人M2型丙酮酸激酶化学发光免疫分析试剂盒及制备方法技术

本发明专利技术公开了一种人M2型丙酮酸激酶化学发光免疫分析试剂盒及制备方法，所述试剂盒包括以下组份：M2型丙酮酸激酶标准品；包被有M2型丙酮酸激酶单克隆抗体的磁颗粒；辣根过氧化物酶标记的M2型丙酮酸激酶单克隆抗体；化学发光底物A和B；白色不透明微孔板；洗涤液；本发明专利技术试剂盒可以准确定量检测病人血清中M2-PK的含量，对于肺癌等恶性肿瘤的检测具有重要的指导意义，与传统的ELISA方法相比，本发明专利技术灵敏度高，特异性好，线性范围宽，且稳定性、可靠性和准确度高，安全环保，操作简便。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫分析及医学检验
，具体的，本专利技术涉及一种人M2型丙酮 酸激酶化学发光免疫分析试剂盒及其制备方法。
技术介绍
癌症是目前威胁人类健康的主要致死疾病之一，癌症已超过心脑血管疾病成为致 死原因的第一位的疾病，严重危害着人民健康和生命安全，且有逐年上升的趋势。癌症的最 佳治疗时期在癌细胞转移前，此时可通过手术或药物治疗将其彻底清除。因此早期发现早 期治疗至关重要。绝大多数癌症早期患者并无任何症状，很难被发现。因此只有建立准确可 靠的早期检测方法，通过体检筛查才能发现早期病变，才有可能及时采取有效的治疗措施， 免疫分析技术为这种早期筛查提供了可能。近年来研究发现，M2型丙酮酸激酶(M2PyruVate Kinase，M2-PK)在肺癌等癌症诊断、动态监测、抗癌疗效评价及预后判断中具有广泛的应用 价值。M2型丙酮酸激酶是一种新发现的肿瘤标志物，作为肺癌新的特异性标记物来探讨 其在肺癌诊断、动态监测/抗肺癌疗效评价及预后评估等方面的作用，已成为国内外肺癌 研究的热点。丙酮酸激酶是糖酵解途径的一个关键酶，在三磷酸核苷的合成过程中也起决 定性作用。PK有两种结构基因(L基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人M2型丙酮酸激酶化学发光免疫分析试剂盒，其特征包括以下组份：①M2型丙酮酸激酶标准品；②包被有M2型丙酮酸激酶单克隆抗体的磁颗粒；③辣根过氧化物酶标记的M2型丙酮酸激酶单克隆抗体；④化学发光底物A和B；⑤白色不透明微孔板；⑥洗涤液；其中，所述包被有M2型丙酮酸激酶单克隆抗体的磁颗粒经过以下步骤制备：①取2.0ml质量含量为2.5%的磁颗粒悬浮液，磁板分离弃上清，用0.02mol/L?pH值为7.0的磷酸盐缓冲液洗磁颗粒一次；所述磁颗粒悬浮液中的液体是0.05mol/L，pH值为7.4的磷酸盐缓冲液；②将0.02mol/L?pH值为7.0的磷酸盐缓冲液与步骤①获得的磁颗粒混合使总体积为2....

【技术特征摘要】
1.一种人M2型丙酮酸激酶化学发光免疫分析试剂盒，其特征包括以下组份 ①M2型丙酮酸激酶标准品； ②包被有M2型丙酮酸激酶单克隆抗体的磁颗粒； ③辣根过氧化物酶标记的M2型丙酮酸激酶单克隆抗体； ④化学发光底物A和B; ⑤白色不透明微孔板； ⑥洗涤液； 其中，所述包被有M2型丙酮酸激酶单克隆抗体的磁颗粒经过以下步骤制备①取2.Oml质量含量为2. 5%的磁颗粒悬浮液，磁板分离弃上清，用0. 02mol/L pH值为7.0的磷酸盐缓冲液洗磁颗粒一次；所述磁颗粒悬浮液中的液体是0. 05mol/L, pH值为7. 4的磷酸盐缓冲液；②将0.02mol/L pH值为7. 0的磷酸盐缓冲液与步骤①获得的磁颗粒混合使总体积为2.0 5. Oml ； ③加入2.Omg M2型丙酮酸激酶单克隆抗体，于摇床上匀化10 20分钟； ④加入4.0 10. Omg碳二亚胺，于摇床上勻化16 20小时； ⑤用0.02mol/L pH值为7. 4的磷酸盐缓冲液洗涤2次； ⑥加入Tris-EDTA缓冲液，调节总体积至2.0ml，置于2 4°C保存。2.根据权利要求1所述的一种人M2型丙酮酸激酶化学发光免疫分析试剂盒，其特征在于所述辣根过氧化物酶标记的M2型丙酮酸激酶单克隆抗体是用下述方法制备 ①取2.Omg M2型丙酮酸激酶单克隆抗体，加入0. 5 1. Oml浓度为0. 02mol/L, pH值为7. 4的磷酸盐缓冲液溶解，2 4°C保存；②取10.Omg的辣根过氧化物酶,加入2. Oml去离子水溶解,取出0. 5...

【专利技术属性】
技术研发人员：王立凯，潘学继，黄丽娟，单存海，曹青，洪宇霞，
申请(专利权)人：天津市协和医药科技集团有限公司，
类型：发明
国别省市：