一种利用激流式生物反应器悬浮培养动物细胞的工艺过程及控制方法技术

本发明专利技术公开了一种利用激流式生物反应器无血清培养动物细胞生产重组蛋白类药物的工艺过程及控制方法。该工艺采用流加基础培养液来提高细胞密度并扩大细胞培养体积。通过降低培养温度和流加浓缩的表达培养液来维持细胞密度和活率。从而高效、持续的获得重组蛋白。工艺控制方法主要针对不同细胞株生长代谢变化，对pH、溶解氧、温度变化进行在线监测；对细胞密度、活率、培养体系中葡萄糖、谷氨酰胺、氨、乳酸、渗透压进行定时检测。该方法特别适合大规模动物细胞悬浮培养。具有操作控制简单，传质传氧效率高，培养周期稳定、批次间结果差异小、生产成本低、容易实现大体积、高密度等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞工程技术，涉及动物细胞大规模培养及生产重组蛋白药物的工艺，具体涉及动物细胞无血清高密度，高表达悬浮培养工艺过程控制方法。
技术介绍
动物细胞大规模培养已成为生物制药领域最重要的关键技术之一，并随着重组治疗性蛋白类药物的广泛应用而迅速发展。目前工业化生产动物细胞表达重组蛋白治疗药物的主要方法是通过生物反应器，在体外大规模高密度培养杂交瘤细胞、工程细胞、昆虫细胞和微生物等，再通过相关的纯化手段制备重组蛋白产品。用于细胞大规模培养的生物反应器有搅拌式生物反应器，气升式生物反应器，中空纤维生物反应器，固定床式生物反应器，旋转式生物反应器，一次性生物反应器。.Cytotechnology, 1999,30 :149-158. ] SlivacI, Srcek V G, Ra(jo§ evic K, Kmetic I and Kniewald Z 2006Aujeszky’ sdisease virus production in disposable bioreact or搅拌式生物反应器的最大优点是能培养各种类型的动物细胞，培养工艺容易放大，产品质量稳定，适合于工业化生产本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用激流式生物反应器动物细胞生产重组蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1).用激流式生物反应器无血清悬浮培养动物细胞，起始接种细胞密度为0.5×106～4×106cells/ml；根据细胞密度变化流加基础培养液进行扩增培养体积，使细胞密度维持在4×106～8×106cells/ml，当培养体积扩大到反应器最大培养体积的1/2～3/4时，开始将温度下降到30～35℃并流加浓缩培养液进行表达。(2).培养过程工艺参数针对不同的细胞株生长代谢需求，通过监测细胞密度及活率，细胞溶液中渗透压，以及葡萄糖、谷氨酰胺、氨、乳酸含量，来控制流加营养物质的速率。(3).蛋白降温表达过程中细胞由对数生长...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张秀芹，刘铁成，张雪亭，王延涛，杨威，李会成，
申请(专利权)人：哈药集团技术中心，
类型：发明
国别省市：