CIK细胞体外高效扩增的方法技术

本发明专利技术提供的方法可在体外快速高效扩增CIK细胞。本发明专利技术结合使用ConA和抗CD2单克隆抗体这两种有丝分裂原，对悬浮培养的细胞进行刺激，从而达到高效扩增细胞的目的。作为诱导激活剂的有丝分裂原在细胞活化后进行清除，避免细胞受到过度刺激而发生凋亡。本发明专利技术所述的CIK细胞的体外扩增在搅拌式反应罐中进行，可为细胞提供恒定的扩增条件，包括保持pH、代谢物浓度和溶氧的稳定。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术所涉及的是一种体外高效扩增CIK细胞的方法。
技术介绍
CIK细胞在骨髓净化和肿瘤过继治疗中的作用已在动物模型中得到证实，并开始进行临床应用。美国斯坦福大学医学中心骨髓移植研究实验室采用抗CD3mAb、IL-2、IFN- Y , IL-1培养正常人外周血淋巴细胞后，细胞的抗肿瘤活性比⑶3激活的杀伤细胞明显增加，称为细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer，CIK)。CIK细胞能大量地扩增，而且具有比LAK细胞更强的肿瘤杀伤活性。CIK细胞应用于临床，治疗一个病人的用量一般在IO9-1O11之间，因此获得足够数量具有高肿瘤杀伤活性的效应细胞是决定CIK细胞能否应用于临床的关键。传统的CIK细胞体外长期培养法采用静态和间歇换液的方式，常会因营养物耗竭和有毒副产物积累而限制细胞生长。培养过程中的几个关键参数如pH、代谢物浓度等得不到控制，无法保证细胞生长所需的环境要求；而间歇换液往往会使培养环境产生较大波动，从而影响细胞生长，同时间歇换液需使用较高浓度的细胞因子，由于这些细胞因子的半衰期很短，难以发挥应有的作用，造成成本增长和资源浪费。更为重要的是本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种体外扩增CIK细胞的方法，其特征在于将来自脐血的单个核细胞按5?x?104细胞/ml的接种密度接种于搅拌式反应罐中，24小时后加入ConA和CD2mAb，继续培养3?4天。

【技术特征摘要】
1.一种体外扩增CIK细胞的方法，其特征在于将来自脐血的单个核细胞按5 X IO4细胞/ml的接种密度接种于搅拌式反应罐中，24小时后加入ConA和⑶2mAb，继续培养3_4天。2.根据权利要求1所述方法，将激活后的细胞用培养基洗涤，按5X IO4细胞/ml接种于搅拌式反应罐中，进行连续搅拌培养。3.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：田杰，
申请(专利权)人：北京清美联创干细胞科技有限公司，
类型：发明
国别省市：