一种指导华法林用药的多重基因检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术公开了一种指导华法林用药的多重基因检测试剂盒及其检测方法，包括超纯水，X溶液，10×PCR缓冲液，PCR引物，25mM氯化镁溶液，DNA聚合酶和阳性对照品，特点是PCR引物包括5个与华法林用药相关基因上的7个SNP位点上的不同基因型的正反向扩增引物、DNA内参的正反向扩增引物及反应内参的正反向扩增引物，其基因序列如SEQ?ID?NO.1～NO.32所示；其检测包括采集样本并提取核酸的步骤；以提取的核酸为模板进行PCR反应的步骤；最后GeXP遗传分析仪毛细电泳分离样品的步骤，优点是特异性强、准确性高、通量高、可靠性强、成本低、无假阴性结果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种多重基因检测试剂盒及其检测方法，尤其是涉及。
技术介绍
华法林为香豆素类口服抗凝药，是临床上常用的抗凝药物，华法林通过抑制凝血因子的活化抑制新的血栓形成，限制血栓的扩大和延展，抑制在血栓的基础上形成新的血栓，抑制血栓脱落和栓塞的发生，有利于血栓的清除。临床上主要用于治疗房颤、心瓣膜修复术、再发性的中风、深静脉血栓以及肺动脉栓塞。但是华法林治疗窗窄、剂量个体差异大，在其治疗的开始阶段，大约有12%的患者发生出血性事件，其中2%发生致死性出血。研究表明，人群对华法林的个体差异与单核苷酸多态性(SNP)密切相关。其中华法林靶标VKORCl(维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位I)和参与华法林代谢的CYP2C9 (细胞色素P450酶2C9)以及CYP4F2、CALU和GGCX等基因的遗传多态性与患者的有效剂量和致出血剂量密切相关。对上述基因多态性的诊断能改善华法林抗凝的安全性，减少抗凝初期剂量滴定时间，以求尽快达到治疗水平的INR (internationalnormalizedratio,国际标准化比值)。现有的用于指导华法林用药相关基因的诊断方法主要为基因芯片、荧光定量本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种指导华法林用药的多重基因检测试剂盒，包括超纯水，X溶液，10×PCR缓冲液，PCR引物，25mM氯化镁溶液，DNA聚合酶和阳性对照品，其特征在于所述的PCR引物包括以下5个与华法林用药相关基因上的7个SNP位点上的不同基因型的正反向扩增引物、DNA内参的正反向扩增引物及反应内参的正反向扩增引物，其基因序列如下表所示：

【技术特征摘要】
1.一种指导华法林用药的多重基因检测试剂盒，包括超纯水，X溶液，IOXPCR缓冲液，PCR引物，25mM氯化镁溶液，DNA聚合酶和阳性对照品，其特征在于所述的PCR引物包括以下5个与华法林用药相关基因上的7个SNP位点上的不同基因型的正反向扩增引物、DNA内参的正反向扩增引物及反应内参的正反向扩增引物，其基因序列如下表所示:2.根据权利要求1所述的一种指导华法林用药的多重基因检测试剂盒，其特征在于:所述的X溶液为包括三磷酸脱氧核苷酸和通用引物，所述的通用引物正向扩增引物序列为AGGTGACACTATAGAATA ;反向扩增引物序列为GTACGACTCACTATAGGGA，所述的通用引物正向扩增引物带荧光标记。3.根据权利要求1所述的一种指导华法林用药的多重基因检测试剂盒，其特征在于:所述的阳性对照品为为上述5个与华法林用药相关基因上的7个SNP位点上的不同基因型的引物克隆所得DNA片段。4.一种利用权利要求1-3中任一项所述的指导华法林用药的多重基因检测试剂盒的检测方法，其特征在于具体包括以下步骤: (1)采集样本并提取核酸 采集肿瘤患者口腔拭子或血液样品的分离培养物，从分离培养物中提取核酸； (2)以提取的核酸为模板进行PCR反应 取DNA样品2 μ L，10 XPCR缓冲液2 μ L，25mM的...

【专利技术属性】
技术研发人员：南丽，颜进，吴勇，
申请(专利权)人：海尔施生物医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：