一种从蛋黄粉提取燕窝酸的方法技术

本发明专利技术涉及一种从蛋黄粉提取燕窝素的方法，本发明专利技术的技术特征，是使用特定的菠萝蛋白酶水解蛋黄粉，然后使用D型树酯脱去蛋白脂，纯化提取燕窝酸。本发明专利技术与先有的方法比较，去除了酸水解污染的问题，克服了酶水解蛋黄粉脱脂困难和过滤问题。使用本方法提取的燕窝素(唾液酸sialic?acid)，工艺简单，使用方便，提取成本低，有工业化生产的实用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物产品提取及其应用
技术介绍
燕窝酸也称唾液酸(sialic acid)，是一种神经氨酸，是细胞蛋白质的重要组成物，广泛存在于动物脑组织细胞中，最近的研究认为燕窝酸是预防老年人痴呆症，提高免疫力的一种神经营养品，燕窝酸联接于细胞蛋白糖脂末端组织，提高脑细胞识别能力，促进肠道吸收矿物质和维生素，对早期癌变及转移有显著的抑制作用。燕窝酸的药用前景非常广泛，也是近年来生物制药领域中的重点项目。燕窝酸的提取工艺，有文献报道，从乳清及蛋黄粉中提取，如US 5233033，US5270462，CN 02110607X。这些方法中，生产中有许多的困难不能解决，如脱脂困难，有些工艺需要大量有机溶媒，会污染产品并对生产环境有破坏影响，不适宜工业化生产。在专利CN02110607X中是用酸水解蛋黄粉的方法，该法有工艺步骤繁杂，水解温度高，产品收率低等缺陷
技术实现思路
本专利技术的技术特征，是有效，快速的，高质量，高收率的从蛋黄粉中提取燕窝酸的生产方法。使用全脂蛋黄粉，先用特定的菠萝蛋白酶水解蛋黄粉，与先有的方法比较，去除了酸水解污染的问题。酶水解蛋黄粉的困难是脱脂和过滤问题，本专利技术使用树酯脱脂和去蛋白方法，克服了上述工艺不足。本专利技术技术关键是，将蛋黄粉先用去离子水浸泡30min，然后加入菠萝蛋白酶，搅拌10-15min，控制温度25-30°C，放置时间12_18hr，在加入去离子水和藻酸钠，搅拌lOmin，离心过滤，取上清液。用酸调PH值到4_5，过大孔树脂柱D105，收集洗脱液，过离子交换树脂，氢阳离子交换110型，在过铵型阳离子125型，水洗，PH3-4值梯度洗脱，收集PH4洗脱液，调PH值6-8，静置，过滤，母液冷冻，浓缩结晶，烘干得到成品。上述工艺步骤中，其特征是所述去离子水与蛋黄粉的重量比例1 5-8，优选I 7。蛋黄粉与菠萝蛋白酶的重量比例为10-14 1-5，优选12 I。树脂用量是蛋黄粉重量的2-5倍，优选3倍，氢阳离子交换用量是蛋黄粉的1-3倍，优选2倍，铵型阳离子用量是蛋黄粉的2-4倍，优选3倍。本专利技术中使用的微量酸是醋酸，也可用盐酸或硫酸或磷酸或碳酸，优选是碳酸。浓度为，5-10%，优选7%，调节PH6-8使用碳酸氢钠或碳酸钠，优选是碳酸钠，浓度10-20%。工艺中使用的海藻酸钠分子量为10-15万。与现有技术相比，本专利技术的技术特征，使用菠萝蛋白酶解蛋黄粉，是本专利技术人筛选的特有技术，使用这种酶解工艺，配合上大孔树酯脱脂工艺，克服了酶解蛋黄粉脱脂难的问题，本专利技术的工艺简单，无环境污染，提取燕窝酸收率高，产品含量高，是一种适合工业化大规模生产的方法。实施方法例1、取蛋黄粉100kg，用去离子水650kg浸泡，温度25度，搅拌30min，加入菠萝蛋白酶1kg，搅拌lOmin，控制温度27°C，放置时间15hr，搅拌后加入分子量IO万15%海藻酸钠100kg，搅拌均匀，静置30min，用离心机过滤处沉淀物，取过滤液，加入6%醋酸调PH4，过大孔树酯柱(250kg)，收集洗脱液，在过氢阳型离子交换柱(IOOkg)，收集酸性洗脱液，过铵型阳离子交换柱(200kg)，梯度洗脱，收集PH3洗脱液，用10%碳酸钠调PH7。