一种运用间接免疫荧光检测技术进行病毒敏感细胞克隆中筛选的方法技术

发明专利技术涉及生物技术领域，更具体的讲是一种运用间接免疫荧光检测技术进行病毒敏感细胞克隆株筛选的方法，包括以下步骤：细胞系纯净性的鉴定；细胞系中单克隆细胞株的获得；单克隆细胞株对病毒敏感性的鉴定，本发明专利技术的有益效果是：本方法检测时间短，只需3天即可对单细胞克隆对病毒敏感性进行鉴定；.操作相对简单，方法易行，可用于非致细胞病变型病毒敏感细胞株的大量筛选；结果稳定，可重复性强，与测定毒价方法效果一致。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，更具体的讲是一种运用间接免疫荧光检测技术进行病毒敏感细胞克隆株筛选的方法。
技术介绍
传统上，对于敏感细胞株的筛选是通过测定病毒毒价的方式实现的。然而，对于非致病变性的病毒，毒价的测定只能利用动物或其他方法进行，例如猪瘟兔化弱毒效价的测定。此种方法，费时费力，操作复杂，周期长，成本高，筛选效率低下。
技术实现思路
针对以上不足，本专利技术提供了一种简便、快捷的敏感细胞株的筛选方法，具体的说，通过间接免疫荧光(IFA)方法进行细胞系纯净性的鉴定和不同单克隆细胞株敏感性鉴定，代替传统的病毒毒价的测定方法，以达到快速、简便、有效筛选单克隆细胞株的目的。本专利技术是通过以下技术方案实现的一种运用间接免疫荧光检测技术进行病毒敏感细胞克隆株筛选的方法，包括以下步骤(1)细胞系纯净性的鉴定细胞的复苏培养用方瓶培养从液氮中复苏的细胞，培养条件包括pH7. O 7. 3，温度 36 37°C，培养基为细胞培养液；培养时间48 96h，细胞单层长至90% 100%，细胞密度在 3 6X 105cells/mL ； 细胞传代培养将上述步骤中长满单层的细胞用EDTA-胰酶消化分散本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种运用间接免疫荧光检测技术进行病毒敏感细胞克隆株筛选的方法，包括以下步骤：（1）细胞系纯净性的鉴定：细胞的复苏培养：用方瓶培养从液氮中复苏的细胞，培养条件包括：pH7.0～7.3，温度36～37℃，培养基为细胞培养液；培养时间48～96h，细胞单层长至90%～100%，细胞密度在3～6×105cells/mL；细胞传代培养：将上述步骤中长满单层的细胞用EDTA?胰酶消化分散，获得细胞悬液，按照1:3的比例分传至方瓶；细胞接毒：将?80℃保存的病毒抗原液4～8℃水中融化，取适量病毒液加入上述传代细胞悬液中，并保证病毒终浓度在100TCID50/mL～1000TCID50/mL，混匀，置温箱培养...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：牛成明，何洪波，陈申秒，
申请(专利权)人：山东滨州沃华生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：