、钇、钆、铈、钕和锌。2.权利要求1的生物样本的预处理方法，其中所述铜的离子为Cu2+或Cu3+、镍的离子为Ni2+、铁的离子为Fe2+或Fe3+、金的离子为Au+或Au3+、钪的离子为Sc3+、钇的离子为Y3+、钆的离子为Gd3+、铈的离子为Ce3+、钕的离子为Nd3+和锌的离子为Zn2+。3.权利要求1的生物样本的预处理方法，其特征在于：所述生物样本包括：动物的鼻粘膜、鼻窦黏膜、气管粘膜、唾液、来自口腔或咽喉的分泌液、泪、乳汁、胆汁、血液(白细胞)、子宫颈管的粘膜、内外生殖器的粘膜、羊水、或尿。4.权利要求3的生物样本的预处理方法，其特征在于：所述动物为人类。5.权利要求1的生物样本的预处理方法，其特征在于：所述生物样本包括人类鼻粘膜。6.权利要求2的生物样本的预处理方法，其特征在于：所述生物样本包括人类鼻粘膜。7.权利要求3的生物样本的预处理方法，其特征在于：所述生物样本包括人类鼻粘膜。8.权利要求4的生物样本的预处理方法，其特征在于：所述生物样本包括人类鼻粘膜。9.权利要求1至8中任一项的生物样本的预处理方法，其特征在于：进一步对所述生物样本实施溶菌酶C(LysozymeC)的反转录抑制活性抑制处理。10.权利要求9的生物样本的预处理方法，其特征在于：通过在所述生物样本中添加溶菌酶C(LysozymeC)的反转录抑制活性抑制剂，来对所述生物样本实施溶菌酶C(LysozymeC)的反转录抑制活性抑制处理。11.权利要求10的生物样本的预处理方法，其特征在于：所述RNA分解活性抑制剂及所述反转录抑制活性抑制剂中的至少一种包括铁离子剂及碳酸根离子剂。12.权利要求11的生物样本的预处理方法，其特征在于：对添加了所述铁离子剂及碳酸根离子剂的所述生物样本进行加热处理。13.权利要求1至8和10至12中任一项的生物样本的预处理方法，其特征在于：进一步在所述生物样本中添加离子性表面活性剂。14.权利要求9的生物样本的预处理方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：林崎良英，臼井健悟，合田砂织，野村和仁，川井雄辉，
申请(专利权)人：达纳福股份有限公司，
类型：
国别省市：