离心过滤，放入-5V ’ 12hr,去沉淀后，浓缩结晶，干燥得燕窝酸产品，收率22. 5 %。如果产品颜色深，可用5%活性碳脱色处理。例2、取蛋黄粉200kg，用去离子水1500kg浸泡，温度25度，搅拌30min，加入菠萝蛋白酶0. 7kg，搅拌15min，控制温度25°C，放置时间18hr，搅拌后加入分子量15万15%海藻酸钠200kg，搅拌均匀，静置30min，用离心机过滤处沉淀物，取过滤液，加入8 %醋酸调PH4，过大孔树酯柱(300kg)，收集洗脱液，在过氢阳型离子交换柱(200kg)，收集酸性洗脱液，过铵型阳离子交换柱(300kg)，梯度洗脱，收集PH4洗脱液，用15%碳酸钠调PH7。离心过滤，放入_5°C，15hr，去沉淀后，浓缩结晶，干燥得燕窝酸产品。收率27%。例3、质量检测1.2 方法1.2.1 色谱条件色谱柱Symmetry C18 柱(4. 6mmX 250mm, 5 ii ml);柱温35°C ;流动相:1. 0%四氢呋喃水溶液(含0. 2%磷酸)-乙腈(92 8);检测波长230nm ;流速1. Oml/min ;进样体积10 U I1. 2. 2样品溶液的制备精确称量燕窝酸产品1. Omg，用注射水IOOml溶解，然后加入10mg/ml邻苯二氨盐酸盐溶液Iml,置于80°C水浴中加热40min,备用。 1. 2. 3对照品溶液的制备取N-乙酰神经氨酸(唾液酸)对照品溶液2ml，再加入10mg/ml邻苯二氨盐酸盐溶液1ml，置于80°C水浴中加热40min，取出后冷却，经0. 45 y m膜过滤后精密吸取上述溶液与对照品溶液各IOul注入液相色谱仪，记录峰面积。结果见表IoHPLC检测燕窝酸含量(外标法)样品批号收率%含量(唾液酸) 20100801239573 201008052792本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从蛋黄粉提取燕窝素的方法，其特征，将蛋黄粉先用去离子水浸泡30min，然后加入菠萝蛋白酶(bromelain)，搅拌10?15min，控制温度25?30℃，放置时间12?18hr，在加入去离子水和藻酸钠，搅拌10min，离心过滤，取上清液。用酸调PH值到4?5，过大孔树脂柱D105，收集洗脱液，过离子交换树脂，氢阳离子交换110型，在过铵型阳离子125型，水洗，PH3?4值梯度洗脱，收集PH4洗脱液，调PH值6?8，静置，过滤，母液冷冻，浓缩结晶，烘干得到成品。

【技术特征摘要】
1.一种从蛋黄粉提取燕窝素的方法，其特征，将蛋黄粉先用去离子水浸泡30min，然后加入菠萝蛋白酶(bromelain)，搅拌10_15min，控制温度25_30°C，放置时间12_18hr，在加入去离子水和藻酸钠，搅拌lOmin，离心过滤，取上清液。用酸调PH值到4-5，过大孔树脂柱D105，收集洗脱液，过离子交换树脂，氢阳离子交换110型，在过铵型阳离子125型，水洗，PH3-4值梯度洗脱，收集PH4洗脱液，调PH值6-8，静置，过滤，母液冷冻，浓缩结晶，烘干得到成品。...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹如，
申请(专利权)人：邹如，
类型：发明
国别省市：